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预染中谱蛋白Marker使用方法

预染中谱蛋白Marker使用方法

预染中谱蛋白Marker

使用方法

1. 将蛋白分子量标准从冰箱取出,融化后轻轻混匀。

2. 离心后将分子量标准直接上样。

3. 印迹实验用量:mini-gel每次加4-6μl;full length-gel每次加8-12μl。

4. 电泳肉眼观察:mini-gel每次加10-15μl;full length-gel每次加20-30μl。产品特点

实时观察电泳过程中样品的分离状况。

浓度高,用量少。

条带稳定,使用方便。

保存

-20℃贮存,保质期2年;建议分装成小份保存,减少反复冻融,使其更加稳定。

注意事项

建议此蛋白标准物适用于分析20-100kDa的蛋白样品,使用10% SDS-PAGE。

105kDa

71kDa

50kDa

35kDa

25kDa

16kDa

2kDa

彩虹130广谱蛋白marker说明书

彩虹130广谱蛋白marker说明书 货号:PR1950 规格:20T(100μL)/50T(250μL)/100T(250μL×2)/500T(250μL×10) 保存:-20℃保存,有效期至少2年。 产品特点: ●三色预染,颜色鲜亮,条带整齐,便于观察。 ●用量少,节约成本,仅5ul即可完美呈现(1.5mm,10孔梳)。 ●广谱多带,一支即可满足多种实验需求。 产品简介: 本产品包含9种彩色预染的已知分子量标准蛋白,分子量范围为15kD-130kD,每种蛋白含量约为 0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的9条彩色蛋白条带,其中70kD条带为红色,25kD条带为绿色,其余条带为蓝色。 使用说明: 1.本产品是即用型液体,可直接上样电泳。上样前无需加热,稀释或添加还原剂。 2.上样5ul,SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。 3.建议分离胶浓度为15%。 电泳示意图说明: 第1页,共2页

第2页,共2 页注意事项: 1.本产品含有较高浓度甘油,常规-20℃保存为液体状态,可直接使用。若冰箱温度不稳,导致结冰,可 适当分装后置于4℃保存,至少稳定6个月。 2.Marker分离效果与PAGE胶浓度相关,若分离胶浓度低于15%,25kD以下条带不易分离,但不影响绿色 (25KD)及以上条带。如果目的条带小于25KD,建议分离胶浓度大于或等于15%。 3.转膜效果与转膜时间有关,需根据客户目的条带大小而定,如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜 成功,属于正常现象。

鱼皮胶原蛋白美容作用

鱼皮胶原蛋白美容作用 我们知道胶原蛋白对于美容有一定的功效,很多的女性在生活中都是通过胶原蛋白来护理肌肤。生活中含有胶原蛋白的食物有很多,鱼皮胶原蛋白因为蛋白含量高,活性高而受到了人们的欢迎。很多人对于鱼皮胶原蛋白不了解,我们来看一下鱼皮胶原蛋白美容作用主要有哪些? 鱼皮胶原蛋白是一种提取深海鱼的胶原蛋白,因为深海的低温低压,使得这部胶原蛋白具有特有的物质,更好的发挥美容养颜的功效。我们在生活中选择的时候需要选择添加剂少的,更好的对皮肤负责。 鱼皮胶原蛋白美容作用?亮肤:皮肤的光泽取决于含水量,深海鱼皮胶原蛋白良好的保水能力使皮肤水润亮泽,散发健康的光彩。紧肤:当深海鱼皮胶原蛋白被皮肤吸收后,填充在皮肤真皮之间,增加皮肤紧密度,产生皮肤张力,缩小毛孔,使皮肤紧绷而富有弹性!防皱:由于胶原蛋白是皮肤主要蛋白质,当皮肤老化产生皱纹时,利用胶原蛋白可以改善,甚至去除。胶原蛋白保养品的成分为一种综合性结构体蛋白质,能有效加速真皮层细胞生长,活化表皮细胞,保持肌肤弹性及结实度,防止皱纹出现,使肌肤健康亮丽,呈现细致与透明感。 保湿:因深海鱼皮胶原蛋白与皮肤角质层结构的相似性,添加于化妆品中的胶原蛋白,它们与皮肤有很好的亲和力和相容性,能渗透入皮肤表皮层,能够形成皮膜、保护皮肤,给予肌肤滋润

与柔软性,促使其细孔收缩细致;并与角质层中的水结合,形成网状结构,锁住水分,被皮肤吸收,起到天然保湿因子作用,使皮肤丰满,皱纹舒展,有效防止老化。 以上的内容就是对于鱼皮胶原蛋白美容作用的介绍,希望能够给您带去一定的帮助。鱼皮胶原蛋白与人体的皮肤蛋白质很相似,很容易被人体吸收,能够在皮肤的表层形成保护膜,同时对于修复皮肤深层的损伤也有一定的好处,从而实现内外保养的效果。

