小鼠支气管哮喘模型的研究现状
支气管哮喘相关生存质量研究进展
作者：王宁群, 姜良铎, 李宗信 【关键词】支气管哮喘; 生活质量; 综述 生存质量是指不同文化和价值体系中的个体，对与他们的目标、期望、标准以及所关心的事情有关的生存状况的体验［1］。生存质量是在新的医学模式下产生的全面评估病人身体、心理和社会适应等三方面总体健康状况的一个综合指标。它不仅包括病人健康状况的客观指标如症状、体征，还包括病人的一些主观指标，如患者心理、社会活动、健康意识等。 哮喘是影响患者生存质量的慢性疾病之一。既往对于哮喘治疗效果的评价是通过患者的临床症状、药物的需求量、第1秒用力呼气量和气道反应性等方面的变化来进行。但在临床上，由于心理状况、社会活动、环境刺激、药物副作用等方面的影响，上述指标的改善并不一定都伴随患者健康状况的好转［2］。有些哮喘患者活动受限明显，但对心理情绪方面的影响却并不很明显，而有些患者病情较轻，但“害怕哮喘发作”、“担心长期用药的副作用”等心理影响却很明显。因此，对哮喘病情的评估应注重评估疾病对患者躯体、心理和社会适应能力的整体影响［3］。 1 影响哮喘患者生存质量的因素 影响哮喘患者生存质量的因素比较多，主要因素有年龄、性别、种族、文化程度、气道反应性、哮喘发作程度和治疗措施、收入、吸烟等［4-6］。此外，还受患者心理因素如自我安慰、对疾病治愈的期望值等的影响［7］。近年来的研究发现，对哮喘患者的教育是影响哮喘患者生存质量的重要因素。哮喘患者的教育包括对哮喘病的认识，如何恰当应用哮喘药物和药物吸入技术，哮喘病情恶化的识别和处理以及哮喘日记的应用等［4］。经过适当的哮喘知识培训，哮喘患者的生存质量得到明显提高。表现为氨茶碱用量减少，急诊及住院次数减少，吸入糖皮质激素用量减少，对治疗的依从性增加，活动受限状况改善，患者对哮喘的治疗更为乐观等［8-10］。 哮喘伴发的抑郁状态对哮喘患者生存质量的影响也是近年来研究的热点。抑郁是哮喘的严重并发症，可影响患者的生存质量及预后［11，12］。具有喘息、夜间因哮喘症状而觉醒、晨起哮喘等症状的患者，其抑郁的发生率明显增高，生存质量较低。 2 国外对哮喘相关生存质量的研究 2.1 哮喘相关生存质量评估量表的研究哮喘生存质量的评估量表分为对全身生存质量状况评定的总量表（普适量表）和对支气管哮喘特定生存质量评定的疾病特异性量表（专用量表）两大方面。 常用于支气管哮喘生存质量评定的总量表有疾患影响程度问卷、诺丁汉健康问卷、生存质量指数、世界卫生组织生存质量测量表和健康状况调查问卷（short form-36, sf-36）等［13］。在对哮喘患者的研究中，最常用的普适量表是sf-36。sf-36由美国医学结局研究中心研制，是国际生活质量评价组织认可的，对哮喘患者最为适用的总体量表。oga等［14］比较了sf-36等几种普适量表在哮喘病应用中的反应性，结果显示sf-36的反应性最佳，sf-36的变化与哮喘生存质量评估表（asthma quality of life questionnaire, aqlq）的变化有中度相关性，并且其评估内容与aqlq不同，可作为专用量表的补充，有效地运用于哮喘的临床试验当中。 用于支气管哮喘生存质量评定的专用量表有juniper创立的aqlq及在此基础上开发的标准版aqlq量表（aqlq scale, aqlq-s）和微型版aqlq量表（mini-aqlq）。此外，常用的哮喘专用量表还有marks创立的哮喘生存质量评估表（marks-aqlq）、哮喘症状调查表、哮喘生活问卷和哮喘影响询问表等［13］。juniper等［15］还对aqlq量表进行改进，形成适合急性重症哮喘病人生存质量评价的acute-aqlq量表。 国外学者对哮喘生存质量量表的功能和特性进行了较为广泛和深入的研究。量表一般应具有预测功能、辨别功能和评价功能；其基本特性包括信度、效度、反应度等［16］。例如，aqlq
哮喘动物模型研究现状精
