Waters e2695高效液相色谱仪操作规程

Watｅrs e2６95高效液相色谱仪操作规程

1 目得

指导与规范Ｗaters e2６９5高效液相色谱仪得操作。

２适用范围

该操作规程适用于Wａter e 26９5高效液相色谱仪得操作。

３职责

检验员应按操作规程进行仪器操作,质量监督员负责监督该操作规程得正确执行。

4操作

４、1仪器组成与开机

4．1.1仪器组成

本仪器由Watｅrs e 26９5分离单元、Waｔers2998二极管阵列检测器、Ｗaters ELＳD ２42４

蒸发光散射检测器、Ｅｍpoｗeｒ3色谱工作站与打印机组成。

Wａtｅｒｓe269５分离单元包括四元梯度洗脱得溶剂输送系统,四通道在线真空脱气，可

容纳120个样品瓶得自动分离单元,柱温箱,内置得柱塞杆密封垫清洗系统,溶剂瓶托盘;

显示器,键盘用户界面。

４．1.2开机

4.1.2、1依次接通Waters e 2695分离单元、检测器、计算机与打印机得电源。

4．1.２、2接通Waterｓe2695分离单元后,约２0s仪器开始自检,约3ｍn内各部件得初始化完成,待主屏幕上方标题区出现“Iｄle”时,仪器进入待命状态。

４、2溶剂管路系统得准备

4.2.1流动相脱气

确认所有溶剂管路都充满溶剂,按［Mｅnｕ/Stａtus】,进入“Ｓｔａｔｕｓ(1)”屏幕,光标选

“Degassｅｒ”,按［Enteｒ】。

4.2.2灌注

当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时,需进行干灌注（DryPriｍe),注入流动相。

否则,进行湿灌注(WeｔＰｒiｍe)以驱除气泡。干灌注:按主机面板上［Menu／Sｔａｔus】,进入

“Ｓtatus（1）”显示,按[Direct Fuｎｃtion】,选择“Dry Prime”,选溶剂通道,如Ｏｐｅn A，选

“DｕｒａｔionＩIi按数字键输入5分钟，按”ＣOntｉｎｕe”,待限定时间结束后,重复操作,使所需

得溶剂通道注满流动相。湿灌注:进入“Ｓｔaｔuｓ(１)”显示,选溶剂通道，输入100%，按[Direct

Function],选“Wｅt Ｐrｉme”，按【OK】,根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7、5ml ／min,一般不用更改,时间可设置为5ｍin),按【０K】。

4、3样品管理系统得准备

4.3．1冲洗自动进样器

在“statｕs(1)”,屏幕下,光标选“ｐositｉon”,输入流动相得组成。按【DｉrecｔFｕｎcti ｏｎ],

光标选“PurｇｅIｎjecｔoｒ”，按【Ｅnｔeｒ]，显示“Ｐurｇe Injecｔor”屏幕，输入“Sample Loop Vｏｌumes

6、0”,光标下移“presｓｉon Check”,按任意数字键,按【OK]。

４.３．2冲洗进样针

在主屏幕下,按【Dｉag]，显示“Diａgnosｔics”屏幕，按【PrｉmｅNdｌＷash】,显示“PrimｅNeedle Wash”屏幕，按［Start],３０s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Cl ｏse】、【Exit】。

４．3．３冲洗柱塞杆密封垫

在主屏幕下,按【Diag]，显示”Dｉagnｏstｉcｓ”屏幕，按【Ｐrime Seal Wash】,显示“PrｉmｅSeａｌWaｓｈ”屏幕,按[Sｔaｒt］,３０s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Ｃlｏｓe】、【Exit】。待排放口有水流出,按【Hａlｆ】、【Ｃlose】、【Exit】。

4.3.4装入样品与转盘

打开样品舱门,显示"Ｄoor ｉs Ｏｐｅn"屏幕,将样品盘取出,把样品瓶插入样品盘后, 装

入样品盘,按【Ｎext】直至所有样品盘装毕,关好舱门。

4、4色谱柱平衡

换上检验所需得色谱柱与流动相,进入"Statuｓ(１)”显示，选择流路、设定流速、柱温, 按【Enter】开始注入流动相,通常情况下约1 5～30分钟色谱柱可达到平衡，可以开始进样, 采集数据。

5 Emｐｏwer 3软件得应用

５、1 建数据采集方法

５.1.1双击电脑屏幕上得"Ｅｍpowｅr"快捷图标,出现Eｍpower登录界面,输入用户名

与密码。

5.1．2单击高级键，选择用户类型与QuickStａrｔ界面。

5.1．3选择QｕickSｔaｒt界面，点击“确定”，然后选择选定得操作项目以及色谱系统(仅查瞧数据可选择色谱系统中得“没有系统”),单击“确定”。

5.１.4登录Emｐowｅr得QuｉckStarlt界面。

5、２编辑仪器方法与方法组(以e２６9５_2998为例)。

5.2.1、采集栏单击“方法组编辑向导”：

5．2.2选择“新建”选项。

5.２．3弹出仪器方法编辑器。

５.２.4单击“２695”,弹出2６95编辑界面。

５.2.4、1 Alｉaｎce系统(包括２695、2795与2６95D）通用编辑页面中,可选择“单次输送

体积”，请针对不同得流速选定适当得单次输送体积，以确保最佳得流速精度与准度。

5.2.4、2查瞧脱气选项,确认设置正确。

５.2．4、3流量选项中设置“泵模式”、“总流量”以及流动相配比。

5.2.5单击2９98,弹出2998编辑界面。

５．２.5、1 3Ｄ数据采集:在通用栏中选择启用3D数据,输入检测波长得范围;

５.2.５、2采集2D数据,点击“2D通道”,最多可同时采集8个不同波长得通道得数据。

5.2.６点击“文件”,选择“另存为”:输入仪器方法名称,点击“保存”;点击“文件”,

选择“退出”。

5.２.7在被选项中选择所需得仪器方法名称,点击“下一步(N)”。

５.2.8在下拉菜单中选择所需得处理方法与报告方法(如果没有合适得方法选择“无处理”、“无报告”),点击下一步。

5.2．9输入方法组名称，单击“完成”。

５、3进样

点击进入“平衡系统／监视基线”界面,选择相应得仪器方法,点击“平衡／监视器,

在监视窗口监视基线至系统平衡,停止系统监视状态,点击“进样”。

5.3.１、单进样:点击，进入“定义单进样参数”编辑界面,输入样品名、功能、方法组

等参数，点击“进样”。

5.3．2使用向导建立样品组与样品组方法。

5.3.2、1选择“运行样品”,然后单击“样品队列”，进入样品列表。

5.3.２、2单击“新建样品组向导”,建立样品组。

5.３.2、３选择创建样品组方法类型为“Lc或PDA”,然后点击“定义样品板”。

5．3.２、4在“选择标准进样在那里开始”中选择合适得选项。检查开始加载样品瓶得位置

就就是否正确，点击“下一步”。

5.3.2、5在描述标样中需要设置一下内容：样品组中得标样数:×;每瓶标样进样次数:Ｘ;进样体积:x;运行时间:XX;方法组XXX;点击“选项”:输入下一进样延迟时间Ｘ;点击