双美胶原蛋白介绍

以下信息来自杭州新友好整形美容医院https://www.sodocs.net/doc/6012201822.html, 胶原蛋白,人体青春的守护神 从猪蹄进补,到外用化妆品、口服胶囊,再到非手术美容的填充材料,无处不见它的身影——胶原蛋白。胶原蛋白广泛分布于人体组织中(皮肤组织含50%以上),主要提供组织所需的强度及柔韧性,是人体青春的守护神。皮肤出现皱纹、松弛、老化等衰老现象主要是由于随着年龄的增长,皮肤组织内胶原蛋白的流失。 双美胶原蛋白,目前最好的高科技抗衰老产品 双美(Sunmax)1号胶原蛋白植入剂是目前唯一荣获中国食品药品监督管理局(SFDA)批准上市的胶原蛋白植入剂。 与胶原蛋白同类产品相比较,双美1号是以专利纯化制程生产,结合先进免疫修饰技术研制而成,修饰后的胶原蛋白几乎没有过敏反应的风险。另一方面,双美胶原蛋白的纤维相互交织,构成一个稳固链状支架供人体皮肤组织内新细胞生成繁殖,故效果持久恒定,一次注射后青春容颜维持高达两年以上。 双美胶原蛋白植入剂治疗原理 双美胶原蛋白是以专利纯化制程生产,结合先进免疫修饰技术,修饰后的胶原蛋白几乎没有过敏反应的风险,并且透过创新的纤维诱导技术让完整的胶原蛋白纤维更紧密的堆叠,让植入后的胶原蛋白在真皮层中可停留更长的时间。 胶原蛋白植入剂,其胶原蛋白成份为Atelocollagen,植入后对蛋白酶具适度之抗力,不会马上被分解,分散的胶原蛋白会形成一个柔软具粘性的纤维状结构,可停留于植入部位,使凹陷回复,持续修补效果。植入之胶原蛋白经过数个月后,会被人体的结缔组织同化,成为人体组织的一部份,但亦会为体内如胶原蛋白酶分解,因此具生物分解性,而不至于永久留在植入部位。 抗衰老至圣法宝——“双美”三大美肤奇迹 1、抚平皱纹,恢复青春光彩:鱼尾纹、唇纹、笑纹、额头纹、法令纹、眉间纹等 2、局部塑形,美丽立竿见影:唇形美化、耳垂增大、太阳穴填充、下巴填充、鼻梁增高等 3、保湿滋润,重回水嫩肌肤:被誉为“天然保湿因子”,使得真皮内部的胶原纤维和弹性纤维处在水分充盈的环境中,且不容易代谢和流失,肌肤立现水嫩,恒久滋润。 以上信息来自杭州新友好整形美容医院https://www.sodocs.net/doc/6012201822.html,

考马斯亮蓝染色套装使用说明

考马斯亮蓝染色套装使用说明 货号:P1305 保存:室温保存,至少一年有效。 规格:100ml+500ml 产品简介: 本考马斯亮蓝染色套装(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的 考马斯亮蓝染色和脱色方法,以考马斯亮蓝G-250为染料,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色,或Western 转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 产品内容: 考马斯亮蓝染色液100ml 考马斯亮蓝脱色液500ml 说明书1份 使用方法: 1、电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积),确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2、将凝胶置于摇床上缓慢摇动,室温染色至少2小时,低丰度蛋白染 色需4小时以上。 3、染色结束后移除染色液,染色液通常可重复利用2-3次,但染色效

果会略有影响。 4、将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中,摇床上脱色4-8小时,期间更换3-5次脱色液。 注意事项: 1.染色时间4小时以上效果最佳。 2.脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止,或延长脱色时间。 3.脱色越彻底,检测的蛋白量越低,脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。 4.脱色后,将凝胶保存在水中,拍照或扫描保存图像。或制成干胶保存。 相关试剂: P1300-500考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液 PC0020BCA蛋白浓度测定试剂盒 PR1400低分子量蛋白MARKER PR1700预染次高分子量蛋白MARKER I1020IPTG溶液(50mg/ml) A101030%丙烯酰胺(29:1) T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

彩虹245广谱蛋白marker使用说明

彩虹245广谱蛋白marker使用说明 货号:PR1920 规格:20T(100μ1)/50T(250μ1)/100T(250μ1×2)/500T(250μ1×10) 保存:-20℃保存,有效期至少2年。 产品特点: ●三色预染,颜色鲜亮,条带整齐,便于观察。 ●稳定性能突出,经检测4℃放置两年无明显降解。 ●用量少,节约成本,仅5ul即可完美呈现(1.5mm,10孔梳)。 ●广谱多带,一支即可满足多种实验需求。 产品简介: 彩虹245广谱蛋白marker包含12种彩色预染的已知分子量标准蛋白,分子量范围为 11kD-245kD,每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的12条彩色蛋白条带,其中25kD为绿色条带,75kD为红色条带,其余10条是蓝色条带。 使用说明: 1.彩虹245广谱蛋白marker是即用型液体,可直接上样电泳。上样前无需加热,稀释或添加还原剂。 2.上样5ul,SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。 3.建议分离胶浓度为15%。 电泳示意图说明:

彩虹245广谱蛋白marker经15%浓度的SDS-PAGE凝胶电泳后,转移至PVDF膜上。 注意事项: 1,本产品含有较高浓度甘油,常规-20℃保存为液体状态,可直接使用。若冰箱温度不稳,导致结冰,可适当分装后置于4℃保存,至少稳定6个月。 2,Marker分离效果与PAGE胶浓度相关,若分离胶浓度低于15%,25kD以下条带不易分离,但不影响绿色(25KD)及以上条带。如果目的条带小于25KD,建议分离胶浓度大于或等于15%。3,转膜效果与转膜时间有关,需根据客户目的条带大小而定,如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜成功,属于正常现象。 相关试剂: P10154×蛋白上样缓冲液(含DTT) P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 D106010×电泳转移缓冲液 PR1910彩虹180广谱蛋白marker