哮喘动物模型研究现状 【摘要】支气管哮喘是呼吸系统一种常见病与多发病。其发病机制复杂，建立合适的动物模型有助于开发治疗人类变应性疾病的新药。本文主要就哮喘动物模型的研究现状进行综述。 关键词】哮喘动物模型 Abstract ： Bronchial asthma is a common disease and frequently encounter ed disease of respiratory apparatus.The pathogenesy is complic ated,establishing suitable animal models of asthma benefits th e development of new drug to treat humans'allergic disease.A brief review on the establishment of animal modles on asth ma was made in this *****. Key words：asthma;animal modle 支气管哮喘是呼吸系统一种常见病与多发病。有关哮喘发病机制的探索、新治疗方法的评价、新药研究与开发都主要依赖于动物实验。但是，动物自发形成的变应性哮喘很少，目前，哮喘的动物模型还很难完全模拟人类哮喘，只能在动物身上模拟哮喘的某些特征。 本文主要就哮喘动物模型的研究现状进行综述。用于模拟人类支气管哮喘的动物种类很多，常用的如豚鼠、大鼠、小鼠、家兔等，用猫、狗、猪等动物复制哮喘模型也有报道。 1豚鼠 豚鼠是使用最广泛的变应性疾病动物模型。尽管这种动物与人类有极大差异，但致敏豚鼠的过敏性支气管收缩在研究抗过敏、支气管扩张药物方面仍然是最常使用的模型。 致敏豚鼠的支气管过敏反应是常用的“速发型”变态性支气管收缩模型］1］,这类模型的发病机制与人类的哮喘症相仿，同属I型变态反应，其模型发病快，阳性率极高，但病程短，有些动物可发生急性过敏性休克而死亡，为防止动物过度反应死亡，可在激发前给豚鼠腹腔注射适量抗组胺药。腹腔注射卵白蛋白致敏豚鼠，致敏后14?21d,再用1 %的卵白蛋白给豚鼠雾化吸入2min或用0.01 %的卵白蛋白雾化吸入60min,可诱导豚鼠产生迟发相支气管收缩，在雾化吸入17?24h达峰］2］0此外，豚鼠还是研究职业性哮喘建立的第一种动物模型［3］。 以豚鼠作为哮喘模型有许多好处，例如：价格低廉，易处理，变应原诱发的支气管收缩与人类支气管哮喘中的收缩特点相同。但豚鼠缺乏具有明确基因型的种系，也缺乏相关的免疫学和分子生物学试剂，尽管能产生很好的气道炎症模型，但对于进一步深入研究免疫和遗传机制较困难。因此，在实验中越来越多地使用大鼠、小鼠等动物进行研究。 2大鼠
哮喘发病机制的研究进展
哮喘发病机制的研究进展 发表时间：2013-04-15T17:01:21.263Z 来源：《医药前沿》2013年第5期供稿作者：邸春红宋智生[导读] 在我国区域内将近有4亿多的哮喘病患者，将对人类的身体健康受到了严重的影响。 邸春红1 宋智生2 （1新疆伊犁州友谊医院二分院 835000；2新疆伊犁军分区门诊所 835000）【摘要】哮喘是一种常见的、慢性的疾病，其主要特征是气道高反应性、气道重塑、肺嗜酸性粒细胞炎症及气道神经调控的变化等。有多种细胞因子和细胞、基因等共同参与哮喘的发生。本文主要从炎性介质、基因、肺泡内树突状细胞（DC）、前列腺素D2(PGD2)和呼吸道合胞病毒(RSV)感染等五个方面介绍哮喘的发病机制，为更好地预防与治疗哮喘提供理论依据。【关键词】哮喘基因前列腺素D2(PGD2) 【中图分类号】R363.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）05-0366-01 引言 在我国区域内将近有4亿多的哮喘病患者，将对人类的身体健康受到了严重的影响。而在美国患有哮喘发病率的将近有6%—11%的女患者和12%—16%的男患者。我国在2003年经过调查哮喘患者流行病率的结果表明，在3年以内患有哮喘病率约是0.2%—3.4%，跟十年之前相对比，要提升63.7%，其使患者的日常生活将受到了严重的影响[1]。在目前，我国哮喘发病的原理相当的杂乱，嗜酸性粒细胞（eosinophils，EOS）、T淋巴细胞（T lymphocyte）、肥大细胞（Mast cells）等多种细胞和细胞成分所融入在慢性气道炎症性疾病中就是目前很多学者所接受的理论哮喘，而也被称为一种外周免疫耐受机制所产生不完备的疾病。 1 炎性介质与哮喘 哮喘患者一般都是因正常抗原中有个别敏感的抗原产生异常的免疫反应，CD4+T辅助细胞里面的Th2细胞引起免疫反应的主要原因。Th2细胞是由变应原激活T淋巴细胞增殖分化而生成的，从而引发了微血管渗漏、腺体分泌增加、粘膜水肿、上皮损伤以及气道高反应性这些都是发生哮喘的反应[2]。 2 基因与哮喘 对候选基因进行研究，研究结果表明了哮喘发病基因危险中起着重要的作用是基因与基因之间的相互作用。RANTES在导致病毒气道炎症之中的作用是通过对气道上皮细胞系 BEAS24B与上皮细胞中16号染色体上的 RANTES mRNA及蛋白在正常人支气管表达水平的测定来证明的[3]。