下一步。

5.3.2、6样品数:X;每瓶样品进样次数：Ｘ;进样体积:X；运行时间:X;方法组X;点

击选项:输入下一进样延迟时间X;点击下一步。

５.3.2、7在识别标准样界面中,输入标样名称,增量后缀使用1、在识别样品界面中,输入样品名称,增量后缀使用a。点击下一步。

5.3.2、8运行模式选项中选择“只测试”。查瞧摘要，点击下一步。【注:弹出组分编辑器,输入标样中每个组分得名称(内标不需要输入含量）。可以直接关闭该窗口,在处理数据得时候再添加】。

5．3.２、9点击完成,在菜单栏中选择文件。

5．3.2、10为方法组命名并保存样品组方法。

5.３.2、１1单击“样品队列”，打开运行样品窗口,点击运行当前样品组方法键，选择运行。

5.3.2、1１选择需运行得样品组名称,点击运行。

５.3.２、13样品组运行过程中,在“正在运行”栏中正在运行以及运行完毕得样品以红色显示。(注:以向导建立得样品组首行功能一般为清除校正，一般在运行样品前删除该行或改为“平衡”。)

５、４建立数据处理方法

５、4、1 2D数据处理方法

5．4．１、1单击“浏览项目”键,在“样品组”中选择目标样品组。

５.4.1、2在样品组上点击鼠标右键选择“查瞧相关→通道”,样品组在单个通道中显示。

5.4.1、3选择定最低浓度得标样，点击鼠标右键,选择下拉菜单中得查瞧,会显示未处

理得色谱图形。

5.４.1、４点击处理方法向导快捷键,选择创建新处理方法,点击确定。

5．4.1、5确认处理类型为LＣ,积分方式可选择为传统，再点击使用处理方法向导,选择确定。

５.4.１、6常按鼠标左键,选择色谱图上最窄峰。（注：在色谱图区域方可以放大某个需要监测得峰。点击鼠标右键全视图可以还原色谱图。)

5.4.1、７在色谱图得积分界面选择一段典型基线作为积分得阈值，点击下一步。5．４．1、８常按鼠标左键,在基线上选取积分得起止时间点。

5．４.1、9建议选择最小峰高,选择所要积分得高度最小峰(或键入相应数值)。小于此

峰高90％得峰将不被积分。点击下一步。

5.4.1、10定量方法选择面积,组分信息选择含量,校正类型选择线性。点击下一步。

５.4.1、11跨通道内标样界面点击否。

5．4.1、12因为选择得就就是标样,点击峰１可以瞧到一个下拉菜单选择相应得组分名称或

者键入运行样品相应得名称。添加组分名称相匹配得标准含量,然后点击下一步。

5.4．1、1３如果就就是多点校正样品,跳过添加含量得窗口直接点击下一步。(单点校正可在

这里添加含量)。

５.4.1、１４选择外标法:

5．4．1、1５选择单一内标样,需要在下拉菜单中选择或键入内标相应得名称,然后点击

下一步。

5．4.1、16选择多重内标需要输入所有内标得名称。

5.４．1、17为处理方法命名,点击完成。色谱图界面会显示该处理方法应用后得色谱结果，包括积分。

5.4.1、１8如需为积分方法添加积分事件,鼠标右键点击色谱图窗口，选择添加积分事件。积分事件所示功能会立刻应用于处理方法中。

5．4.１、１9编辑处理方法得高级功能需要选择快捷键。有任何更改均需再次保存处理方

法。

5.4.１、２0点击峰表底部可预览2D通道与峰。

5．4.1、２1点击“浏览项目”键,选择“通道”或“样品组”标签栏,右键点击目标样品组或通道并选择处理。

５.４.1、22在处理界面,选择使用指定得处理方法,选择相应得处理方法名称，点击清

除校正,选择校正并定量。

5.4.1、23点击确定,数据处理,产生结果。可在结果栏中查瞧。

５．4.2建立3D数据处理方法

5.4.2、１点击“浏览项目”键,在“样品组”中选择目标样品组。

5.4．２、2在样品组上点击鼠标右键选择查瞧相关通道,样品组中各个数据在单个通道中

显示。

５．4．2、3选择定量最低浓度得标样,点击鼠标右键,选择下拉菜单中得查瞧。

5.４．2、４在预览界面选择“轮廓线”标签栏,会显示未处理得轮廓图。

5.4.2、5从处理或右键下拉菜单中选择提取色谱选项。

5.4.2、6键入所需要提取得波长,按回车键，得到该波长得色谱图。

5.4.2、７点击处理方法快捷键,选择创建新处理方法，确认处理类型为PDA,积分方式

可选择为传统,再点击使用处理方法向导,点击确定。

5.４.2、8常按鼠标左键，选择色谱图上最窄峰。(注：在色谱图区域内可以放大某个需

要监测得峰。点击鼠标右键选择全视图可以还原色谱图。)

5.４.2、９在色谱图得积分界面选择一段平滑得基线作为积分得阈值，点击下一步。

5.4．２、10常按鼠标左键,在基线上选取积分得起止时间点。

5．4.2、11建议选择最小峰高,选择所要积分得高度最小峰(或键入相应数值）。小于此峰高９０%得峰将不被积分。点击下一步。

5.4．２、12定量方法选择面积,组分信息选择含量,校正类型选择线性。点击下一步。

5.4.２、13跨通道内标样界面点击否。

5.4．2、14因为选择得就就是标样，点击峰1可以瞧到一个下拉菜单选择相应得组分名称或

者键入运行样品相应得名称。添加组分名称相匹配得标准含量,然后点击下一步。

5．4．2、１５如果就就是多浓度点得一组标样,跳过添加含量得窗口直接点击下一步。(单一浓

度可以在这里添加含量)。

5.4.２、1６选择外标法:

5.4．2、17选择内标法单一内标样校正,需要在下拉菜单中选择或键入内标相应得名称, 然后点击下一步。

5.4.2、18选择多重内标需要输入所有内标得名称。

５.4.2、１9 PDA纯化及匹配选项：

5.4.2、20为处理方法命名,点击完成。色谱图界面会显示该处理方法应用后得色谱结果,包括积分。

5.4.２、２１在“文件”下拉菜单中选择“另存为”方法组，将该处理方法存入方法组。(注:

3Ｄ数据必须用方法组处理。)

5.4.2、２2如需为积分方法添加积分事件,鼠标右键点击色谱图窗口,选择添加积分事件。积分事件所示功能会立刻应用于处理方法中。

5．４.２、23编辑处理方法得高级功能需要选择快捷键。

５.4．2、24点击“浏览项目”键,选择“通道”或“样品组”标签栏,右键点击目标样品组或通道并选择处理。

5．４.２、２5在处理界面,选择使用指定得处理方法，选择相应得处理方法名称,点击清

除校正,选择校正并定量。

５.４．2、2６点击确定,数据处理，产生结果。可在结果栏中查瞧。

６查瞧结果与视图筛选

６、1选择“结果”标签栏,使用视图筛选器从下拉菜单中选择今天。

6、2选择需查瞧得结果,右键点击选择查瞧。

6、3查瞧结果点击快捷键,查瞧每个组分得校正曲线。切换至主窗口点击。

７预览结果并创建报告方法

7、1点击“预览项目”切换回结果表显示状态。

7、2选中一个或多个结果,点击鼠标右键选择预览。

7、3若选取一个结果,在预览窗口选择使用一下方法:使用缺省单个报告,单击确定。

7、４预览报告并查瞧数据。点击“编辑方法”键修改报告方法。

７、５双击色谱图或峰结果表编辑报告属性。

7、6点击文件,选择保存,为新建得报告方法命名。点击预览报告。

7、7如需将报告保存为PDＦ格式,点击。

８方法组得建立

以上讲解了如何建立仪器方法、处理方法与报告方法，组合可以得到一个方法组。

8、１监视区单击方法组编辑向导:

8、2弹出新方法组:选择仪器方法界面。选择相应得仪器方法,点击下一步。

8、3选择缺省方法界面选择相应得处理方法与报告方法,导出方法缺省。点击下一步。

8、4命名方法组,点击完成。

8、5在运行样品时,方法组／报告方法中调用该方法组，可以自动完成采集、处理、报

告数据流程。

9数据管理

9、1项目得备份

9.1.1在ＱuicｋStaｒt界面,选择菜单“管理一备份当前项目”。

9.1.2出现“项目备份向导”，点击下一步。

9.1.3出现“项目备份向导一选择目得地’’通过浏览选择目得地，建议选择在非操作系

统安装得硬盘分区内。选择完成,单击“确定”关闭后，回到项目备份窗口,单击“下一步”。

9.1.4出现“项目备份向导一备份显示”。确认数据得复制已经成功,再单击“下一步”。

9.1．5出现备份数据向导一开始界面。点击完成,结束备份。

9、２项目得还原

９.2．１在ＱuickStart界面，选择菜单“管理”,下拉菜单中选择“还原项目”。

9.2.2出现“还原项目向导”。通过“浏览”选择被还原得项目所在得路径,单击“确定”。

９．2.3单击下一步。

９.2.4如出现类似以下内容得对话框(项目名test已经被使用。请输入另一个项目名）, 则需为还原得项目另起一个名字。

9．2．5在“输入磁盘空间配额’’页中,输入项目名,并注意此处得“表空间配额”应不

得小于欲还原得项目原有得配额（数据文件大小）,然后单击“下一步”。

9.2.6如果需要,可以在此页面中,选择该项目就就是否属于某个父项目。

9．2.7在“还原显示’’中,如果出现如下对话框(还原得项目需要被更新到下一个版本), 单击“确定”。(注：当还原由Miｌｌenｎium或Emｐower得先前版本创建得项目时,需要为该项目选择时区。）

9.2．8在“还原显示”中,等待数据还原结束后，单击“完成”。（注:提示:在重装Emp ｏwer

软件之后,可以通过还原项目将相关得项目数据进行还原。)

１0项目管理

１0、1新建项目

10．1．１进入到Eｍpoweｒ3得QuiｃkStａrt界面。在菜单中选择“管理一创建新项目”。

1０．1.２出现“新项目向导”得对话框,选择新建项目得父项目：

1０.1.3单击“下一步”,弹出“新建项目向导一表空间”，表空间5０MB为默认设置,可

根据需要增减。

10.1.4出现“新建项目向导一选项”页。选择用于本项目得选项，如果无法确定适当得

设置，请接受默认选项。单击“下一步”。

10.1.5新建项目向导一访问控制：根据需要选择设置对您所创建得项目具有访问权限得

用户与用户组,或者接受缺省得选项,然后单击“下一步”。

10.1.6新建项目向导一复制所选项:需要选择复制得项目，一般选择Defａｕlｔs项目。

(注:此页得复制就就是指从另一个项目复制现有设置,可以复制项目得“视图筛选器”、“白定义字段”、“方法”与“参数”。所以，一般不允许更改或使用Ｄeｆaults项目中得任何

数据。）

１0、2查瞧及更改项目属性

在建立了新项目以后,可以根据需要在不同得项目之间进行切换。

10.2.１进入Empoｗｅｒ3得Qｕｉck＄tarｔ界面,选择菜单“管理一改变系统/项目”。

10.2.2改变系统／项目:根据需要进行选择项目或者选择系统(如果存在二个或者二个

以上得系统）。选择完毕后,单击确定。

如果选择了“在该窗口切换项目／系统”,当前得项目/系统会被新选中得项目／系统所替代，如果选择了“为项目／系统打开新窗口”，则会为选中得项目重新打开另外一个

ＱｕｉekＳｔarｔ得界面。

10.2．3在新得项目／系统得QuickSｔart界面内即可进行下一步得操作。

10、3系统配置

10.3.１在QuｉｃｋSｔart界面,选择菜单“视图一系统”,查瞧系统。

10．3.2出现系统信息窗口。

在该窗口中,可以在地址栏中查瞧显示得地址就就是否与仪器得设置相同。此外,可从“仪

器”选项卡里得“正常?”一栏中查瞧仪器状态,在正常状态下,应显示“就就是”字样。

如有仪器在“正常?”一栏出现“否”,可单击“扫描仪器”进行检查。如检查后显示“就就是”，即恢复正常。(注:当仪器联机出现错误,或者出现“仪器出错”字样得时候，即可

通过采集服务器属性来查瞧仪器状态,判断可能引起该问题得原因。)

10．3.3创建或连接到新得色谱系统

10.3.3、1在QuiｃkSｔaｒt界面,选菜单“管理一新建系统”。

１0.３.3、2出现“新建色谱系统向导一输入类型”页面,选择系统类型为“新建系统”。然后单击“下一步”。

1０、3、３、3出现“新建色谱系统向导一选择系统”页面，在“可用仪器”组中,选中新系

统得组件,然后用鼠标拖拽至右侧“新系统仪器”组中。选择完毕,单击“下一步”。如有

误选,则如法,将误选得新系统仪器，用鼠标拖拽回“可用仪器”组中。（注：可重复使用

已配置系统中得仪器,但一次只能有一个使用共享仪器得系统可以在线。）

10、3、3、4出现“新建色谱系统向导一访问控制”页面。(注:您创建系统时,您即为系统得所有者。系统创建后,可以修改系统得属性及更改所有者、访问权限与配置等详细信息。) 1１关机