鱼胶原蛋白肽粉的功效和作用

鱼胶原蛋白肽粉的功效和作用 鱼胶原蛋白肽粉的功效和作用随着人们生活水平的不断提高,对生活的质量品位也会越来越关注,保健品的使用也就越来越广泛,不过大家知道鱼胶原蛋白肽粉的功效是什么吗?接下来妈妈网百科就来为大家介绍鱼胶原蛋白肽粉的功效吧! 1、具有迅速缓解机体疲劳、增强机体免疫力。 2、海洋鱼皮胶原肽、牛磺酸、维生素c、锌对机体、细胞免疫与体液免疫均有影响,其结果是抗体生成,白细胞介素、干扰素等细胞因子诱生增多而调节机体的免疫功能,预防及改善男性生殖系统疾病。 3、生精、固精,改善及维持弹性组织器官的正常功能。 4、促进角膜上皮损伤的修复和促进角膜上皮细胞的生长。 5、有益于运动员运动过程体力的维持和运动后体力的迅速恢复,达到抗疲劳效果。 6、改善肌肉弹性。 7、对烧伤、创伤和组织修复有明显作用。 8、保护胃黏膜及抗溃疡作用。 鱼胶原蛋白粉的六大功效1:抚平幼纹,淡斑去印 德国研究学者表明,胶原蛋白中的多肽可以抑制酪氨酸酶的活性,减少色斑的形成,并且胶原蛋白对皮肤有独特的修复作用,与周围的细胞组织相结合,有效促进皮肤细胞再生,修复表皮的

痘印痘疤。 2:保水补水,充盈润肤 胶原蛋白特有的三螺旋结构,能有效的锁住水分,形成大量的亲水基,因此,胶原蛋白有极强的储水性能,保持肌肤必要的水分补充伊乐瑞胶原蛋白,可以恢复肌肤的水润亮泽。 3:收缩毛孔,紧致肌肤 胶原蛋白被皮肤吸收后,皮肤的保水能力增加,保持皮肤的水油平衡,避免出现油脂分泌旺盛,长期堵塞、撑大毛孔的情况,并且胶原蛋白可以增加皮肤紧密度,缩小毛孔,使皮肤更紧绷而富有弹性。 4:去除黑眼圈,眼袋 胶原蛋白的流失导致眼部组织的松弛、下垂,并且由于眼周围的肤层较薄,胶原蛋白排行榜10强有些人容易造成血液聚积,产生黑眼圈,补充伊乐瑞胶原蛋白,可以使肌肤结构变紧,血液不会停留在缝隙中,黑眼圈、眼袋自然不会形成。 5:丰富结缔组织,挺拔乳房 乳房主要是由结缔组织构成,而胶原蛋白是结缔组织的主要成分,胶原蛋白与多糖蛋白相互交织成网状结构,产生一定的机械强度,补充胶原蛋白,能够恢复胶原纤维的弹性和强度,使乳房丰满挺拔。 6:修身塑形,睡眠减脂 减肥需要燃烧脂肪(分解代谢),睡前服用胶原蛋白可以使这种分解代谢的过程增加和延长,燃烧更多。 鱼胶原蛋白肽粉的用法保健品的用法对于人们来说也很

4×蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明

4×蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明 货号:P1015 规格:10ml 保存:-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少12个月有效。 产品简介: 4×蛋白上样缓冲液(含DTT)适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。 使用说明: 1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。 2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。 3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。 注意事项: 4、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右,胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。 5、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

6、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。 相关试剂: P10182×蛋白上样缓冲液(含DTT) P10174×非变性蛋白上样缓冲液 P001210×丽春红染色液 P1300-500考马斯亮蓝快速染色液 P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 PR1700预染次高分子量蛋白MARKER

PH0302-超低分子量蛋白Marker II (3.4-100kD)使用手册

PH0302|超低分子量蛋白Marker II(3.4-100kD) Ultra Low Molecular Weight Protein Marker 货号:PH0302规格:?10T(50ul)保存:Store@-20℃ ◆产品简介 本产品包含5种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.4kD-100kD。可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。 ◆使用说明 第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用;本产品为即用型,融化后既能使用,不能95℃加热处理。 一.制胶: I配制分离胶 1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。 2.加入10%APS和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。 3.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层,使凝胶表面保持平整。4.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。 表一(一块0.75mm mini胶用量) 分离胶浓缩胶 18%T,5%C/6.0ml5%T,3.3%C/2ml 40%PAA(19:1) 2.7ml/ 40%PAA(29:1)/0.25ml 4×凝胶缓冲液 1.5ml0.5ml 乙二醇(电泳级) 1.8ml/ ddH2O/ 1.25ml 10%APS50-65μl20μl TEMED6μl2μl 注:如非必须,不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。 II配制浓缩胶 去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。 1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。

