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Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明

Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明
Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明

Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明

货号:PC0010

规格:2500T

保存:开封使用后请密封保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。

产品内容:

组成包装(2500微孔)保存

5×G250染色液100ml2-8℃

PBS稀释液30ml2-8℃

蛋白标准(5mg/ml BSA)1ml-20℃产品简介:

考马斯亮蓝G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS的浓度低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween20,60,80低于0.06%。

操作说明:

一.微孔酶标仪法

1.完全溶解蛋白标准品,取10ul,稀释至250ul,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl 或PBS稀释标准品。

2.5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。

3.将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。

4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

5.各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。

6.用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。

7.根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

二.分光光度计法

如无酶标仪,染色反应可在离心管中进行,反应液混匀后加入比色皿中,使用分光光度计测定吸光值。

步骤如下:

1.取八支(或者更多)干净的10ml离心管,标记上号。

2.取100ulBSA加入PBS2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。

3.5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取10ml5×G250染色液,加入40ml 双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。

4.按下表加入试剂(以每孔5ml计,多余的用来清洗比色皿)

离心管号123456

7(样品管1)8(样品管2)9(样品管3)

标准蛋白BSA 0ul 100ul 200ul 300ul 400ul 500ul

500ul 适当稀释的样品1500ul 适当稀释的样品2……

PBS 500ul 400ul 300ul 200ul 100ul 0ul 0ul 0ul 0ul 1XG250染色液

5ml

5ml

5ml

5ml

5ml

5ml

5ml

5ml

5ml

5.反应3分钟后测OD 值。为了实验的准确性,可每间隔2分钟加一管染色液,每间隔2分钟测一管OD 值。如下表:

离心管号12345678……加染色液(分钟)

024********……测OD 值

3

5

7

9

11

13

15

17

……

此图为伯乐酶标仪680,单波长,570nm 测得。室温反应三分钟

相关试剂:

PC0001BSA 标准品(5mg/ml )

PC00155×G250(蛋白定量用)

PC0021BCA试剂

PC0030Lowry法蛋白浓度测定试剂盒

PC0020BCA法蛋白浓度测定试剂盒

R0010高效RIPA组织/细胞快速裂解液PR1600预染低分子量蛋白MARKER

R0050核蛋白抽提试剂盒

丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求sainuopu

丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(丙氨酸底物法) 适用范围:用于体外定量测定人体血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。1.1 试剂盒包装规格 试剂1:1×25ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml; 试剂1:3×40ml,试剂2:3×8ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml; 试剂1:2×400ml,试剂2:1×160ml;试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。 1.2 试剂盒主要组成成分 2.1 外观 试剂1:无色液体;试剂2:无色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不小于1.0。 2.3.2试剂空白吸光度变化率 在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.004。

2.4 分析灵敏度 测定活性为50U/L样本时,吸光度变化率(ΔA/min)应不小于0.014。 2.5 线性范围 在(0,600)U/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.990。在(100,600)U/L 范围内的线性相对偏差不大于±10%;测定结果(0,100]U/L时线性绝对偏差不大于±10 U/L。 2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。 2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于6%。 2.8 准确度 相对偏差:相对偏差应不超过±15%。 2.9 稳定性 效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃下有效期为12个月,取失效期的试剂盒进行检测,试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。

血清铁浓度检测试剂盒说明书

货号:MS2802 规格:100管/96样 血清铁浓度检测试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: 血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。 测定原理: 亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。 自备实验用品及仪器: 离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。 试剂组成和配置: 试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入15mL蒸馏水充分溶解。 试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入469μL冰醋酸,加入15mL蒸馏水充分溶解。 标准液:液体×1 支(EP管),100μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。 测定: 1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到520nm,蒸馏水调零。 2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。 3. 空白管:取EP管,依次加入125μL蒸馏水,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm 测定吸光度,记为A空白管。 4. 标准管:取EP管,依次加入125μL标准液,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A标准管。 5. 测定管:取EP管,依次加入125μL血清,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧,置 于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A测定管。注意:空白管和标准管只需测定一次。 血清铁浓度计算公式: 血清铁含量(μmol/dL)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总=10× (A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) C 标准液:100 μmol/L Fe 3+ 标准液;V 总:1 dL=0.1 L。 注意事项: 1、血清铁含量少,所用器皿(EP 管)需要注意,避免被铁污染。 2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。 3. 最低检出限为1μmol/L。 第1页,共1页