11、1使用完毕,按规定用适当得溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针与

柱塞杆密封垫，确保２695分离单元已彻底冲洗干净后,关闭电源开关。

1１、2数据采集完毕后,关闭所用检测器得电源开关。

1１、３数据处理并打印报告后,关闭计算机与打印机电源开关。

１1、4试验结束，在仪器使用记录表上登记，仪器管理人员审核签字。

12仪器维护与保养

12、１每次使用前后,查瞧分离单元上各溶剂瓶中溶剂得量，及时补充各瓶中相应得溶剂。

12、2每次使用前后,打开分离单元最下面得分离泵得舱门,查瞧各管路接口,有无缓

冲盐析出得情况。如出现白色盐渍,应拆下其所在得部件,先后用水与甲醇超声清洗,并安

装好。

12、3随时检查仪器得使用记录。

12、4如长时间不使用该仪器,则需每半年按照《高效液相色谱仪期间核查规程》检查一次,并做好维护记录。

WATERS-2695-2487-2414-2998高效液相色谱仪操作规程

WATERS 2695/2487/2414/2998高效液相色谱仪操作规程 1. 目的：为使对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用规范化，特制定本规程。 2. 范围：涉及对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用。 3. 职责：QC检验员应严格遵守本规程。 4. 内容： 4.1开机 4.1.1接通电源，打开电脑主机、显示器的开关，进入Windows画面。 4.1.2 打开Alliance 2695系统的电源，仪器进行自检，“Idle”状态表示开机测试正常。 4.1.3 Wet Prime冲洗：少量气泡，执行Wet Prime。 A利用方向键将光标移至“composition”字段，将欲Wet Prime的溶剂输入100%。 B按“Direct Function”功能键，选择Wet Prime，按“OK”。 C选择流速和冲洗时间，按“OK”。 D重复上述步骤直至所有溶剂做完Wet Prime。 4.1.4 Dry Prime冲洗：大量气泡或者通道走空，执行Dry Prime。 A按“Direct Function”功能键，选择Dry Prime，按Enter。 B利用方向键将光标移至各通道，选择待Dry Prime的通道。 B同时打开阀门，用注射器帮助排液 D重复上述步骤直至所有溶剂做完Dry Prime。 4.1.5设定溶剂：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“composition”字段，将所需溶剂输入适 当的百分比。 4.1.6设定流速：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Flow”字段，输入所需流速。 4.1.7脱气：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Degasser”位置，按Enter，利用上下键选择 所需要的模式（On:除气装置开启；Off：除气装置关闭） 4.1.8置入转盘 A打开样品转盘舱门，屏幕会显示A、B、C、D、E五个转盘，按A可取出A盘（每个转盘上可放置24个样品瓶，共计120个）。 B将样品瓶放入样品转盘内并记录各瓶号名称。

(完整)Waters高效液相色谱仪标准操作规程

1.目的 描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。 2.适用范围 化验室 3.责任者 化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。 4.定义 HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。 5.安全注意事项 5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。 5.2注意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。 6.规程 6.1.Waters HPLC的组成：贮液器输液泵自动进样器分离柱 (柱温箱 ) 紫外检测器控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。 6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序 6.2.1打开顺序 ?对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后 打开M i l l e nn i um32化学工作站。 泵与色谱工作站的连接：对于 510 泵，因为此泵与色谱工作站是 单向联系，如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制，首先要在泵 的键盘上按 Menu 键，待显示屏切换至 Mode 状态下，其状态是 Loca ，按 Edit/Enter 键，在 Local 的L 前有闪动的光标显示，按键， Local 转换成Rem，再按Edit/Enter 键，此命令已输入进去, 最后按 Stop/Run 键，使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。泵 的任何动作都可由工作站来控制。还应注意这一步工作在每次开机 时都要进行。

对于 Alliance 2690 系统：先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关， 待初始化完毕后，再进入 Millennium 32化学工作站。 对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所 用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处 理过的超纯水；流动相在使用前一定要经 0.45m 的滤膜（滤膜分 为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表 ) 过滤、超声 真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。 应养成良好操作习惯： 规范操作，树立保护 HPLC 整套系统的概念，尤其对于输液泵、色 谱柱、检测器，在使用后应及时冲洗，以免污染而使其寿命缩短或 损坏，尤其如操作者使用了含盐的流动相，更应注意清洗的步骤： 首先用脱过气的纯水在流速为1ml/min 左右冲洗 30～60 分钟，再用 含 50％以上甲醇或乙腈的水溶液以相同的流速冲洗 20～30 分钟左 右。 如要卸下柱子，在经过上述冲洗过程之后，再经纯甲醇或乙腈以 1ml/min 的流速冲洗 20~ 30 分钟，柱子卸下后应马上拧紧柱堵。 流速的变化应采用阶梯式递增或递减的方式，启动泵时，应在 2 分 钟之内由小流速慢慢增大到所需的流速，泵关闭时亦然( 流速递 减)。切忌流速的骤变。 6.2.2关闭顺序 首先退出 Millennium 32化学工作站，再关闭系统的其他部分。 https://www.sodocs.net/doc/5319338441.html,lennium 32化学工作站 Millennium 32色谱管理系统是集数据采集、处理、 HPLC系统的控制、结果的管理、报告的打印为一体的综合系统。下面就着重介绍该系统的基本操作知识。 6.3.1Millennium 32化学工作站的进入 打开化学工作站，系统自动进入Program Manager界面，双击 Millennium 肖像，这时进入Millennium界面，双击 Session Manager 图 标，系统将自动初始化，以使工作站和 HPLC整套系统进行联 接。初始化后，按系统要求键入你的 User Name和 Password，这时 你已进入该系统。 6.3.2Project的进入和建立

Waters高效液相色谱仪标准操作规程

XXXXXXXXXX部仪器设备标准操作规程 1 目的：建立Waters高效液相色谱仪标准操作规程。 2 范围：Waters高效液相色谱仪。 3 责任：化验室操作者。 4 规程： 4.1 型号与主要性能指标 4.1.1 型号 4.1.1.1 主机Waters2695分离单元、Waters2489紫外/可见光检测器。 4.1.1.2 工作站Empower2。 4.2 主要技术指标: 4.2.1 泵流量设定：0.000和0.010到10.000毫升/分，增量为0.001毫升/分。 流量准确度：±1%或10μL/分，取其中的较大值（0.200到5.000毫升/分），反压为600psi下的脱气甲醇。 ４.2.2 检测器：光源：氘灯。 波长范围：190～700nm 波长精度：±1nm 4.2.3 柱温箱：温度设定范围：20～60℃，间隔：1℃ 控温精度：±5℃ 4.2.4 工作站计算机：Dell OPTIPLEX330（操作系统Windows XP）。 4.2.5 打印机：HP LaserJet P1008打印机。

5 操作条件： 5.1 电源要求：950VA（最大值） 线电压：85到132Vac或180到250Vac 频率：47到63Hz 5.2 环境条件：温度：4～40℃，相对湿度：20～80%。 5.3 机房内应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，室内排风良好。 5.4 仪器应平稳放置在工作台面上，便于操作，周围无强烈的机械震动和电磁干扰，仪器接地应良好。 6 操作前准备: 6.1 配制所需流动相。 6.2 配制和制备所需的对照品溶液和供试品溶液。 6.3 将色谱柱连接到色谱仪管路系统上。 7 操作步骤： 7.1 打开交流稳压电源开关，稳压电源上电压表指示并稳定至220V。 7.2 将“2695分离单元”电源开关（位于左侧面板的面板顶部）推到（开）I 位置即可启动“2695分离单元”, 启动诊断程序将启动。启动诊断程序的初始部分成功后，前面板上将显示Main（主）屏幕。启动诊断程序将继续执行，将初始化：针头、注射器和阀门；样品转盘托架；溶剂管理系统。诊断运行时，Main（主）屏幕的标题区内将显示这些机械诊断测试的状态。如果启动诊断程序不成功，则排除故障。当启动诊断程序完成后，“分离单元”将进入“空闲”模式。仪器开始自检（4-5分钟），待屏幕上方出现“idle”字样表示自检成功。 7.3 将输液泵上的烧结不锈钢过滤器及吸液管放入流动相中，使导管内充满溶剂。打开在线脱气，使其伪on,设定柱温，一般为35℃，清洗柱塞杆1～2分钟（Prime seal wash），将每一个会用到的管道进行排气一次（Wet prime），注射器排气泡及清洗（Purge injector）,清洗注射针（Prime needle wash）。