服用鱼胶原蛋白的注意事项

服用胶原蛋白肽的注意事项 胶原蛋白是人体组织结构的主要成分之一,它遍及全身的各个组织器官,如:皮肤、骨骼、软骨、韧带、角膜、各种内膜、筋膜等,是维持皮肤与组织器官形态、结构的主要成分,也是修复各损伤组织的重要物质。 目前服用胶原蛋白的人是越来越多了,但是,在服用胶原蛋白的同时,也应该注意以下事项: 1、大分子胶原蛋白进入人体后需要降解为小分子肽、氨基酸才能被人体吸收,真正有效吸收的成分并不多。 2、这些食物多半脂肪含量较高,不适合经常食用。高热量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易产生自由基,加速老化。如果能少吃这一类食物,就等于减少了身体被自由基伤害的机会及皮肤出现黑斑、皱纹等的风险。 3、孕妇是不能服用胶原蛋白产品,因胶原蛋白是19种氨基酸组成的,其中有几种是不能被胎儿吸收的,容易引起第二特征过早的发育和成熟,不利于出生后的婴儿成长和发育。 4、从猪、牛上提取的胶原蛋白可以滋养皮肤保持弹性不粗糙,但含有大量脂肪,口服这类胶原蛋白容易发胖。因此建议服用鱼胶原蛋白,艾苛蜜深海鳕鱼胶原蛋白肽纯天然、无激素、不含脂肪,不会引起身体发胖。 胶原蛋白已经是每一个爱美女性朋友的美容养颜必需品,它可以让细胞丰满,水分充盈,充满弹性,细腻、光滑、润泽。 艾苛蜜专家提醒:胶原蛋白肽能加速真皮层细胞的生长,活化人体表皮细胞,保持肌肤的结实度及弹性,防止皱纹的出现。法国艾苛蜜是专为影视名人研发定制功能营养品的公司,几十年的配方研究汇集了一些精品,艾苛蜜目前就拥的一款多功能抗衰组合,其中就包含一款多功能深海鳕鱼配方型胶原蛋白肽粉---解密青春之吻,抗衰效果相当不错,它能使肌肤健康靓丽,呈现出光滑与透明感,有效的保持肌肤中的水分,让皮肤保持年轻靓丽。

次高分子量蛋白质 Marker (43kD-200kD)使用说明

次高分子量蛋白质Marker(43kD-200kD)使用说明 货号:PR1500 规格:10T 保存:-20℃可保存至少六个月。避免反复冻融,建议分装保存。 产品简介: 次高分子量蛋白质Marker包含5种蛋白质混合物,分子量范围为43kD-200kD,每种蛋白的含量约为20ug。经SDS-PAGE电泳,用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带。可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。 本产品配有一支蛋白上样缓冲液(150ul)。 使用说明: 将两支试剂开启,取110ul蛋白上样缓冲液加入蛋白Marker干粉中,混匀,取出液体,置于 1.5ml离心管中,100℃沸水浴加热5分钟,冷却后根据需要分装成小管,建议每管分装10μl,-20℃贮存,每次取一管使用。 注:如长期贮存后使用,使用前最好取分装后的小管99℃预热3分钟后再上样电泳。 用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带(见下示意图)。

注意事项: 1.建议分离胶浓度7%,浓缩胶浓度4%,制胶时先配制分离胶,聚合后再配制浓缩胶。电泳时,80v电压大约跑1小时后,待指示剂沿到达分离胶上沿时,将电压调至120v,直到电泳结束。整个电泳过程大约需3-4个小时。 2.电泳之后可将胶进行染色观察,如果使用配方进行染色时效果不好或考虑其毒性,可以选择考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液,具有染色快,无毒,灵敏性高等特点,是常规染色液的替代品。 相关试剂: P10154×蛋白上样缓冲液(含DTT) T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 P1300-500考马斯亮蓝快速染色液

鱼皮胶原蛋白工艺20130413

鱼皮胶原蛋白生产工艺 (20130413修改版) 1、清洗分拣:到货新鲜鱼皮,如为冷冻鱼皮,则在槽车内加入纯化水充分解冻, 手工去掉掺杂在鱼皮中的杂质,碎肉,鱼骨等杂质,使用pH为8—9的NaCO3(没有可以使用NaOH代替)浸泡10—15min,即拣出转入纯化水中浸泡并手工清洗,洗液使用纯化水配制,再次去掉掺杂在鱼皮中的杂质,碎肉,鱼骨等。 2、洗涤:经1步处理的鱼皮,使用纯化水清洗至pH7—7.5。 3、投料:将清洗后的鱼皮投料至水解罐,投料用水为纯化水,料水比保持在1:1.2 至1:1.5。 4、水解:使用夹套升温至100摄氏度,并保持20—30min,注意不得使用直通 蒸汽,考虑到物料在升温初期流动性差,升温前期升温速度宜慢,控制罐底层与顶层物料温差小于30℃,当罐内物料已可以随搅拌轴充分旋转后,加快升温速度。温度升温过程中随时探查罐底是否有糊锅情况发生。如在升温过程中罐内鱼皮已经破碎为小片,且大块的鱼皮达到揉捏即碎,毫无韧性的状态,通知技术部取样并考虑提前终止水解。 5、酶解:使用真空或循环水系统降温至55-60摄氏度,在pH7.5—8.0条件下(调 节前取样检测pH,并询问技术部进行pH调节要求),加入0.05%的2#号酶进行水解,水解至无肉眼可见鱼肉鱼皮(鱼鳞不计)即终止,酶解时长控制在2h以内,酶解时如果pH不低于6.0则不需要调节pH值。 6、灭活:酶解结束后即升温至90摄氏度灭活20min。 7、粗滤:使用HCl调节pH至6.0—6.5后(调节前取样检测pH,并询问技术部 进行pH调节要求),添加按料液固形物含量0.5%--1%的白土进入板框过滤间进行一次过滤,过滤后的料渣运至冷库保存。 8、精滤:进行一次过滤后的料液,并添加按料液固形物含量0.5%--1%的白土, 0.2—0.3%的活性碳,在60℃以上搅拌1h,同样调节pH6.0—6.5(调节前取 样检测pH,并询问技术部进行pH调节要求),进行二次板框过滤操作。9、浓缩:过滤后的澄清料液,在高真空、低温度条件(一效温度80℃以下), 浓缩至30%即停止浓缩。 10、喷粉:进入喷粉操作,喷粉时出风口的温度要低,控制在80℃以下。 11、包装:按蛋白粉包装形式包装,如果喷出来的粉比重很轻,可以使用万 能搅碎机粉碎一下,提高比重。