T细胞抗原受体基因位点和特异性IgE重链基因的连锁区域中有染色体15q2存在，哮喘患者与它们也有着关联。 3 肺泡内树突状细胞（DC）与哮喘 DC提呈抗原作为链接T淋巴细胞和特定的抗原之间的媒介，DC提呈抗原分为DCI和DCII两种，前者可以分泌出IL-13与IL-17，它们对于Th0分化为Th1具有指导作用，然而所分泌的IL-13由于功能不足常常出现过敏体质与哮喘，同时还可能导致Th1/Th2其细胞的功能失衡[4]。此外，DC既可引起Th2反应，同时对于其细胞的接连激活也具有促进作用，从而诱使慢性炎症发生，并导致BHR以及哮喘特异性气道被重新塑造。 4 前列腺素D2(PGD2)在哮喘发病中的作用 PGD2是环氧酶代谢产物主要是由肥大细胞花生四烯酸所引起的，在没有进入临床阶段进行的实验已经显示出，PGD2过敏哮喘是一种重要的媒介[5]。PGD2受体和PGD2是哮喘相关的易感基因，此结果也是近些年来专业人员进行研究的成果，它们也是哮喘发病的分子遗传基础其中之一。 5 呼吸道合胞病毒(RSV)感染在哮喘中的作用 RSV感染使患者的急性毛细支气管炎和哮喘的发病率严重的受到影响。只有通过β2-整合素其细胞的黏附，RSV对于EOS的刺激才更加明显。相对于正常的对照组来说，变应性的哮喘病人的外周血EOS其PAF受体mRNA的表达明显要更强。从而可知变应性哮喘其发病可能对EOS的PAF受体有一定影响。 总而言之，哮喘的发病机制极为复杂，许多细胞参与了哮喘的气道炎症反应，无数细胞因子在细胞与细胞之间架起了相互作用的立交桥，有众多炎症介质介导效应细胞的生理生化反应。只有充分掌握了哮喘的发病调控机制，才能更好地、更有效地预防与治疗哮喘，解决患者的痛苦，提高患者的健康质量。参考文献[1] E. Furukuwa, T. Ohrui, M. Yamaya et al., “Human airway submucosal glands augment eosinophil chemotaxis during rhinovirus infection,” Clinical and Experimental Allergy, vol.34, no. 5, pp. 704–711, 2004. [2] T. Sasaki, M. Yamaya, H. Yasuda et al., “The proton pump inhibitor lansoprazole inhibits rhinovirus infection in cultured human tracheal epithelial cells,” European Journal of Pharmacology, vol. 509, no. 2-3, pp. 201–210, 2005. [3] M. Yamaya, T. Sasaki, H. Yasuda et al., “Hochu-ekki-to inhibits rhinovirus infection in human tracheal epithelial cells,” British Journal of Pharmacology, vol. 150, no. 6, pp.702–710, 2007. [4] R. Koetzler, R. S. Zaheer, S. Wiehler, N. S. Holden, M.A. Giembycz, and D. Proud, “Nitric oxide inhibits human rhinovirus-induced transcriptional activation of CXCL10 in airway epithelial cells,” Journal of Allergy and Clinical Immunology, vol. 123, no. 1, pp. 201–208.e9, 2009. [5] J. A. Cakebread, Y. Xu, C. Grainge et al., “Exogenous IFN-βhas antiviral and anti-in?ammatory properties in primary bronchial epithelial cells from asthmatic subjects exposed to rhinvirus,” Journal of Allergy and Clinical Immunology, vol.127, no. 5, pp. 1148–1154.e9, 2011.