Water 2695 高效液相色谱仪操作规程

Water 2695 高效液相色谱仪操作规程 1目的 用于规范检验人员正确操作使用Waters 2695 高效液相色谱仪。 2 适用范围 适用于使用Waters 2695高效液相色谱仪检测分析的操作管理。 3 职责 使用Waters 2695高效液相色谱仪进行检验的检验员应对本规程负责，相关项目经理负责监督该操作规程的正确执行。 4仪器组成及原理 4.1仪器组成本仪器由Waters 2695 高效液相色谱仪、检测器(2996型二极管阵列检测器、2487紫外检测器、2489紫外检测器、474型荧光检测器)、Empower色谱作站组成。2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面等组成。 4.2高效液相色谱法是将具一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液，经色谱柱进行分离，检测器检测分离后的不同组分，数据处理装置记录色谱图或进行数据处理。 5.仪器的操作 5.1仪器的准备 5.1.1 检查流动相（使用前应首先脱气）、在线清洗溶液（10%甲醇-水溶液seal wash）、进样针清洗溶液（90%甲醇-水溶液injector wash）是否足够。 5.1.2 检查色谱柱的使用是否正确（方向是泵出来进检测器的方向，正常的话是色谱柱上所标示的箭头向上；一般情况下不能将色谱柱反过来用，除非柱子确实无法使用可考虑反方向使用）、连接是否有误，有无漏液，废液瓶的容量是否足够。 5.2开机、自检与仪器预备 5.2.1依次开启不间断稳压电源、开启2695 分离单元电源和计算机电源；仪器开始自检（约5～6min），待仪器操作面板上出现“Idle”字样表示自检成功，仪器进入待命状态。 5.2.2按动仪器面板右下方“Menu/Status”键进入操作状态，按动“Direct Function” 功能键，若仪器是首次使用或溶剂的管路充满空气时，先选择Dry Prime，按动OK，对管路进行排空；此时开启仪器下方purge阀，用专用注射器手工抽出管路内部的空气。（此操作一般情况下不会使用） 5.2.3若非5.2.2 状态时，直接以▼键切换到wet Prime，按动OK，对事先设置好流动相溶剂比例的管路进行相应的流动相灌注。 5.2.4 按动“Direct Function” 功能键，以▼键将仪器切换到purge injector状态，按动OK，对针头进行purge。（此操作是为了避免进样针中有气泡导致进样不平行） 5.2.5 在面板上设置流动相流速（flow），各通道溶剂流动比例以及柱温（col Htr）等参数，然后按动Enter。

新waters操作规程

目的：建立高效液相色谱仪标准操作规程，规范操作。 范围：Waters高效液相色谱仪 职责：操作人员。 规程： 一、开机 1、依次开启电脑、泵、检测器电源。 1.1 泵（2695）自检完成后出现以下画面： . 按右侧按键面板上的Menu/Status 出现以下画面： 按会出现选择图片中的3WetPrime点OK以替换系 统中的溶剂。选4PurgeInjector以新流动相替换样品定量环和注射器中的旧流动相。

完成此操作后即可设定流速走流动相。 1.2 紫外检测器（2489）自检完成后检测器面板显示如下： 按数字键输入待测波长后按 Enter 即可。 1.3 蒸发光散射检测器（2424）自检完成后检测器面板显示如下：

按数字键设定Gain (增益)，按箭头键移动光标同法设定 psi (气体压力)，每项设定均需按Enter 。Neb (喷雾器温度)，Tube(漂移管温度)设定时需先按键再同前项方法进行设定。 二、检测 2.1数据采集 Empower工作站 点击桌面上的图标出现 只有在用户名及密码处输入操作人的用户名及密码才可进入工作站进行样品检测及数据处理 先点击配置系统设置泵及将用检测器的连接，如下图

设置完成后退出，再点击运行样品进行样品检测，如下 选择所要运行的仪器连接及所保存的项目名点确定后出现下图

点击创建方法组编辑样品检测方法文件，如下图 设定流速，流动相，温度，波长等检测条件并保存方法。如下图操作示例

点击下图中的箭头处选定所设定的方法，并点击设置仪器即按所设方法运行，如想查看基线则点击监视器即可。

Waterse2695型高效液相色谱仪操作规程

Waterse2695型高效液相色谱仪操作规程Waters e2695型高效液相色谱仪操作规程仪器组成及开机 1(1 仪器组成本仪器由waters2695分离单无、2489紫外可见光检测器、2424 蒸发光散射检测器、Empower色谱工作站和打印机组成。 2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞密封垫清洗系统，溶剂托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。 1(2 开机先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器和打印机的电源(注:在打开2424蒸发光散射检测器电源之前，先开启气体供应)。接通2695分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上主标题区出现“Idle”仪器自检通过，进入待命状态。 溶剂管理系统的准备 2(1 流动相的脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按[Menu/Status]，进入“Status(1)”屏幕，光标选“Degasser”按[Enter]显示选项屏幕，Mode为“on”。 2(2 启动溶剂管理系统 2(2(1干启动当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status(1)”屏幕下，按[Direct Function]，光标选中“Dry Prime”，按[Enter]，显示“Dry Prime”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如[Open A]，光标选“Duration”，按数字键输入时间(一般为5分钟)，按[Continue]，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。 2(2(2 湿启动在“Status(1)”屏幕下，光标选“Composition”中欲使用的 流动相，输入100%，按[Direct Function]，光标选“Wet prime”，按

waters液相色谱仪操作规程

液相色谱仪操作规程 仪器名称：液相色谱仪Waters2695型（带光电二极管阵列PDA 2998、蒸发光散射ELS 2424检测器） 光电二极管阵列一般可用5mg/L来试条件。 第一步：准备工作 （1）把水和有机相分别加入各瓶中。(纯水一周一换，换溶剂时需小心，不要用手触摸管道)。有机相必须为进口色谱级纯度。 （2）开机 顺序：电脑→泵→检测器→工作站 1）泵的开启，在2695主机界面上直接操作。待仪器自检完毕，显示Idle后，选择Menu status进行各项操作： a.仪器长久不用，管路干了，应使用Dry prime功能。 b.每次开机，都要用Wet prime功能，将要用的各个通道冲洗一遍（A为甲 醇，C为乙腈，D为纯水），排除气泡。此过程流动相不通过柱子。具体操作为：用方向键选择一个通道，比例调成100%，其余通道为0%，在 direct function 中选择wet prime，按默认值进行。冲洗完成后，进行下一个通道的冲洗，直到完成。仪器使用过程中，如果哪个通道更换或增加了溶剂，都要用Wet prime将此通道冲洗一遍。 c.温度设置：直接将柱温设置成所需温度，一般为30℃。 d.Purge injection：在direct function中选择Purge injection，按默认值进行。 e.Equilibrium：将流量从0调至1mL/min，如果长久不用，不能直接调，而 应逐渐将流速调至1mL/min。将通道比例调成所需比例，注意此过程流动相通过柱子，所以切记不能出现纯水通道100%的情况，纯水比例最大为 95%。在direct function中选择Equilibrium，按默认值进行。 注意：每一步操作都应在仪器显示Idle状态后再进行。 2）检测器的开启 绿灯状态为自检；灯为黄色、不闪并听见提示音，为启动完成。 3）工作站的开启 Empower登陆：用户名为system，密码为manager 窗口左边选择项目，窗口右边选择系统（检测器）。点“确定”进入。 检查仪器的连接情况：管理→配置→节点→窗口右边黑色部分，右击→属性，显示“是”即为已连接。 第二步：创建项目 管理→创建新项目。 主要设置： 表空间：推荐设置为100MB。将支持…全面审计追踪?前的勾去掉。源项目：选择从其他项目要拷贝的内容，一般选默认Defaults。 在登陆工作站时调用所建项目。 第三步：创建方法和方法组 （1）首先应创建仪器方法。 查看方法→仪器。 主要设置： 泵2695：通用：单次输送体积（50毫升=1.23毫升/分）流量：泵模式（等度/梯度）、总流量（流动相设置，调节流动相比例，2min以后出峰较好）温