血钙浓度检测试剂盒说明书 微量法

血钙浓度检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。货号:BC0725规格:100T/96S 产品内容: 试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存。试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体×1瓶(空瓶,试剂自备)。取15mL 试剂瓶,依次加入9mL 无水甲醇和1mL 丙酮,盖紧混匀即可。 标准液:液体0.5mL×1支,2μmol/mL CaCl 2?2H 2O 溶液,4℃保存。临用前进行5倍稀释得到0.4μmol/mL 标准溶液。产品说明: 血钙几乎全部存在于血浆中,所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式,其中只有离子钙直接起生理作用,它与结合钙处于动态平衡,并受血液pH 的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关,过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。 在强碱溶液中游离钙与GBHA 反应生成红色钙-GBHA 复合物,在520nm 有吸收峰;通过测定520nm 吸光度,计算游离钙浓度。自备仪器和用品: 可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、无水甲醇、丙酮和蒸馏水。操作步骤: 1.分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长到520nm,蒸馏水调零。 2.加样表: 名称(μL) 空白管标准管测定管血浆--12蒸馏水12--0.4μmol/mL 标品 -12 -

试剂一505050 试剂二505050 试剂三100100100混匀;静置5min后于520nm测定吸光度A,记为A测定管、A空白管、A对照管。血钙浓度计算: 血钙含量(μmol/dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×100 =40×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) C标准液:0.4μmol/mL;100:单位换算系数,1dL=100mL。 注意事项: 1、宜早晨空腹采血,并且采血后应该尽快完成测定; 2、尽量在10min内完成测定; 3、因反应完成后需尽快测定,使用微量比色皿时,建议每批次测定5-10个样本; 4、若A测定管高于0.8,建议用蒸馏水稀释后测定。

血氨含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

血氨含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4380 规格:50T/48S 产品简介: 血氨主要来源是内源性氨和外源性氨。氨在血中保持恒定状态,即血氨的来源和去路保持动态平衡。氨是有毒物质,主要在肝脏行代谢解毒。当肝功能严重损害时,氨不能被解毒。氨在中枢神经系统聚集,从而导致肝性脑病。 本法根据氨的靛酚兰反应原理,通过蛋白沉淀剂将血清(浆)中蛋白沉淀后,利用酚-次氯酸盐直接显色法测定血氨,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比,在630nm处有特殊吸收峰,据此可由吸光值计算出样品中血氨的含量。 试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、蒸馏水、EP管。产品内容: 提取液一:液体40mL×1瓶,4℃保存; 提取液二:液体40mL×1瓶,4℃保存; 试剂一A液:液体7mL×1瓶,4℃保存; 试剂一B液:液体28mL×1瓶,4℃保存;临用前将A液与B液按照体积比1:4混匀,根据试验所需量现配现用; 试剂二:液体35mL×1瓶,4℃保存; 标准品:液体1mL×1支,100μmol/ml氮标准液。 操作步骤: 一、适用范围 本试剂盒可测各种动物血清(浆)等样本中血氨的含量; 二、测定步骤:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至630nm,蒸馏水调零。 2、标准品的准备:将100μmol/mL的氮标准液用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μmol/mL的标 准溶液备用。 3、操作表:(在1.5mL EP管中操作) 试剂名称(μL)空白管测定管标准管 血清(浆)200 标准品稀释液200 蒸馏水200 提取液一500500500 提取液二500500500 充分混匀,3500rpm离心10min,取上清待测 上清液400400400 试剂一400400400 试剂二400400400 充分混匀,37℃水浴20min 取1mL反应液,于1mL玻璃比色皿中测定630nm处吸光值A,分别记为A空白管、A测定管、A标准管。计算ΔA=A测定管-A空白管,ΔA标准=A标准管-A空 白管。 三、血氨含量含量计算 1、标准曲线的绘制: 以各个标准溶液的浓度为x轴,其对应的ΔA标准为y轴,绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将ΔA带入方程得到x(μmol/mL) 2、血氨含量的计算: 血氨含量(μmol/mL)=x×V样÷V样=x。 V样:加入的样品体积,0.2mL。 注意事项 1.同一批检测样本需配1-2个空白管。 2.试剂一配置后尽快使用,若发现变色则不能使用。 3.所用器材和取血装置均应无氨;采血后应立即测定,不能立即测定2-8℃可保留2h;样本禁止溶血。