支气管哮喘研究进展
支气管哮喘的研究进展 作者：张志伟；学号：G131403039 指导老师：曹磊 【论文摘要】支气管哮喘是一种严重的呼吸道疾病,同时也是一种免疫功能异常的变态反应性疾病,是一个世界性的问题,其不但发病率高,而且病程长且发作反复,已经成为了一个严重的公共卫生问题。该病目前尚无彻底根治之法,但可以利用药物缓解,若治疗不及时或不恰当,极有可能危及患者生命,严重影响其身心健康,同时也给家庭和社会带来巨大的经济负担。可见深入研究本病的病因、机制以及治疗对防治本病具有非常重要的意义。因此,本文现对支气管哮喘的病因以及临床治疗进展等方面进行研究探讨。 【关键词】支气管哮喘；变态反应性；免疫功能 哮喘又名支气管哮喘。支气管哮喘是由多种细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症，此种炎症常伴随引起气道反应性增高，导致反复发作的喘息、气促、胸闷和（或）咳嗽等症状，多在夜间和（或）凌晨发生，此类症状常伴有广泛而多变的气流阻塞，可以自行或通过治疗而逆转。 1.病因 1.1遗传因素：哮喘是一种具有复杂性状的，具多基因遗传倾向的疾病。其特征为： ①外显不全，②遗传异质化，③多基因遗传，④协同作用。 1.2.变应原：哮喘最重要的激发因素可能是吸入变应原。 （1）室内变应原屋螨是最常见的，危害最大的室内变应原，是哮喘在世界范围内的重要发病因素。常见的有4种：屋尘螨，粉尘螨，宇尘螨和多毛螨。 （2）职业性变应原可引起职业性哮喘常见的变应原有谷物粉、面粉、木材、饲料、茶、咖啡豆、家蚕、鸽子、蘑菇、抗生素（青霉素、头孢霉素）异氰酸盐、邻苯二甲酸、松香、活性染料、过硫酸盐、乙二胺等。 （3）药物及食物添加剂阿司匹林和一些非皮质激素类抗炎药是药物所致哮喘的主要变应原。 1.3.促发因素 （1）大气污染空气污染（SO 、NO）可致支气管收缩、一过性气道反应性增高 2 并能增强对变应原的反应。 （2）吸烟香烟烟雾（包括被动吸烟）是户内促发因素的主要来源，是一种重要的哮喘促发因子，特别是对于那些父母抽烟的哮喘儿童，常因吸烟引起哮喘发作。 （3）呼吸道病毒感染呼吸道病毒感染与哮喘发作有密切关系。婴儿支气管病毒感染作为哮喘发病的启动病因尤其受到关注。呼吸道感染常见病毒有呼吸道合胞病
支气管哮喘动物模型的研究现状
虽匿壁堡壅查！！！！生筮堡鲞整！塑！坐！堡！！旦ｉ！！坚型！！！！！∑亟：！！：塑！：！ 支气管哮喘动物模型的研究现状 李颖华李超乾 【摘要】支气管哮喘（哮喘）是一种常见多发病，哮喘实验动物模型的建立在研究其病因、发病机制以及制定防治方案等方面有着重要意义。通过对近年来国内外哮喘动物实验研究文献进行总结，从实验动物的选择、制备模型的方法及模型的应用等方面进行综合分析，为进一步开展哮喘研究提供帮助。 【关键词】哮喘；实验模型；动物 Ｒ￥ｅａｃｈｓｔａｔｕｓｏｎａｎｉｍａｌｍ仇ｌｅｌｏｆｂｒｏｎｃｈｉａｌ嬲ｔｈｍａＬＪｙ抽ｇ’．Ｉｌ“ｎ，ＬＪＣ＾口Ｄ＿ｑ记以．ＤＢ户口ｒ￡ｍ明ｒｏ，Ｒｅ５夕ｉ，ｕ￡ｏｒｙＭｇ矗ｉｃｉ拜Ｐ，执。Ｆｉｒ盯Ａ，，ｉｚｉ口ｆＰｄＨｏｓ户ｉｆ口ｚＤ－厂ＧＭｎ刀ｇｚｉＭＰｄｉｆ口Ｚ己％ｉｔ膪，百ｉｆｙ，Ｎ＆竹行ｉ挖ｇ５３００２１，（玩ｉ珂ａ ｌ［为ｒｒ８ｓｐｏ起ｄｉ以ｇ口“ｆ＾ｏｒ：ＬＪ（流口Ｄ—ｑｉ口粗 【ＡｂＳｔｒａｃｔ】Ｂｒｏｎｃｈｉａｌａｓｔｈｍａｉｓａｋｉｎｄｏｆｃｏｍｍｏｎａｎｄｒｅｃｕｒｒｅｎｔｄｉｓｅａｓｅ，ｓｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇａｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｏｆａｓｔｈｍａｐｌａｙｓａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｒｏｌｅｉｎｅｔｉｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｓｉｓ，ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｙ，ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄ ｃｕｒｅｏｆａｓｔｈｍａ．Ｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｒｅｓｅａｒｃｈｏｎａｓｔｈｍａ，ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｅｄｔｈｅｌａｔｅｓｔａｄｖａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆａｎｉｍａｌ。ｍｅｔｈｏｄｓｏｆｆｏｒｍｕｌａｔｉｎｇａｍｏｄｅｌａｎｄｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｏｄｅｌ． 【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ａｓｔｈｍａ；Ｍｏｄｅｌ；Ａｎｉｍａｌ 支气管哮喘（哮喘）是由嗜酸粒细胞、肥大细胞、 Ｔ细胞及白细胞等多种细胞及细胞组分参与的慢性 气道炎症，并由此产生气道高反应性，从而引起可逆 性气流受限的一种疾病。近二十年来，世界范围内 的哮喘发病率呈上升趋势，哮喘在工业化国家的发 病率翻了一倍，是１５岁以下儿童住院的主要原 因Ｌ１］。然而，哮喘的发病机制复杂，目前为止，人类 对哮喘发病的原因尚未十分明确，而直接对人体进 行实验有很大的限制性，因此，有关哮喘发病原因、 诱发因素、发病机制及药物防治等的研究在相当程 度上还需要通过动物实验进行。下面就近几年来支 气管哮喘动物模型制作的现状作一综述。 ｌ实验动物的选择 目前，国内外常用的哮喘动物模型有小鼠、大鼠 及豚鼠，也有使用马、羊、兔、犬等模型。有关研究发 现哮喘动物模型间不仅存在着种属、品系、性别、年 龄差异，在不同饲养坏境、佐剂及激发方法等方面也 有着显著差异性。 １．１小鼠近年来，随着大量的相关免疫学及分子 作者单位：５３００２１南宁，广西医科大学第一附属医院呼吸内科 通讯作者：李超乾．综述． 生物学试剂的出现，以及小鼠免疫遗传背景较清楚， 品系较纯等优点，用小鼠制作哮喘模型有逐年增加 的趋势，在国外小鼠已成为主要的哮喘模型，国内仍 以大鼠和豚鼠为主。常用的品系有ＢＡＬＢ／ｃ、 Ｃ５７ＢＬ／６、Ａ／Ｊ等，可用于制作过敏性、感染性及转 基因哮喘模型。用小鼠制作的哮喘模型能产生早发 型和迟发型哮喘反应，多数模型均能复制出与人类 相似的特征，包括气道炎症反应、气道高反应性 （ＡＨＲ）、气道黏液增多等，并已制备出反映气道慢 性炎症过程的气道重塑模型。Ｃｏｎｅｊｅｒｏ等［２１利用小 鼠制作的模型能产生明显的ＩｇＥ型超敏反应、细胞 因子［如白介素（ＩＬ一４）、ＩＬ一５、ＩＬ一１３等］明显肺部炎 症浸润。最近有学者研究发现用ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６ 系制作的哮喘模型，其炎症反应无明显差别［３］。小 鼠模型的缺点是体积小，操作及取材较困难，且其制 作往往需要多次致敏和激发。 １．２大鼠大鼠品系纯，来源多，价格较便宜，有关 分子生物学试剂较多，标本采集量较充足，对抗原反 应性较为一致，能出现与人类哮喘类似的速发相及 迟发相变态反应，因而大鼠哮喘模型应用有逐渐增 多的趋势。Ｓｃｈｍｉｅｄｌ等［４３用卵自蛋白（０ＶＡ）和灭 活的百日咳杆菌进行，１周后激发，于激发后４ｈ、万方数据
哮喘动物模型研究现状
哮喘动物模型研究现状 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【摘要】支气管哮喘是呼吸系统一种常见病与多发病。其发病机制复杂，建立合适的动物模型有助于开发治疗人类变应性疾病的新药。本文主要就哮喘动物模型的研究现状进行综述。 【关键词】哮喘动物模型 Abstract：Bronchial asthma is a common disease and frequently encountered disease of respiratory apparatus.The pathogenesy is complicated,establishing suitable animal models of asthma benefits the development of new drug to treat humans’allergic disease.A brief review on the establishment of animal modles on asthma was made in this paper. Key words：asthma;animal modle 支气管哮喘是呼吸系统一种常见病与多发病。有关哮喘发病机制的探索、新治疗方法的评价、新药研究与开发都主要依赖于动物实验。但是，动物自发形成的变应性哮喘很少，目前，哮喘的动物模型还很难完全模拟人类哮喘，只能在动物身上模拟哮喘的某些特征。