waterse2695高效液相色谱仪操作规程

Waters e2695高效液相色谱仪操作规程 1 目的 指导和规范Waters e 2695高效液相色谱仪的操作。 2适用范围 该操作规程适用于Water e 2695高效液相色谱仪的操作。 3职责 检验员应按操作规程进行仪器操作，质量监督员负责监督该操作规程的正确执行。 4操作 仪器组成和开机 4.1.1仪器组成 本仪器由Waters e 2695分离单元、Waters 2998二极管阵列检测器、Waters ELSD 2424蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站和打印机组成。 Waters e2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气，可容纳120个样品瓶的自动分离单元，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘；显示器，键盘用户界面。 4.1.2开机 4.1.2.1依次接通Waters e 2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。 4.1.2.2接通Waters e2695分离单元后，约20s仪器开始自检，约3mn内各部件的 初始化完成，待主屏幕上方标题区出现“Idle”时，仪器进入待命状态。 溶剂管路系统的准备 4.2.1流动相脱气 确认所有溶剂管路都充满溶剂，按[Menu／Status】，进入“Status(1)”屏幕，光标选“Degasser”，按[Enter】。 4.2.2灌注 当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时，需进行干灌注(DryPrime)，注入流动相。 否则，进行湿灌注(Wet Prime)以驱除气泡。干灌注：按主机面板上[Menu／Status】，进入“Status(1)”显示，按[Direct Function】，选择“Dry Prime”，选溶剂通道，如Open A，选 “DurationIIi按数字键输入5分钟，按”COntinue”，待限定时间结束后，重复操作，使所需 的溶剂通道注满流动相。湿灌注：进入“Status(1)”显示，选溶剂通道，输入100％，按[Direct Function]，选“Wet Prime”，按【OK】，根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7．5ml ／min，一般不用更改，时间可设置为5min)，按【0K】。 样品管理系统的准备 4.3.1冲洗自动进样器 在“status(1)”，屏幕下，光标选“Composition”，输入流动相的组成。按【Direct Function]，光标选“Purge Injector”，按【Enter]，显示“Purge Injector”屏幕，输入“Sample Loop Volumes 6．0”，光标下移“Compression Check”，按任意数字键，按【OK]。 4.3.2冲洗进样针 在主屏幕下，按【Diag]，显示“Diagnostics”屏幕，按【Prime Ndl Wash】，显示“Prime Needle Wash”屏幕，按[Start]，30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close】、【Exit】。

Waters_e2695_Alliance_HPLC操作手册

1.0Review and Approval 审核与批准 Written By: ________________________________ Date: ____________________ 起草人日期 Approved By: ________________________________ Date: ____________________ 批准人 Department Head or Designee 日期 部门负责人或指定人员 Approved By:________________________________ Date: ____________________ 批准人 Quality Assurance 日期 质量保证部 2.0Purpose 目的 2.1本标准规定了的Waters e2695型液相色谱仪的使用、维护保养和校验。 3.0Scope

范围 3.1本标准适用于位于XXXXXXXQC实验室的的使用、维护保养及校验。 4.0Responsibilities 职责 4.1QC人员对系统的维护以及本规程的使用负责。 5.0References/Associated Documents 参考文件/相关文件 5.1Waters e2695操作员指南 5.2Waters2998操作员指南 5.3Waters2489操作员指南 5.4Empower工作站使用手册 6.0Definitions

定义 N/A 7.0Procedure 规程 7.1设备 7.1.1四元泵，Waters e2695 7.1.2控温自动进样器 7.1.3紫外可见光检测器，Waters2489 7.1.4二级阵列管检测器，Waters2998 7.1.5柱温箱 7.1.6溶剂脱气机 7.1.7装有Empower工作站的电脑

waters e2695 液相色谱仪操作规程

Waters e2695HPLC操作规程 一、准备： 流动相：按方法要求配制流动相，经0.45 m微孔滤膜过滤，并超声波脱气20分钟以上。 样品溶液：按方法要求配制样品溶液，并以过滤或高速离心方式除去溶液中的固体微粒。 二：开机及平衡系统： 打开仪器电源，待仪器各部分自检完成； 将2695泵清洗管路（不透明管）和洗针管路（绿管）分别放入适当的溶剂中，按2695面板Diag键，选择Prime SealWash，清洗泵头约1分钟；再选择Prime NdlWash，清洗进样针1-2次； 将配制好的流动相放入2695样品槽中，按2695面板Menu/Status键进入手动控制模式；设定流速、柱温等参数，平衡系统约30分钟； 按2695面板Direct Function键，选择Purge Injector，冲洗进样器； 打开计算机，运行Empower软件，选择存放数据文件的Project，运行Run Samples；按Develop Methods按钮，建立方法；按Monitor按钮，观察基线，待基线平稳，可准备进样。 三、进样： 将样品放入2695样品盘中，记录每一样品对应的管号； 先在Single状态进样一次，若条件适合，确定运行时间(Run Time)； 在Samples状态编辑样品表，开始自动进样。 四、数据处理及打印： 在Empower软件中运行Browse Project，在Channels表中打开数据，建立处理方法； 用建立好的处理方法处理数据；

在Results表中选择要打印的结果，选择打印格式，打印数据。 五、关机： 实验结束后，首先关闭检测器电源； 在2695样品槽中换上适当的清洗溶剂，清洗系统约60分钟； 按2695面板Diag键，选择Prime SealWash，清洗泵头约1分钟；再选择Prime NdlWash，清洗进样针1-2次；按Menu/Status键进入手动控制模式，按Direct Function键，选择Purge Injector，冲洗进样器； 降低流速至0，待系统压力回零后，关闭2695电源。 关闭计算机及显示器电源。

Waters_E2695型高效液相作业指导书

Waters E2695型高效液相作业指导书 1.目的 规范Waters E2695型高效液相色谱仪的操作，有利于仪器的使用和检测工作的开展。 使Waters E2695型高效液相色谱仪处于受控状态，保证检测结果的准确性和可靠性。 方便Waters E2695型高效液相色谱仪的日常维护及常见故障的检查和解决。 2.范围 本作业指导书适用于Waters E2695型高效液相色谱仪。 3.职责 检验室负责制定操作规程。 仪器负责人组织实施操作规程并保证仪器的有效使用。 质量员保证仪器处于受控状态并负责编写仪器的检定、期间核查计划并组织落实实施。 4.仪器组成 本仪器由waters2695分离单无、2489紫外可见光检测器、2424蒸发光散射检测器、Empower 色谱工作站和打印机组成。2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞密封垫清洗系统，溶剂托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。 5.操作规程 开机 先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器和打印机的电源（注：在打开2424蒸发光散射检测器电源之前，先开启气体供应）。接通2695分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上主标题区出现“Idle”仪器自检通过，进入待命状态。 溶剂管理系统的准备 流动相的脱气 确认所有溶剂管路都充满溶剂，按[Menu/Status]，进入“Status（1）”屏幕，光标选“Degasser”按[Enter]显示选项屏幕，Mode为“on”。 启动溶剂管理系统 干启动当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status（1）”屏幕下，按[Direct Function]，光标选中“Dry Prime”，按[Enter]，显示“Dry Prime”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如[Open A]，光标选“Duration”，按数字键输入时间（一般为5分钟），按[Continue]，