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法)产品技术要求huayuyikang

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中铁的含量。 1.1 产品型号/规格 试剂1:1×20 ml、试剂2:1×5 ml;试剂1:1×40 ml、试剂2:1×10 ml;试剂1:2×40 ml、试剂2:2×10 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:4×10 ml;试剂1:4×60 ml、试剂2:2×30 ml;试剂1:1×80 ml、试剂2:1×20 ml;试剂1:2×80 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:5×80 ml、试剂2:5×20 ml;试剂1:3×60 ml、试剂2:1×45 ml;试剂1:6×70 ml、试剂2:3×35 ml;试剂1:5×40 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:4×80 ml、试剂2:4×20 ml;试剂1:4×50 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:8×50 ml、试剂2:2×50 ml;试剂1:8×16.8 ml、试剂2:8×4.2 ml。 1.2 划分说明 试剂1:醋酸缓冲液 0.2 mol/L 表面活性剂适量 稳定剂适量 试剂2:PAPS 2.6 mmol/L 2. 性能指标 2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;中文包装标签应清晰、准确、牢固。 2.1.2 试剂1应为无色澄清液体;试剂2应为棕色液体。 2.2 净含量

不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在光径1 cm、主波长578 nm下,以蒸馏水为检测样本时,吸光度应不大于0.300 。 2.4 分析灵敏度 铁含量为30.00 μmol/L时,测定吸光度差值(△A)应大于0.080。 2.5 线性范围 铁试剂在线性范围(0~120] μmol/L内: (a)回归系数r应不小于0.990; (b)在(0~12.0 ] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不大于±1.2 μmol/L;(c)在(12.0~120]范围内,线性相对偏差应不大于±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1 重复性 变异系数(CV)均应不大于5%。 2.6.2 批间差 相对偏差(R)应不大于5%。 2.7 准确度 采用GBW09152 冷冻人血清中无机成分分析标准物质对试剂盒进行测试,相对偏差应不超过±10%。 2.8 稳定性 铁试剂盒贮存于2 ℃~8 ℃、避光环境中,有效期为12个月。有效期满后应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

人类K-ras基因突变检测试剂盒说明书

人类K-ras基因突变检测试剂盒(PCR-熔解曲线法)说明书 【产品名称】 通用名:人类K-ras基因突变检测试剂盒(PCR-熔解曲线法) 英文名:Diagnostic kit for Mutations of Human K-ras Gene (PCR-Melting Curve Analysis) 【包装规格】 20测试/盒 【预期用途】 K-ras基因位于12号染色体短臂上,是重要的癌基因之一,编码一种21kD 的kras蛋白,参与细胞内的信号传递,主要包括PI3K/PTEN/AKT 和 RAF/MEK/ERK信号转导途径,这些转导途径是当前肿瘤靶向药物研究的热点,靶向药物通过抑制这些途径发生药理作用。K-ras基因第12和13密码子发生突变,将导致kras蛋白变异并处于持续激活状态,使药物失效。。据中国2010版《肿瘤学临床实践指南》,在一项包含101例肺腺癌亚型细支气管肺泡癌患者的回顾性研究中,所有患者均接受厄洛替尼单药一线治疗。K-ras突变者无一例缓解(0/18),而无K-ras突变者则有20例缓解(20/62,32%),差别有统计学意义(P <0.01)。因此,指南建议,非小细胞肺癌和结直肠癌患者使用靶向药物前应进行K-ras基因突变状态的检测。 本试剂盒以人非小细胞肺癌、结直肠癌肿瘤组织切片提取的基因组DNA为检测样本,用于检测肿瘤组织K-ras基因第12,13密码子的12种体细胞突变(表1),提供突变状态的定性结果。为临床肿瘤靶向药物的个体化用药提供辅助诊断依据,本品适用于进入个体化靶向治疗疗程前的患者使用。 【检验原理】 本试剂盒基于实时PCR平台,结合了特异引物、荧光探针和熔解曲线技术,定性检测DNA样品中K-ras基因12,13密码子是否存在突变。用一对K-ras基因特异引物,该引物可