BCA微量蛋白浓度测定试剂盒使用说明

BCA微量蛋白浓度测定试剂盒 货号:PC0050 规格:500微孔(500T)/1000微孔(1000T)/2000微孔(2000T) 保质期:本试剂盒自订购之日起一年内有效。 产品内容: 包装500微孔1000微孔2000微孔保存 BCA试剂100ml2×100ml4×100ml室温 Cu试剂3ml6ml12ml室温 PBS稀释液30ml60ml120ml室温 BSA蛋白标准 0.3ml0.5ml1ml-20℃ (5mg/ml BSA) 产品简介: 碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 操作说明: 一.微孔酶标仪法 1.配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工

作液室温24小时内稳定。 2.稀释标准品:先用PBS将BSA标准品稀释至终浓度为0.8mg/ml备用。再依次稀释至80、40、20、10、5、2.5ug/ml.。 3.高浓度蛋白可将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 4.各孔加入200微升BCA工作液和40ul稀释后的蛋白或标准品溶液,对照孔加入PBS稀释液。37℃放置4小时。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。 二.分光光度计法 如没有酶标仪,在离心管中混匀样品后加入比色皿,用分光光度计比色。 采用分光光度计测定蛋白浓度方法与酶标仪法相似,只需要按照分光光度计比色皿容量要求按照比例配置相应的BCA工作液和标准品溶液。 常规比色皿用量为200ul有样本加入1mlBCA工作液或400ul样本加入2mlBCA工作液。微量比色皿用量为20样本加入100ul BCA工作液。或根据仪器情况自行调整。 附:样本及标准品稀释示意图 样本管号A B C D E PBS稀释液用量180100100100…… 标准品用量20(原液) 100 (从A管吸出) 100 (从B管吸出) 100 (从C管吸出) …… 终浓度(ug/ml)80402010…… 注意事项:

蛋白标准品(Marker)知识汇总

蛋白Marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。 在western blot 过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个Western Blot 参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量精确无误了,实验结果才有说服力,除此之外,蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用,所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。 总体来说,蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。以下是关于蛋白分子量标准的小叙: 一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准 未染色的蛋白分子量标准是最简单,也是最准确的一种。由于没有附带染料分子或者是标记分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,是精确判断蛋白大小必须的。现在的Marker多数都选用预混和的Marker,方便不同大小的蛋白比较。预混的Marker通常有几条带加倍浓度作为指示,因为混合的条带越多,越不好记,谁知道哪条是那条!数到眼都花了。所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。不过要记得,小带通常都不那么容易看清楚的。在选择上来说,当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好,越近越好。如果你的蛋白不幸在两条跨度较大Marker条带之间,选别的Marker吧。预混的Marker 使用上不如预染Marker(pre-stained)好用,因为电泳过程中完全看不到,要和目标蛋白一起等到最后染色才―开蛊‖,无法对实验起预示参照作用。完全属于―后知后觉‖型的,当然还是比―不知不觉‖不做对照的要好。 ①宽分子量蛋白标准

低分子量蛋白质Marker(14.4kD-97.4kD)使用说明

低分子量蛋白质Marker(14.4kD-97.4kD)使用说明 货号:PR1400 规格:20T 保存:-20℃可保存至少一年。避免反复冻融,建议分装保存。 产品简介: 低分子量蛋白质Marker包含6种蛋白质混合物的冻干粉,分子量范围为14.4kD-97.4kD,每种蛋白的含量约为20-30μg。经过SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶)电泳后,用考马斯亮蓝染色可以得到分布均匀密度相近的6条带。可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。 使用说明: 1.开封后,溶于400μL体积的1×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂),于沸水浴中加热5分钟,冷却后可根据需要进行小量分装,每管20μL,-20℃贮存,每次取一管使用。 2.如长期贮存后使用,使用前最好取分装后的小管沸水浴预热3-5分钟后再上样电泳,用考马斯亮蓝G-250染色后可见6条蛋白带(见下示意图)。 注意事项: 1.建议分离胶浓度12%,浓缩胶浓度5%,制胶时先配制分离胶,聚合后再配制浓缩胶。电泳时,80v电压大约跑1小时后,待指示剂沿到达分离胶上沿时,将电压调至120v,直到电泳结

束。整个电泳过程大约需3-4个小时。 2.电泳之后可将胶进行染色观察,如果使用配方进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液,该试剂具有染色快,无毒,灵敏性高等特点,是常规染色液的替代品。 相关试剂: P10154×蛋白上样缓冲液(含DTT) P10164×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂) T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 P1300-500考马斯亮蓝快速染色液

Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明

Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明 货号:PC0010 规格:2500T 保存:开封使用后请密封保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。 产品内容: 组成包装(2500微孔)保存 5×G250染色液100ml2-8℃ PBS稀释液30ml2-8℃ 蛋白标准(5mg/ml BSA)1ml-20℃产品简介: 考马斯亮蓝G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS的浓度低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween20,60,80低于0.06%。 操作说明: 一.微孔酶标仪法 1.完全溶解蛋白标准品,取10ul,稀释至250ul,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl 或PBS稀释标准品。