本文主要就哮喘动物模型的研究现状进行综述。用于模拟人类支气管哮喘的动物种类很多，常用的如豚鼠、大鼠、小鼠、家兔等，用猫、狗、猪等动物复制哮喘模型也有报道。 1 豚鼠 豚鼠是使用最广泛的变应性疾病动物模型。尽管这种动物与人类有极大差异，但致敏豚鼠的过敏性支气管收缩在研究抗过敏、支气管扩张药物方面仍然是最常使用的模型。 致敏豚鼠的支气管过敏反应是常用的“速发型”变态性支气管收缩模型［1］，这类模型的发病机制与人类的哮喘症相仿，同属Ⅰ型变态反应，其模型发病快，阳性率极高，但病程短，有些动物可发生急性过敏性休克而死亡，为防止动物过度反应死亡，可在激发前给豚鼠腹腔注射适量抗组胺药。腹腔注射卵白蛋白致敏豚鼠，致敏后14～21d，再用1％的卵白蛋白给豚鼠雾化吸入2min或用0.01％的卵白蛋白雾化吸入60min，可诱导豚鼠产生迟发相支气管收缩，在雾化吸入17～24h达峰［2］。此外，豚鼠还是研究职业性哮喘建立的第一种动物模型［3］。 以豚鼠作为哮喘模型有许多好处，例如：价格低廉，易处理，变应原诱发的支气管收缩与人类支气管哮喘中的收缩特点相同。但豚鼠缺乏具有明确基因型的种系，也缺乏相关的免疫学和分子生物学试剂，尽管能产生很好的气道炎症模型，但对于进一步深入研究免疫和遗传机制较困难。因此，在实验中越来越多地使用大鼠、小鼠等动物进行研究。
支气管哮喘新药研究进展
支气管哮喘新药研究进展 随着人们对哮喘的深入研究，哮喘的治疗已取得了显著的进步。但是即使我们采用目前有效的控制哮喘的药物，如联合吸入糖皮质激素和长效β2受体激动剂等，仍然有一些哮喘患者达不到哮喘的临床控制。因此开发新的治疗哮喘药物是今后研究的重点之一。本文介绍近年来国外研发的一些治疗哮喘的新药。 1.支气管舒张剂 1．单异构体β受体激动剂 β受体激动剂可快速、有效地缓解气道阻塞引起的症状，因而在临床上获得广泛应用。β受体激动剂强调具有β2受体特异性和广泛的支气管舒张效应。目前市场上β受体激动剂是由1：1的R异构体和S异构体混合制剂。R异构体有β肾上腺素功能。左旋沙丁胺醇，即消旋沙丁胺醇的R-异构体，可与β2受体结合，活化腺苷酸环化酶，减少细胞内钙浓度，引起平滑肌舒张。R异构体的效应是S异构体的2-3个指数倍数。R异构体可抑制气道上皮因子，化学介质NO的产生，抑制超氧化物和过氧化物酶的产生等。 2．长效β2受体激动剂（LABA） 具有高亲和力，其作用机制：刺激跨膜β2受体,导致G S蛋白的α亚单位分离，活化腺苷酸环化酶，细胞内CAMP增加，介导生物学效应和治疗效应。目前临床上使用的药物有福莫特罗和沙美特罗，两药作用比较如下：福莫特罗为中度脂溶性，穿过胞膜储存，与β2受体相互作用，作用持续时间呈浓度相关性。作用迅速，具有选择性，是为全激动剂。沙美特罗为高度脂溶性，通过弥散跨膜，侧链结合到疏水氨基酸的辅助外结点，使得分子头部可以重复与受体活性部位结合和分解，导致作用持续时间延长。作用持久，具有高度选择性，为部分激动剂。这两种LABA都需要每次12h使用1次。 （1）茚达特罗（Indacaterol）是近年来由诺华公司推出的新型的LABA。茚达特罗的作用时间可以长达24 h。每天只需使用1次，能够快速起效，临床疗效具有剂量依赖性。茚达特罗已获得中国上市的批准，很快将在临床使用。 （2）卡莫特罗（Carmoterol）是另一种作用时间可持续24h或者更长的新型LABA。它是完全的（R,R）异构体，具有极高的活性和对β2受体的选择性，能够快速起效。卡莫特罗由日本田边制药（Tanabe Seiyaku）开发。 （3）阿福特罗（Arformoterol）是外消旋福莫特罗（R,R－福莫特罗）的单异构体。它由美国Sepracor公司开发，其雾化制剂最近已被美国FDA批准使用。它是一种安全有
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定教程文件
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定 实验肿瘤学的需要导致肿瘤动物模型的产生,借以研究人类肿瘤的病因、发生、发展以及治疗和预防。肿瘤动物模型可来自于动物的自发肿瘤、诱发肿瘤和移植性肿瘤。 一前两者由于对动物品系要求严格、实验周期较长或缺少实验一致性而较少使用。移植性肿瘤动物模型具有特性明确、生长一致性好、实验周期短、瘤株分布广泛、可反复复制等优点,在肿瘤研究中占有重要地位。可移植性肿瘤,是把动物或人的肿瘤移植到同系、同种或异种动物,经传代后,组织类型和生长特性已趋稳定,并能在受体动物中继续传代,又称为可移植性肿瘤细胞。二可移植性肿瘤移植于同系或同种动物,称为同种移植,是国内外最常用的肿瘤动物模型复制方法之一。