脯氨酸(Pro)含量测定试剂盒使用说明

脯氨酸(Pro)含量测定试剂盒使用说明 分光光度法50T/48S 货号:BC0290 测定意义: 脯氨酸(Pro)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,逆境条件下,植物体内Pro 含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。 测定原理: 用磺基水杨酸(SA)提取Pro,加热处理后,Pro与酸性茚三酮溶液反应生成红色;加甲苯萃取后,在520nm测定吸光度。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰乙酸、甲苯、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制: 提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:冰乙酸4℃保存。(自备) 试剂二:液体45mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:甲苯4℃保存。(自备) 标准品:脯氨酸10mg,4℃保存。

样品测定的准备: 1、细胞、细菌或组织样品的制备: 细菌或细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清;按照每100万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次),之后置沸水浴振荡提取10min;10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。 组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;之后置沸水浴振荡提取10min,10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。 2、血清(浆)样品:取100μL血清(浆)加入1mL提取液,充分混匀,之后置沸水浴振荡提取10分钟,10000g,常温离心10分钟,取上清,冷却后待测。 3、标准品的处理:称取1mg,将标准品稀释为15、10、8、6、 4、2、1、0g/ml。 测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至520nm,蒸馏水调零。 2、取0.5mL上清液(或稀释后的标准品)+0.5mL试剂一+0.5mL试剂二于有盖试管中,置沸水浴中保温30min(盖紧,防止水分散失),每10min振荡一次。 3、待冷却后,在试管中加入1mL试剂三,振荡30s,静置片刻,使色素转至试剂三中;吸取0.8mL-1mL上层溶液于1mL玻璃比色皿中,用试剂三调零,于520nm波长处比色,记录吸光值。 4、根据标准品吸光值和浓度,建立标准曲线。 Pro含量计算: 1、通过标准曲线计算样品脯氨酸含量(y为脯氨酸含量,μg/mL;x为OD值)

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求九州泰康

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中的总铁结合力。1.1包装规格 试剂Ⅰ(R1):60mL×3、试剂Ⅱ(R2):20mL×3、试剂Ⅲ(R1):60mL×3、试剂Ⅳ(R2):20mL×3; 试剂Ⅰ(R1):60mL×2、试剂Ⅱ(R2):20mL×2、试剂Ⅲ(R1):60mL×2、试剂Ⅳ(R2):20mL×2; 试剂Ⅰ(R1):60mL×1、试剂Ⅱ(R2):20mL×1、试剂Ⅲ(R1):60mL×1、试剂Ⅳ(R2):20mL×1; 试剂Ⅰ(R1):45mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×1、试剂Ⅲ(R1):45mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×1; 试剂Ⅰ(R1):90mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×2、试剂Ⅲ(R1):90mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×2。1.2主要组成成分

2.1 外观 试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;试剂均为澄清溶液,无未溶解物。2.2 装量 试剂瓶内试剂的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在波长A600nm,记录吸光度值,试剂空白吸光度(R1+R2)不超过0.80A,试剂空白吸光度(R3+R4)不超过0.80A。 2.4 分析灵敏度 Fe:测试浓度100μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 UIBC:测试浓度50μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 2.5 线性 2.5.1铁离子: 在[1,120]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,120]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%; 2.5.2不饱和铁: 在[1,80]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,80]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%。 2.6 重复性 2.6.1批内重复性

glp-1试剂盒说明书

人胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA 定量检测试剂盒 点击放大 产品型号: 48T/96T 产品报价: 产品特点: 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法 (ELISA ),定量检测人血清、血浆及相关液体样本中 胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。 人胰高血糖素样肽1(GLP --1)定量检测试剂盒(ELISA ) 使用说明书 【试剂盒名称】 人胰高血糖素样肽1(GLP-1)定量检测试剂盒(ELISA ) 【试剂盒用途】 定量检测人血清、血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量。 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA )。将标准品、待测样本加入到预 先包被人胰高血糖素样肽1(GLP-1)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤 除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加 入底物A 、B ,底物(TMB )在辣根过氧化物酶(HRP )催化下转化为蓝色产物,在酸的作 用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人胰高血糖素样肽1(GLP-1)浓度呈正相关,450nm 波 长下测定OD 值,根据标准品和样品的OD 值,计算样本中人胰高血糖素样肽1(GLP-1)含 量。 【试剂盒组成】