waters2695操作规程

高效液相色谱仪操作规程 1、开机：依次打开总电源、2695主机及需要使用的检测器电源开关，机器开始自我检查。待仪器自我测试完毕后，屏幕状态显示区会出现“idle”字样，表示开机测试正常。 2、脱气设定：打开氦气瓶调节压力为0.4 MPa，按“Menu/Status”键，进入Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Sparge”位置，分别设定欲使用溶剂瓶A、B、C或D之流量为10%，此时可见到溶剂瓶内间歇地有气体吹出。 3、干洗：当溶剂的管子是空的时候，或是更换溶剂的时候，执行Dry Prime(干洗)，按“Menu/Status”键，进入Status(1)画面，按“Direct Function”功能键，选择“Dry Prime”，按Enter，按下欲使用的溶剂开启阀门(例如：Open A)，用注射器抽取溶剂，看到有溶剂流出即可，抽取完毕后关闭阀门，在“Enter a duration”中输入1分钟，按“Continue”键，Pump 即以3.0 mL/min的流速作Purge。重复以上步骤，将所要使用的流动相溶剂都进行干洗。 4、湿洗：赶走气泡的时候，执行Wet Prime(湿洗)，但一般干洗之后要进行湿洗。按“Menu/Status”键，进入Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Composition”字段，将欲Wet Prime得溶剂输入100%，按按“Direct Function”功能键，选择“Wet Prime”，按Enter，设定Flow Rate：5 mL/min，Time：1.0 min，然后按下“OK”键，Pump即开始做Wet Prime 动作。重复上诉步骤直到所有溶剂做完Wet Prime。 5、平衡色谱柱：按照实验需要的色谱条件在“Composition”中设定流动相的比例，将流速以每次增加0.2 mL/min的速度增加到需要的流速。 6、进样：将待测的溶液装入样品瓶中，样品需要经0.45 um滤膜过滤，然后放入样品盘中。利用Empower操作软件设定仪器条件，检测波长等，进行进样操作。 7关机：将流动相改为纯甲醇，流速为0.2 mL/min，冲洗管路及柱子30 min(如果使用的流动相中有盐溶液，则先用水冲洗柱子20 min，再改为纯甲醇冲洗)，结束后以每次降低0.1 mL/min的流速降至0后，将光标移至“Sparge”位置，设置为0，然后关闭氦气瓶阀门，主机开关，检测器开关机变压器开关。 注意：流动相溶剂必须为HPLC级，配制溶液需使用超纯水，并且用0.45 um滤膜过滤。流动相在使用前应脱气超声20 min。

Waters_e2695型高效液相色谱仪操作规程

Waters e2695 型高效液相色谱仪操作规程 目的：建立Waters e2695高效液相色谱仪标准操作规程，为了使操作者操作高效液相色谱仪更规范，保证实验结果更精确。 范围：适用于Waters e2695高效液相色谱仪操作和维护保养。 职责: 本规程由仪器使用员负责实施，分析室主任负责监督。 1 开机前的准备工作 1.1 检查设备电源、流路、信号连接是否完好。 1.2 流动相：配制相应的流动相，经0.22μm微孔滤膜抽真空过滤后，并超声脱气5分钟，必须使用色谱纯的溶剂，水或缓冲盐溶液要用超纯水；盛放溶液和流动相所用的玻璃容器必须用超纯水清洗。 1.3 样品溶液：按方法取样或配制标准样品溶液。 2 仪器的组成及开机平衡系统 2.1 仪器组成。本仪器由waters e2695分离单元、2489紫外可见光检测器、Empower色谱工作站和打印机组成。2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞密封垫清洗系统，溶剂托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。 2.2 开机。先打开电脑，依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。接通2695 分离单元后，约20s 仪器开始自检，约4min后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区出现“ Idle ”时，仪器进入待命状态。 2.3 脱气（Degasssger）。按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。一般默认是开的。 2.4 设定柱温。在“Status”界面，光标至“Col Htr Set”，输入目标温度，按Enter。（可在工作站方法中设置）

067Waters高效液相色谱仪标准操作程序

浙江巨泰药业有限公司印数编号 第份 1目的 建立Waters2695(Allianee). Waters2489DET.液相色谱仪使用维护保养规程，保证正确操作。 2适用范围 适用于Waters2695(Allianee). Waters2489DET液相色谱仪使用维护保养。 3责任人 QC员、QC主任。 4程序 4.1基本操作规程 4.1.1准备工作 按流动相配制要求配好流动相，过滤，超声脱气，将吸滤头放入相应通道的流动相中。 4.1.2仪器的启动 打开Waters2695(Alliance).Waters2489DET以及柱温箱的开关。 4.1.2.1非Empower3软件的仪器启动程序 依次打开电脑、Waters2695 Waters2489DET的开关。波长的设置：在检测器自 检完毕显示初始屏幕时，按▲ 或▼ 键，在入nm处输入所需波长值，再次按

Enter键确认。按▲ 或▼键在AUFS处输入所需的灵敏度。其他设置参见2489检 SOP Array 测器说明书；2695系统的设置：系统初始化结束后，主屏幕上方标题区出现“Idle” 时，仪器进入待命状态。在初始屏幕按Menu /status键，进入status界面，在Flow : ML/MIN处设置流量；用▲或▼ 、■或■ 键上下左右移动，在A、B、C、D各通道处设置各通道的比例。在sample处set °C处设置样品室温度，在col Htr/clr set C处设置柱温。在Degasser处按Enter键选择on打开脱气机。系统运行样品之前用wet prime功能把各通道的气泡排除或原流动相替换，待系统平衡后，打开2695自动进样器的盖子，按屏幕上欲放置的盘号(显示A\B\C\D\E )，把欲进样的样品按序号放入所设置的瓶号位置， 关上盖子。按Direct Function进入选Inject samples在Vial Range处设置进样样品瓶号，在injects per vial: 设置进样次数，在 Run Time：min设置运行时间，在Inject Volume: 卩l设进样体积，按OK运行， 或Can cel退出。 (1 )如果管路里有大量的空气或长期不使用管路里呈干空的状态时，应使用dry prime 功能把管路的空气完全排除。 (2，如压力不稳有气泡或通道要更换流动相，可用wet prime进入，按status界面中 的Direct Function进入，选wet prime,ok,或cancel退出。进入后设流速，设时间，按ok， 或cancel退出。 (3)在不进样的状态如要对进样针里面进行清洗或排除系统的气泡时，按如下进行： 按status界面中的Direct Function 进入，选3 purge lnjector,ok,或cancel退出。进入后按 ok或cancel退出。在运行中按stop purge停止，Abort Purge,stop purge取消。清洗结束自动 回到原始界面(注：以上程序要在不进样状态进行) (4，如要对针的外部进行清洗，按Menu/status键，回到Main界面，按Diag进入 Diagnostics界面，按Prime Ndlwash进入，按start开始，或按close退出。或在清洗 过程中按Halt中断，按exit退出。