2.5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。 3.将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。 4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 5.各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。 6.用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。 7.根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。 二.分光光度计法 如无酶标仪,染色反应可在离心管中进行,反应液混匀后加入比色皿中,使用分光光度计测定吸光值。 步骤如下: 1.取八支(或者更多)干净的10ml离心管,标记上号。 2.取100ulBSA加入PBS2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。 3.5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取10ml5×G250染色液,加入40ml 双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。 4.按下表加入试剂(以每孔5ml计,多余的用来清洗比色皿)

中分子量蛋白Marker

中分子量蛋白Marker I 使 用 说 明 书 包 装 量: 浓 度:每种蛋白约0.1-0.2mg/ml 在1×loading Buffer 储运温度:收到产品后分装冻存,避免反复冻融降解蛋白,-20℃ (长期保存请置于-70℃ )(用于小胶5μl/次 可用20次 用于大胶10μl /次 可用10次) 制品说明:本产品是由6种蛋白质分别纯化后混合而成的蛋白质溶液,分子量范围为14KD -94KD ,经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳后,用考马斯亮蓝R -250(Coomassie Blue R-250)染色后可得清晰的7条蛋白带。建议使用分离浓度为12%~15%。 适用胶浓度:最优适用于12% (37.5:1 丙烯酰胺:双丙烯酰胺)的聚丙烯酰胺凝胶。 该Marker 也可用于8-15%的胶。胶浓度为8-10% 时蛋白Marker 中低分子量的蛋白易于同染料前沿跑在一条线上不易区分,在12-15%的胶上及梯度电泳中,所有的条带都能锐利清晰分开。 推荐上样量: 上样量 胶厚度大小 5μl 0.75mm thick mini 10μl 1.5mm thick mini 0.75mm thick large 20μl 1.5mm thick large 操作步骤: 1. 室温融解Marker 或37- 40°C 温浴几分钟使之融解,混匀均一,不要高温加热。 2. 为避免污染最好分装保存以备使用,取所需体积的Marker 置于一干净离心管中并封好口。 3. 上样并进行 SDS-PAGE 电泳。

4.该Marker适用于考马斯亮蓝, 银染或其他蛋白染色方法。 注意:银染比考马斯亮蓝染色敏感度高10~100 倍,相应的银染需要减少用量。 5.变性蛋白Marker储存于-20°C。 6.在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中不要使用该Marker,因为在该Marker的储存缓冲液中存在SDS。 质量检测: 5μl 的该Marker 用于12% 的凝胶进行SDS-PAGE电泳(mini gel)并用考马斯亮蓝R-250染色,能得到6条亮度相同的锐利条带。 NOT FOR HUMAN OR DRUG USE

鱼胶原蛋白介绍

一近年频发BSE(疯牛病、口蹄疫)危机,哺乳动物来源的胶原蛋白生物安全性受到来自全世界特别是日本、欧美等国家的质疑,哺乳动物来源的胶原蛋白存在携带各种病毒的可能性,严重威胁着人类的健康(当然不是说吃猪肉可能不安全等等,有兴趣可以咨询),欧美等国已经基本禁止哺乳动物来源的胶原蛋白应用于食品。来自鱼类的胶原蛋白则不存在上述风险,而鱼在成长期间,所有的有害物(抗生素、农药、重金属等)均累积在鱼的皮上,因此鱼鳞胶原蛋白被认为是最安全的胶原蛋白! 二、为什么是鱼鳞胶原蛋白寡肽 最新营养学研究指出:人吃进去的蛋白质是在胃内被胃液和胃酶分解成寡肽(分子量小于1000DAL)和氨基酸才能被人体吸收,而寡肽是主动吸收,氨基酸是被动吸收。当然不是说胶原蛋白和胶原多肽不能吸收,胶原蛋白和胶原多肽需要再次被胃消化才能吸收,而人体胃液对于胶原多肽的消化率不高,因此胶原蛋白和胶原多肽吸收率远低于寡肽。简单的说,你吃进去10克的胶原寡肽吸收9.5克;吃进去10克胶原多肽只吸收3克;而吃进去10克胶原蛋白只吸收0.1克,基本等于白吃; 三、为什么是纯度最高的鱼鳞胶原寡肽 1.目前国内外生产的胶原蛋白蛋白质含量基本都可以做到95%以上,请注意:蛋白质含量并不是胶原蛋白含量,试问大豆肽,鸡蛋清粉等等都可以做到95%的蛋白质含量,它们是胶原蛋白吗? 2.胶原蛋白的纯度应该是看里面的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸的含量,当然最主要的是羟脯氨酸,羟脯氨酸和脯氨酸是胶原蛋白特有的氨基酸,其他的蛋白基本不存在,而人体皮肤衰老的主要原因是缺乏羟脯氨酸和脯氨酸,因为其他的氨基酸,我们平常所吃的食物中都大量含有。 3.[圣丹兰360°鱼鳞胶原蛋白寡肽]无色无味,各项指标均达到国际标准(出口的产品自然是不用多说的),总蛋白含量超过97%,羟脯氨酸含量9.6%和脯氨酸含量10.5%,基本接近鱼鳞胶原蛋白这两种氨基酸含量的理论值,试问还有那家的胶原蛋白比我纯?(可提供权威检测报告及相关文献资料) 四鱼鳞胶原寡肽的作用及功能 特性: 1、营养性:可以给予含有胶原蛋白的皮肤层所必需的养分,使皮肤中的胶原蛋白活性加强,保持角质层水分以及纤维结构的完整性,改善皮肤细胞生存环境,促进皮肤组织的新陈代谢,增加微循环,达到滋润皮肤、延缓衰老、美容、消皱、养发的目的;