1 酶标包被板12孔×8条7 显色剂A液6mL 2 标准品0.3mL×6管8 显色剂B液6mL 3 20倍浓缩洗涤液25mL 9 终止液6mL 4 样本稀释液6mL 10 说明书1份 5 特殊稀释液6mL 11 封板膜2张 6 酶标试剂6mL 12 密封袋1个 备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:8、4、2、1、0.5、0.25pmol/L 【需要而未提供的试剂和器材】 1、37℃恒温箱 2、标准规格酶标仪 3、精密移液器及一次性吸头 4、蒸馏水 5、一次性试管 6、吸水纸 【操作步骤】 1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。 2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。 4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸 上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

酪氨酸解氨酶(TAL)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

酪氨酸解氨酶(TAL)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4060 规格:50T/48S 产品内容: 提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存。临用前每瓶加入5mL双蒸水和20μL浓HCl充分溶解待用。现配现用。产品说明: 酪氨酸解氨酶(TAL)广泛存在于植物和微生物中,是苯丙氨酸次生代谢途径的关键酶之一。TAL能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)直接将酪氨酸转化为香豆酸,香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物。 TAL能够分解酪氨酸产生香豆酸,其在310nm下有吸收峰,根据吸光度的变化率可计算出TAL活性。 自备实验用品及仪器: 紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰、浓盐酸和蒸馏水。 操作步骤: 一、样本处理: (1)组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 (2)细胞或细菌:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照每500万细胞或细菌加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。12000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 二、测定步骤:

(1)紫外分光光度计预热30min,波长调至310nm。蒸馏水调零。 (2)加样表:在1mL石英比色皿中分别加入 试剂名称(μL)测定管 试剂一700 试剂二200 样品100 充分混匀后立即测定10s时在310nm下的吸光度,记为A1,之后迅速将其放入37℃水浴或37℃培养箱中3min。然后迅速拿出擦净后测定190s时的吸光度,记为A2。计算ΔA=A2-A1。 三、TAL活力计算: 1、按蛋白浓度计算: 单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟在310nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活性单位。 TAL(U/mg prot)=ΔA÷0.01×V反总÷(V样×Cpr)÷T=333×ΔA÷Cpr。 2、按样本鲜重计算: 单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟在310nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活性单位。 TAL(U/g鲜重)=ΔA÷0.01×V反总÷(W÷V提取×V样)÷T=333×ΔA÷W。 3、按细胞或细菌个数计算: 单位的定义:每104个细胞或细菌在反应体系中每分钟在310nm下吸光度变化0.01定义为一个酶活性单位TAL(U/104cell)=ΔA÷0.01×V反总÷(500÷V提取×V样)÷T=0.667×ΔA。 V反总:反应总体积,1mL;V样:加入的样品体积,0.1mL; Cpr:样品蛋白浓度,mg/mL;W:样品质量,g; V提取:提取液体积,1mL;500:500万个细胞; T:反应时间,3min。 注意事项: 1、当ΔA大于0.2或者A1大于1.5时,建议将样品用蒸馏水稀释后测量;ΔA过小时,建议增加酶促反应时间 (5min或10min)或增加加入的样品体积来测定。

铁测定试剂盒(亚铁嗪法)产品技术要求lepu

铁测定试剂盒(亚铁嗪法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中铁的浓度。1.1规格 试剂1: 1×30mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×60mL,试剂2: 2×20mL; 试剂1: 1×50mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 1×40mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 1×20mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 2×10mL; 试剂1:3×28mL,试剂2:3×7mL; 试剂1:1×4L,试剂2:1×1L; 试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分: 试剂2主要组分: 2.1 净含量

应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1应为无色或浅色澄清液体,试剂2应为浅色或橙色澄清液体。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 在600nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.5; 2.4 分析灵敏度 测试25μmol/L的被测物时,吸光度变化(ΔA)应不低于0.005. 2.5 准确度 用参考物质(GBW09152)对试剂(盒)进行测试,相对偏差不超过±5%。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过5%。 2.7 线性 2.7.1在[1,100]μmol/L 区间内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2[1,8)μmol/L区间内绝对偏差不超过±0.64μmol/L;[8,100]μmol/L区间内相对偏差不超过±8%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差≤6%。 2.9 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书