同种移植的优点是,可供选择使用的细胞系或细胞株多,许多细胞系在世界范围分布广泛,并且这些细胞的生物学特性已经比较明确,一般都有明确的背景资料,使一群动物同时接种同样量的瘤细胞,生长速度一致、个体差异较小,成活率高,易于对照观察,这些都是便于科研成果相互比较和交流的有利因素 三在接种过程中，应把握注射深度，否则易造成内脏损伤。接种后三天即开始观察有无肿瘤形成。本实验具有周期短、制作方便、成功率比较高、较好重复性和稳定性的明显优势，是一种较为理想的肿瘤实验动物模型，值得推广。 肝癌肿瘤模型建立： 抗肿瘤药物及制剂的药效学评价，可通过建立小鼠荷瘤数据模型，探索肿瘤生长的本质及其发生发展的规律，探究其抗肿瘤效果。 方法：小鼠右腋下注射H22肿瘤细胞，注射部位发生癌变，小鼠肿瘤生长明显，切片结果证明实验成功，模型构建完成，使小鼠荷瘤，观察肿瘤生长，记录体重数据并建立动物模型。 1材料与方法 1.1实验材料 1.1.1动物及分组：取20只昆明鼠随机分成A组（10只），B组（5只），C组对照组（5只），编号饲养。 1.1.2试剂：无菌水，生理盐水，台酚蓝，2%冰醋酸，甲醛，乙醇，二甲苯，石蜡等。 1.1.3仪器：离心机，显微镜，计数板，电子称，超净工作台，温箱，切片机等。 1.2实验方法 1.2.1模型建立：取H22肿瘤细胞，3000转离心分钟，再用无菌生理盐水洗涤肿瘤细胞3次，并做适当稀释，取40微升细胞悬液加入10微升0.4%台酚蓝染色并镜检计数，制成浓 度为3*106个/ml的肿瘤细胞悬液，每只小鼠右腋皮下接种肿瘤细胞悬液0.2毫升。 1.2.2：细胞计数：细胞计数液2%冰醋酸溶液。 取50微升细胞悬液加入450微升的细胞计数液中计数。 1.3记录： 接种完成后,逐日观察接种部位有无感染,肿瘤生长后有无自然消退,用游标卡尺，每周测量肿瘤长径a和短径b ,并计算平均直径,即r = (a + b) /2，每天称量小鼠体重和肿瘤并记录，绘制曲线。 1.4制备组织切片： a处死小鼠，将肿瘤组织切成1*1*0.4cm的小块。 b将切块的组织置于螺口瓶中，加入40%甲醛固定，过夜。
支气管哮喘的体内和体外动物模型的研究现状
国际呼吸杂志２００８年第２８卷第６期ＩｎｔＪＲｅｓｐｉｒ，Ｍａｒ．２００８，Ｖ０１．２８，Ｎｏ．６ 支气管哮喘的体内和体外动物模型的研究现状 彭锦覃冬云 【摘要】通过对近年来国内外建立的支气管哮喘体内外动物模型的研究进行总结，从常用动物的选择、模型的分类到模型的应用及仍然存在的问题等方面进行综合分析，强调在实际运用时，不应该拘泥于某一种模型，而应该根据实验目的选择最能敏感地反映出研究指标的动物模型。 【关键词】哮喘；实验动物模型；体内；体外 Ｃｕｒｒｅｎｔｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｏｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｏｆ嬲ｔｈｍａｉｎｖｉｖｏａｎｄｖｉｔｒｏＰＥＮＧＪｉ行，ＱｆＮＤｏ咒ｇ一３Ｊ甜咒．匕６０ｒ口￡ｏｒｙＤ－厂Ｐ忍ｎ，‘，ｎｎｃｏＺｏｇｙ，ｌ！孰盘挖ｇｄｏ卵ｇ ＭＰｄｉｆ口ＺＣＤＺＺｅｇＰ，．Ｚ矗口起Ｊｉ盘，２９５２４０２３，Ｇｈｉ行ｎ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｔｈｒｏｕｇｈｒｅｖｉｅｗｉｎｇｒｅｃｅｎｔａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｉｎｇｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｏｆａｓｔｈｍａｈｏｍｅａｎｄａｂｒｏａｄ，ａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｉｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｆｒｏｍｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｉｍａｌｓｆｏｒａｓｔｈｍａｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｔｏｔｈｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓｕｌｔｉｍａｔｅｌｙｔｏｔｈｅｅｘｉｓｔｉｎｇｑｕｅｓｔｉｏｎｓ。