TaKaRa 蛋白质分子量标准(低)

? o Protocols o Standard Protocol o Manual/Datasheet ? Cat.# Product Size Note 3450 Protein Molecular Weight Marker (Low) 200 lanes 3451 Protein Molecular Weight Marker (High) 200 lanes 3452 Protein Molecular Weight Marker (Broad) 200 lanes Description Protein Molecular Weight Markers are designed for use in SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis. There are 3 kinds of Protein Molecular Weight Marker, Low (Molecular weight range : 14.3 - 97.2 kDa) , High (Molecular weight range : 44.3 - 200 kDa) and Broad (Molecular weight range : 6.5 - 200 kDa). Each protein is proportioned to yield uniform band intensities when perform staining Coomassie Brilliant Blue R-250 after run on SDS polyacrylamide gel. 5μl of 20-fold diluted marker is loaded per lane of SDS-PAGE minigel for standard use. In this case, this marker is sufficient for 200 lanes. Electrophoresis Result Low(Cat.# 3450) High(Cat.# 3451) Broad(Cat.# 3452) 15% SDS-PAGE 7.5% SDS-PAGE 5-20% gradientSDS-PAGE Storage

鱼皮和鱼鳞胶原蛋白及多肽的特点和应用

鱼皮和鱼鳞胶原蛋白及多肽的特点和应用 鱼鳞是鱼真皮层的变形物,占鱼体重量的1%~5%,由结缔组织构成,起到保护鱼 体免遭损害的作用。通常鱼鳞分三种:一种是板鳃鱼(如鲨鱼等)所特有的鳞;另一种是斜方型、边缘相联的硬鳞;第三种是骨鳞,这在硬骨鱼类中最多,每个鳞片可分为上下两层,上层由骨质组成,坚固脆薄,下层由纤维结缔组织相互交错而成,显得柔软以便鱼体活动,然而鱼鳞的真正构造还不太清楚,但通过X射线研究,推测与动物的骨相似,而且研究发现,鱼鳞成分和骨骼也相似,但是鱼鳞中的无机盐类含量较动物骨骼中无机盐类的含量要少得多(王彩理等,2005)。显微镜下,鱼鳞表面能看到规则的隆起线形成的鳞相,鱼鳞的纹样可以作为鱼的种类、年龄等的标记,并且鱼鳞也可被作为重金属的污染监视指标而利用。我国每年鱼的废弃物总量就达到200万t以上,其中鱼鳞约占15%,即30万t(罗红宇,2 2003)。近年来,营养学家发现,鱼鳞含有丰富的蛋白质和多种矿物质,其中有机物占41%~55%,磷酸钙38%~46%,还含少量碳酸钙、磷酸镁、磷酸钠等无机盐(刘庆慧 等,2000),鱼鳞的有机物组成中除生胶质外,大部分为鱼类特有的鱼鳞硬蛋白(Ichthylepidin)、脂肪、色素、粘液质等(王彩理和朱伯清,2004)。如果能充分利用这些成分,不仅可以提高鱼类加工的附加值,同时可减少环境污染,创造良好的经济与社会效益。1 鱼鳞的食品开发 从鱼鳞中提取鱼鳞胶在食品开发中具有广泛的应用。鱼鳞胶含有除色氨酸以外的全部必需氨基酸,若补充色氨酸,其营养价值更高,鱼鳞胶是强有力的保护胶体,乳化力强,既有利于食物消化,又可抑制牛奶、豆浆等蛋白质因胃酸而引起的凝集作用。鱼鳞胶在食品工业中可以作为增稠剂、乳化剂、稳定剂、澄清剂等,广泛应用于罐头、饮料、乳品加工、肉制品加工、果酒酿造等方面(王彩理,2002;王彩理和朱伯清,2004)。鱼鳞胶还是不可多得的滋补品,我国许多地方有食用鱼鳞胨的习惯,现代研究也表明其具有生血、养颜、美容、降低血清总胆固 醇和甘油三酸酯等众多功效。日本已经有了专门以鱼鳞胶原蛋白为原料的片剂。 保健品开发 营养学家研究发现,鱼鳞是特殊的保健品,它含有较多的卵磷脂。能把脂肪球分解成乳状液与水交融,有增强人脑记忆力、延缓脑细胞衰老的作用。鱼鳞中含有多种不饱和脂肪酸,可减少胆固醇在血管壁内沉积,促进血液循环,起着预防高血压及心脏病的作用。鱼鳞中还含有丰富的多种微量元素矿物质,尤以钙、磷含量为高。研究表明,鱼鳞含丰富的胶原蛋白(王南平和郭朋达,2004),胶原蛋白具有良好的生物学特性,是一种重要的功能性蛋白质,它与细胞增生、分化、运动、免疫、关节润滑、伤口愈合等有密切相关,可以作为组织的支持物,对细胞、组织乃至器官行使正常功能并对外伤修复具有重大影响。胶原蛋白有利于上皮细胞的增生修复,促进创面愈合,可应用于烧伤、创伤的治疗;而且胶原蛋白能诱导血小板附着,激活血液凝固因子,用于创面和外科手术的止血等。鱼鳞胶也可以作为药剂直接利用,替代来源稀少的龟甲胶,有效率在95%以上。另外,鱼鳞胶和其他明胶混合