货号: QS1807 规格:50管/24样谷胺酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书 可见分光光度法 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 测定意义: GS(EC6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。 测定原理: GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在540nm处有最大吸收峰,可用分光光度计测定。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制: 提取液:30mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:10mL×1瓶,-20℃保存。 试剂二:10mL×1瓶,-20℃保存。 试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。用时每瓶加入5mL蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存。 试剂四:10mL×1瓶,4℃避光保存。 样本测定的准备: 1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。 第1页,共2页

组织铁含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

组织铁含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4350 规格:50T/48S 产品内容: 提取液:液体55mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:粉剂×2瓶,4℃保存;临用前配制,加入7.5mL蒸馏水充分溶解,试剂一变黑后则不能使用; 试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存;临用前配制,加入375μL冰醋酸,加入12mL蒸馏水充分溶解;溶解后4℃保存一周; 标准液:液体3mL×1瓶,1μmol/mL Fe3+标准液,4℃保存;临用前稀释8倍即0.125μmol/mL的标准溶液进行实验,现用现配。 产品说明: 铁是人体必须的微量元素之一,它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分,帮助氧的运输,促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱,并影响机体的免疫功能。 亚硫酸钠还原Fe3+生成Fe2+,Fe2+进一步与2,2’-联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长吸光度即可计算铁含量。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿、冰和蒸馏水。 测定操作: 1、样本处理:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。4000g4℃离心10分钟,取上清。 2、操作步骤: (1)可见分光光度计预热30min,波长调至520nm。蒸馏水调零。 (2)加样表: 第1页,共2页

加入试剂(μL)空白管测定管标准管蒸馏水400-- --400 0.125μmol/mL标准 液 样本-400- 试剂一200200200 试剂二400400400 混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却;加入200μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液800μL,加入1mL玻璃比色皿,于520nm立即测定吸光度,分别记为A空白管,A测定管,A标准管,计算ΔA标准=A标准管-A空白管,ΔA测定=A测定管-A空白管。 3、组织铁含量计算: (1)按组织鲜重计算: 组织铁含量(μg/g鲜重)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷W = 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W (2)按组织蛋白浓度计算 组织铁含量(μg/mg prot)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷(Cpr×V提取) = 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。 C标准液:0.125μmol/mL Fe3+标准液;55.845:Fe的相对分子质量,55.845μg/μmol;Cpr:样品蛋 白浓度,mg/mL;W:样品质量,g;V提取:提取液体积,1mL。 注意事项: 1、当ΔA大于1时,建议将样品用提取液稀释后进行测定;ΔA过小时,可增加酶促反应时间(1h或2h)或 增加加入的样品体积来测定。 2、试剂一溶解变黑后则不能使用;试剂二有毒性,做好防护措施。 第2页,共2页

柠檬酸(citric acid, CA)含量测定试剂盒说明书

货号:MS2101 规格:100管/96样柠檬酸(citric acid, CA)含量测定试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: CA是生物体内常见的有机酸,是重要的食品风味物质。此外,CA是三羧酸循环第一步反应的产物。 测定原理: 酸性条件下,柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。 自备实验用品及仪器: 低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 试剂组成和配置: 试剂一:液体×2瓶,4℃保存。 试剂二:液体×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体×1管,-20℃保存。 试剂四:粉剂×1管,室温保存。临用前配制,加入2mL试剂一,充分溶解。 试剂五:液体×1管,4℃避光保存。 标准品:液体×1管,250μmol/L柠檬酸标准液,4℃保存。 样品中柠檬酸提取: 1.液体样品中柠檬酸提取:取0.1mL液体加试剂一0.9mL,充分混匀,11000g,4℃离心10min, 取上清液,待测。 2.组织中柠檬酸提取:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约 0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。11000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。 3.线粒体中柠檬酸提取:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取 约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,600g/min,4℃离心5min;取上清至另一EP管中,11000g,4℃离心10min,弃上清(此上清液可用于细胞质CA含量测定);向沉淀中加试剂二200μl,以及试剂三2μl,充分悬浮溶解,11000g,4℃离心10min,取上清液,待测。 4.细菌、真菌中:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议 500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);11000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。 测定操作: 1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到545 nm,蒸馏水调零。 2. 试剂一置于30℃水浴中预热30min。 3. 空白管:取0.5 mL EP管,依次加入20μL蒸馏水,140μL试剂一,20μL试剂四,20μL 试剂五,混匀后室温静置30min,于545nm测定吸光度,记为A空白管。 第1页,共3页

氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求艾威德

氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中氨的含量。 1.1 包装规格 a) 试剂1:1×25mL 试剂2:1×5mL b) 试剂1:2×45mL 试剂2:1×18mL c) 试剂1:4×50mL 试剂2:2×20mL d) 试剂1:2×100mL 试剂2:2×20mL 1.2 主要组成成分 1.2.1试剂1主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L α-酮戊二酸(α-KG)10 mmol/L 还原型辅酶II(NADPH)0.1 mmol/ L 乙二胺四乙酸二钠(EDTANa ) 5.3 mmol/ L 2 表面活性剂及稳定剂适量 1.2.2试剂2主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 谷氨酸脱氢酶(GLDH)100 KU/L 表面活性剂及稳定剂适量 2.1 外观 试剂1应为无色澄清液体;试剂2应为无色澄清液体。 2.2 试剂装量

应不低于试剂瓶标示装量。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 在340nm波长处测定试剂空白吸光度,应≥1.0。 2.3.2试剂空白吸光度变化率 在340nm波长处测定其空白吸光度变化率|△A/min|<0.05。 2.4 分析灵敏度 测定AMM含量为88 μmol/L样本时,其|△A/min|应≥0.005。 2.5 线性范围 2.5.1在(2,300)μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 2.5.2测试浓度在(2,30] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不超过±3 μmol/L;测试浓度在(30,300)μmol/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1重复性:用三个水平质控血清重复测试其变异系数(CV)应不超过5%。 2.6.2批间差:抽取3个不同批号试剂,对同一份样本进行重复测定,相对极差≤10%。 2.7 准确度 在样本中加入一定量的纯品,计算回收率,应在85%~115%范围内。 2.8 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

铁测定试剂盒(亚铁嗪法)1产品技术要求zhongshengbeikong

铁测定试剂盒(亚铁嗪法) 适用范围:本产品与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用,用于体外定量测定人血清中铁的浓度。 1.1包装规格 液体双剂型(液体Ⅰ型) 试剂1(R1):55mL×2,试剂2(R2):15mL×2; 试剂1(R1):80mL×2,试剂2(R2):20mL×2。 1.2主要组成成分 1.2.1 试剂1(R1)(液体) 酸性缓冲 液0.4mol/L 1.2.2 试剂2(R2)(液体) 抗坏血酸57mmol/L 亚铁嗪 5.0mmol/L 2.1 外观 试剂盒中各组件的外观应满足: 2.1.1 试剂1(R1)应为无色透明液体,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损; 2.1.2 试剂2(R2)应为淡黄色透明液体,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损。 2.2 净含量

液体试剂净含量应不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在波长570nm(光径1cm)处,试剂空白吸光度(A)应≤0.08。 2.4准确度 测定GBW09152,相对偏差应不超过±15%。 2.5分析灵敏度 对应于浓度为 17.9μmol/L的Iron所引起的吸光度差值(△A)的绝对值应在0.010~0.050的范围内。 2.6重复性 重复测试高、中、低浓度样本,变异系数(CV)应≤10%。 2.7批间差 测定同一样本,批间差(R)应≤10%。 2.8线性范围 在[1.0,179]μmol/L范围内,线性相关系数(r)应≥0.990; 在(20,179]μmol/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%; 在[1.0,20]μmol/L范围内,线性绝对偏差应不超过±2μmol/L。 2.9试剂稳定性 2.9.1试剂效期稳定性: 原包装的试剂盒在2℃~8℃避光贮存,有效期为12个月。试剂有效期满后3个月以内,试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。2.9.2开盖稳定性:

试剂盒使用说明书

牛气肿疽(symptoinatic anthrax)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)水平。用纯化的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入牛气肿疽(symptoinatic anthrax),再与HRP标记的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)浓度。 试剂盒组成: 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份 封板膜2片(48)2片(96) 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:1800pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分