Waterse2695高效液相色谱仪操作规程

Waterse2695高效液相色谱仪操作规程 1目的 指导和规范Waterse2695高效液相色谱仪的操作。 2适用范围 该操作规程适用于Watere2695高效液相色谱仪的操作。 3职责检验员应按操作规程进行仪器操作，质量监督员负责监督该操作规程的正确执行。 4操作 4.1仪器组成和开机仪器组成 本仪器由Waterse2695分离单元、Waters2998二极管阵列检测器、WatersELSD2424蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站和打印机组成。 Waterse2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气，可容纳120个样品瓶的自动分离单元，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘；显示器，键盘用户界面。 开机依次接通Waterse2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。接通Waterse2695分离单元后，约20s仪器开始自检，约3mn内各部件的初始化完成，待主屏幕上方标题区出现“Idle”时，仪器进入待命状态。 4.2溶剂管路系统的准备流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按［Menu/Status】，进入“Status(1)”屏幕，光标选“Degasser”，按［Enter】。 、•^、、 灌注当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时，需进行干灌注(DryPrime)，注入流动相。 否则，进行湿灌注(WetPrime)以驱除气泡。干灌注：按主机面板上［Menu/Status］,进入“Status(1)”显示，按［DirectFunction］,选择“DryPrime”，选溶剂通道，如OpenA,选“Durationlli按数字键输入5分钟，按”COntinue”，待限定时间结束后，重复操作，使所需的溶剂通道注满流动相。湿灌注：进入“Status(1)”显示，选溶剂通道，输入100%,按［DirectFunction］，选“WetPrime”，按【OK］,根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7.5ml/min,一般不用更改，时间可设置为5min)，按【0K］。 4.3样品管理系统的准备冲洗自动进样器在“status(1)”，屏幕下，光标选“position”，输入流动相的组成。按【DirectFunction］,光标选“PurgeInjector”，按【Enter］,显示“PurgeInjector”屏幕，输入“SampleLoopVolumes6.0”，光标下移“pressionCheck”，按任意数字键，按【OK］。 冲洗进样针 在主屏幕下，按【Diag］，显示“Diagnostics”屏幕，按［PrimeNdlWash］，显示“PrimeNeedleWash"屏幕，按［Start］，30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close］、【E*it］。 冲洗柱塞杆密封垫 在主屏幕下，按【Diag］，显示”Diagnostics"屏幕，按【PrimeSealWash］，显示“PrimeSealWash"屏幕，按［Start］，30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close］、【E*it］。待排放口有水流出，按【Half】、【Close】、【E*it】。 装入样品与转盘 打开样品舱门，显示"DoodsOpen"屏幕，将样品盘取出，把样品瓶插入样品盘后，装入样品盘，按【Ne*t】直至所有样品盘装毕，关好舱门。 4.4色谱柱平衡 换上检验所需的色谱柱和流动相，进入"Status（1）"显示，选择流路、设定流速、柱温，按［Enter］开始注入流动相，通常情况下约15〜30分钟色谱柱可达到平衡，可以开始进样,采集数据。 5Empower3软件的应用 5.1建数据采集方法 双击电脑屏幕上的"Empower"快捷图标，出现Empower登录界面，输入用户名和密码。

Alliance2695型高效液相色谱仪标准操作规程

页码：1/4 编号：SOP-QA-010201 生效日期：年月日标准操作规程 STANDARD OPERA TING PROCEDURE 题目Alliance2695型高压液相色谱仪 标准操作规程 Subject 颁发部门质量保证部Issue Department 起草日期年月日Written by Date 审核日期年月日Examined by Date 批准日期年月日Approved by Date 分发质量保证部、中心化验室、档案室 Receiver 1 目的：建立Alliance 2695型高效液相色谱仪标准操作规程，以保证Alliance 2695型高效液相色谱仪的正确使用。 2 范围：适用于Alliance 2695型高效液相色谱仪操作的全部行为。 3 责任：中心化验室对本SOP的实施全面负责。 4 内容： 4．1 开机 4．1．1接通仪器插座电源开关。 4．1．2 先打开2695主机的电源开关，再打开2996检测器的电源开关。 4．1．3待2695主机与2996检测器自检完毕后，打开电脑显示器、电脑主机电源开关，计算机开始自检进入Windows 2000桌面。 4．1．4在电脑屏幕上用鼠标双击Millennium32（M32）图标。进入Waters高压液相操作系统主窗口。 4．1．5单击M32主窗口上“Login”键，当出现User name提示时，输入使用者代号，在Password提示里输入此代号对应密码。再按回车键即可激活Millennium32操作窗口。 4．2 硬件操作 4．2．1溶剂脱气 先打开氦气瓶气体阀门，将分压表调至0．5MPa；按“Menu/Status”键，进入“Status(1)”界面，用“↑”、“↓”、“←”、“→”键在界面上“Sparge”项中，选择A、B、C或D中所选用的溶剂流路号进行脱气处理（如选用A、B两瓶溶剂，则选择A-100%，B-100%，按“Enter”键开始脱气），脱气15～20分钟后，可将脱气量由100%降为30%。 4．2．2干灌注 如长时间未用机器溶剂管理系统流路是干的或系统中有空气存在时，需先做抽气灌注处理。

Waters e2695高效液相色谱仪操作规程

Waters e2695下效液相色谱仪支配规程之阳早格格创做 1 手段 指挥战典型Waters e 2695下效液相色谱仪的支配. 2适用范畴 该支配规程适用于Water e 2695下效液相色谱仪的支配. 3工做 考验员应按支配规程举止仪器支配，品量监督员控造监督该支配规程的粗确实止. 4支配 本仪器由Waters e 2695分散单元、Waters 2998两极管阵列检测器、Waters ELSD 2424 挥收光集射检测器、Empower3色谱处事站战挨印机组成. Waters e2695分散单元包罗四元梯度洗脱的溶剂输支系统，四通道正在线实空脱气，可 容纳120个样品瓶的自动分散单元，柱温箱，内置的柱塞杆稀启垫荡涤系统，溶剂瓶托盘； 隐现器，键盘用户界里. 4.1.2.1依次交通Waters e 2695分散单元、检测器、估计机战挨印机的电源. 4.1.2.2交通Waters e2695分散单元后，约20s仪器开初自检，约3mn内各部件的

初初化完成，待主屏幕上圆题目区出现“Idle”时，仪器加进待命状态. 确认所有溶剂管路皆充谦溶剂，按[Menu／Status】，加进“Status(1)”屏幕，光标选 “Degasser”，按[Enter】. 当色谱仪流路不溶剂大概系统中有气氛时，需举止搞灌注(DryPrime)，注进震动相. 可则，举止干灌注(Wet Prime)以驱除气泡.搞灌注：按主机里板上[Menu／Status】，加进 “Status(1)”隐现，按[Direct Function】，采用“Dry Prime”，选溶剂通道，如Open A，选 “DurationIIi按数字键输进5分钟，按”COntinue”，待规定时间中断后，沉复支配，使所需 的溶剂通道注谦震动相.干灌注：加进“Status(1)”隐现，选溶剂通道，输进100％，按[Direct Function]，选“Wet Prime”，按【OK】，根据里板提示树坐流速即时间(默认流速为7．5ml ／min，普遍不必变动，时间可树坐为5min)，按【0K】. 正在“status(1)”，屏幕下，光标选“Composition”，输进震动相的组成.按【Direct Function]， 光标选“Purge Injector”，按【Enter]，隐现“Purge Injector”屏幕，输进“Sam ple Loop Volumes