鱼胶原蛋白肽粉作用

鱼胶原蛋白肽粉作用 鱼胶原蛋白属于肌肤的重要组成部分,它的存在犹如肌肤中的一张细密的弹力网,牢牢的锁住肌肤中的水分,支撑着整个皮肤。鱼胶原蛋白可以从动物的皮、骨,鱼鳞中提取。鱼胶原蛋白肽粉在养颜护肤方面有着广泛的应用,要想最大程度为自己所用,了解功能是必要的。那么,鱼胶原蛋白肽粉作用是什么? 鱼胶原蛋白肽粉作用 1.锁水储水:长效寡肽胶原蛋白的LOC弹力网三维锁水系统会三维度持续12小时释放大量的锁水基团牢固锁住体内供应的水分形成“真皮水库”。 2.抗皱延衰:胶原蛋白修复断裂老化的弹力纤维网重整肌肤组织结构舒展皱纹;另外还清除体内自由基、抗氧化减缓皮肤衰老。 3.抚平细纹、消除红血丝:胶原蛋白进入真皮层后能迅速填补塌陷组织收紧皮肤增强弹性平复细纹预防和消除红血丝。 4.淡斑祛斑:胶原蛋白能使细胞连接更紧密加快新陈代谢速度促进死皮脱落防止黑色素沉积令肤色白皙淡斑。 5.美白靓肤:胶原蛋白能抑制黑色素的产生防止黑色素沉积从而达到美白的目的。 6.修复黑眼圈、眼袋:促进眼周围皮肤微循环加强眼部肌肤新陈代谢使其滋润、保水改善眼袋及黑眼圈。 7.健美乳房:胶原蛋白是结缔组织的主要成分与弹性蛋白及

多糖蛋白相互交织成网状结构产生一定的机械强度承托起下垂的乳房使乳房挺拔、丰满、富有弹性。 8.分娩、术后愈合:血小板与胶原蛋白接触发生生化反应生成血纤维堵住伤口;还能刺激细胞分裂增殖、分化修复受损细胞愈合伤口。 鱼胶原蛋白肽粉应用 (1)生医材料:人工皮肤、人工食道、人工气管、烧伤保护膜 (2)医药品与医学用途:整形外科、缓释性药物、膀胱失禁用药等 (3)化妆品:护肤霜(膏)(保水性)、润发剂等 (4)食品工业:保健食品、饮料 (5)化工原料:涂料、塑料、油墨等 (6)研究用途:细胞培养用、生物感测器、生物反应器担体膜、血小板 凝集用试药。 (7)其他:胶原蛋白与树脂结合偿还香烟滤嘴与滤过剂之材料

预染超低分子量蛋白质Marker(3.3kD-31.0kD)说明书

预染超低分子量蛋白质Marker(3.3kD-31.0kD)说明书 货号:PR1900 规格:20T(200μ1) 保存:-20℃保存,有效期为一年。避免反复冻融,建议分装冻存。 产品简介: 本产品包含预染的3种多肽和2种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.3kD-31.0kD。可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经Tricine-甘油SDS-PAGE凝胶电泳时以及转移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5条蓝色的蛋白条带。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉,每种预染蛋白含量约为40μg,配有一支1×上样缓冲液。 使用说明: 1.开封后,溶于200μ11×上样缓冲液,可根据需要进行小量分装,每管10μl,-20℃贮存,每次取一管使用,避免反复冻融。 2.使用前取分装后的小管室温融化后即可上样电泳。 电泳示意图: 凝胶的配置方法: 分离胶夹层胶浓缩胶 20%/4.5ml16.5%/4.5ml15.5%/4.5ml10%/2ml4%/2ml 49.5%T3%C///0.407ml0.160ml 49.5%T6%C1.82ml1.50ml 1.395ml// 凝胶缓冲液 1.50ml 1.50ml 1.50ml0.667ml0.496ml 甘油0.48ml0.48ml0.48ml//

ddH 2 O0.70ml1.02ml1.125ml0.926ml1.344ml 10%PAGE胶凝固剂40μl40μl40μl20μl20μl PAGE胶促凝剂5μl5μl5μl3μl3μl 凝胶制备及染色注意事项: 1.先配制分离胶,聚合后再配制夹层胶,最后配制浓缩胶,3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时,30V 跑1-2h后,待指示前沿到达分离胶上沿时,把电压调至100V,至电泳结束,整个电泳过程大约需要6-8h。 2.电泳之后可将胶置于固定液中固定20min,再进行染色,能得到较好的蛋白条带;如时间不允许,也可不进行固定直接染色。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:P1300),该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等特点,是常规染色液的替代品。 3.由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。 4.由于SDS-PAGE的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000,因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围。 5.由于超低分子量多肽(3000及3000以下),极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失。 附:小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制 1.49.5%T3%C(配制夹层股和浓缩胶) Acr48g Bis 1.5g 用ddH 2 0溶解后定容至100ml 2.49.5%T6%C(配制分离胶) Acr46.5g Bis 3.0g 用ddH 2 0溶解后定容至100ml 3.凝胶缓冲液

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