半胱氨酸(Cys)含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

https://www.sodocs.net/doc/5d8219380.html, 半胱氨酸(Cys)含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。 货号:BC0180 规格:50T/48S 产品内容: 提取液:液体25mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:液体45mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。用前1天,向试剂二中加5mL蒸馏水充分溶解,再加磷酸1.25mL,混匀后盖紧(防止水分散失)沸水浴2h;冷却后加20mL蒸馏水,4℃可保存2周。 标准品:粉剂×1支,10mg半胱氨酸,4℃保存。 产品说明: 蛋白质含有三种含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和半胱氨酸(Cys)。其中,Cys是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸,从甲硫氨酸转化而来,并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成,经常是蛋白质活性中心的组成部分,还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外,Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面,在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性,并且补充巯基,以维持皮肤的正常代谢,调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。 Cys还原磷钨酸生成钨蓝,在600nm处有吸收峰;通过600nm吸光度,计算Cys含量。 试验需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、低温离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、磷酸和蒸馏水。 操作步骤: 一、半胱氨酸提取: 1、液体样品中半胱氨酸提取:取0.2mL液体样品,加提取液0.3mL,充分混匀,11000rpm4℃离心10min, 取上清液,待测。 2、组织中半胱氨酸提取:称取约0.2g组织,加入0.5mL提取液,冰上充分研磨,11000rpm4℃离心

BCA蛋白浓度测定试剂盒完整版

BCA蛋白浓度测定试剂盒 说明 23225蛋白质化验试剂盒:为500试管或5000微孔板的检测提供充足的试剂 23227蛋白质化验试剂盒:为250试管或2500微孔板的检测提供充足的试剂 试剂盒组分: BCA 试剂A,1000 mL (No. 23225产品中) 或500mL ( No. 23227产品中),碳酸钠,碳酸氢钠,二喹啉甲酸,酒石酸钠溶于0.1 M氢氧化钠中。 BCA 试剂B , 25 mL, 包括4%硫酸铜 一次性标准白蛋白, 2mg/ mL, 10 × 1 mL 安瓿, 包含2 mg/ mL牛血清白蛋白(BSA) 存在于0.9% 盐和0.05%叠氮化钠中。 储存:以上试剂保持在室温下储存和装运 注意:如果试剂A 或试剂 B 在低温下运输或长期储存时出现沉淀现象,可以通过缓慢加温或轻轻搅拌溶液使沉淀物溶解。当试剂变色或确定微生物污染时请丢球试剂盒。 目录 介绍 (1) 准备标准试剂和工作试剂 (2) 准备试管 (3) 准备微型版 (3) 故障检修 (4) 有关美国热电其他产品 (5) 附加信息 (5) 参考文献 (6) 介绍 美国热电(Thermo)公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒是基于二喹啉甲酸(BCA)通过比色检测和定量测定总蛋白的洗涤剂兼容配方。该方法通过碱性介质中的一种蛋白结合了Cu2使其显著减少转变为Cu1 (缩二脲反应)。用一种含二奎琳甲酸的试剂选择性的比色法高敏感的比色杯中的Cu1. 这种测定方法的紫色色反应产物是通过BCA的两个分子和亚铜离子螯合作用形成的。这种水溶性复合物在562nm 处有强吸收峰。在大的活性范围内(20-2000μg / mL)几乎同蛋白浓度增加呈线性关系。BCA 法不是真正的终点的方法;也就是说,最终颜色继续发展。孵化之后, 继续的颜色发展速度是足够慢以允许一起进行测定大量样本。 大分子结构的蛋白质,肽键的数量和存在的四个特定氨基酸(半胱氨酸,胱氨酸,色氨酸和酪氨酸)据说是与BCA形成颜色产物的原因。因此,蛋白浓度的测量通常要参照标准的一个常见的蛋白质如牛血清白蛋白。一系列已知浓度的蛋白质稀释液是为与之相近的未知蛋白质浓度测定准备的。因为每一个未知浓度的测定都需要基于标准曲线。如果需要将一个未知蛋白精确定量,选择一个与未知蛋白特性相似的标准蛋白是可取的。例如,当测定免疫球蛋白时牛血清丙种球蛋白可以被当做标准蛋白。以下给出了两种检测过程: 其中,试管程序需要一个较大的体积(0.1毫升)的蛋白质样品。然而,因为它使用了一个样品比例为1:20的工作试剂(v / v),所以将干扰物质的影响降到最小。在酶处理程序提供了一样品处理酶,需要体积较小(10 -25μL)的蛋白质样品。然而,由于使用了样品比例为1:8的工作试剂(v / v),所以在克服干扰物质浓度时灵活性降低,从而获得的检测水平较低。

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