Ｉｔｅｍｐｈａｓｉｚｅｓｔｈａｔａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓｓｈｏｕｌｄｂｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｓｏｆｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈ，ｔｈｕｓｒｅｆｌｅｃｔｉｎｇｔｈｅｉｎｄｅｘｏｆｒｅｓｅａｒｃｈｍｏｓｔｓｅｎｓｉｔｉｖｅｌｙｉｎｐｒａｃｔｉｃａｌｕｓｅ，ｂｕｔｓｈｏｕｌｄｎｏｔａｄｈｅｒｅｔｏｏｎｅｃｅｒｔａｉｎｍｏｄｅｌ． 【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ａｓｔｈｍａ；Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌ；Ｖｉｖｏ；Ｖｉｔｒｏ 支气管哮喘（简称哮喘）是由多种细胞参与的慢 性气道炎症性疾病，以可逆性气道阻塞、气道高反应 性（ＡＨＲ）和气道炎症为主要特征。近年来国内外 哮喘发病率不断上升，已成为危害人类健康的一类 重要疾病。 由于在哮喘患者中直接进行调查和临床研究存 在着科学和伦理学上的业障，有关其病因的确定、发 病机制的探索、治疗方法的评价和新药的研发在很 大程度上需要通过动物实验进行。就现阶段不同研 究方向中所应用的不同模型而言，动物模型可分为 三类：活体内模型、活体外模型和离体外模型。本文 将离体外模型并人活体外模型一起讨论。 ｌ哮喘的活体内模型 在哮喘动物模型中，活体内模型能模拟疾病发 病全过程，为探讨其它多种体内外因素对疾病的影 响提供了一个平台，因而受到广大研究者的青睐。 １．１哮喘模型动物的选择哮喘在动物界不是一 个天生的疾病，一般需人工建立。表１是人工建立 哮喘模型中使用过的动物种类和它们在应用中的优 缺点比较。 １．２哮喘动物模型的分类近年来，随着对哮喘发 病机制的广泛研究，各种病因所致的哮喘动物模型 日益发展起来。哮喘动物模型制作可归纳为五种： ①过敏性哮喘动物模型；②感染性哮喘动物模型；③ 职业性哮喘动物模型；④运动性哮喘（ＥＩＡ）动物模 型；⑤转基因动物哮喘模型。 作者单位：５２４０２３湛江，广东医学院药理学教研室．综述． １．２．１过敏性哮喘动物模型导致哮喘的变应原多 数为吸人性，故哮喘动物模型的制作多采用变应原致 敏后，再经气道给予变应原诱发哮喘发生。制作过敏 性哮喘动物模型的变应原主要有卵自蛋白（０Ⅵ～）、蛔 虫卵、尘螨、豚草、花粉、乳胶、蟑螂等。 １．２．１．１ＯＶＡ诱发的哮喘模型ＯＶＡ来源容 易，价格低廉，免疫原性强，最常应用于制备哮喘模 型。按抗原的组合，可分为两大类，单纯ＯＶＡ致敏 与激发和复合形式的ＯＶＡ致敏与激发。①单纯的 ＯＶＡ致敏和激发：Ｋｕｍａｒ等ｎ１使ＢＡＬＢ／ｃ小鼠吸 人高浓度ＯＶＡ致敏，然后雾化吸入低浓度ＯＶＡ， 持续８周，制出慢性哮喘动物模型；Ｉｔａｍｉ等［２１对 Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下植人热凝结鸡卵蛋白碎片使其致 敏，３周后，气管内注射热凝聚卵蛋白一次激发，复 制出哮喘气道嗜酸粒细胞（ＥＯＳ）浸润和发作期 ＡＨＲ模型。②复合形式的ＯＶＡ致敏和激发：是以 ＯＶＡ为过敏原，其它物质为佐剂。姜鲁宁等［３３先用 含有ＯＶＡ、氢氧化铝凝胶及灭活百日咳杆菌的混合 液腹腔注射致敏，再以０ｖＡ一次激发，造出ＳＤ大鼠 哮喘模型。田代印等Ｈ３用硫酸铝钾取代氢氧化铝，并 用氢氧化钠调节ｐＨ值，使蛋白质变性，两者形成混 悬小球后能充分混合，增强了ＯｖＡ的致敏效果。 １．２．１．２尘螨诱发的支气管哮喘模型为使模型 更接近人类哮喘自然发病过程，目前很多研究者倾 向于使用空气源性过敏原。空气源性过敏原以尘螨 （屋尘螨和粉尘螨）最为常用。已知尘螨有两种活性 成分（Ｄｅｒｐ１和Ｄｅｒｐ５）。目前模型的制作多采用 Ｃｌａｒｋｅ等［５３的方法，但国内郝敏麒等口３报道，单纯采 用Ｃ１ａｒｋｅ方法并不能制出满意的哮喘模型，可能因万方数据
哮喘的中医治疗研究进展
哮喘的中医治疗研究进展 支气管哮喘属中医喘证、哮证范畴，是因宿痰伏肺，遇诱因引触，导致痰阻气道，气道挛急，肺失肃降，肺气上逆所致的发作性痰鸣气喘疾患，是严重危害人类健康的肺部疾病之一，有缠绵难愈、反复发作的特点，而长期反复发作常可并发慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病，使患者的生活质量受到严重影响，所以及时有效的治疗尤为重要。西医治疗哮喘的药物主要有缓解哮喘发作及控制哮喘发作的两类药物，以β受体激动剂和糖皮质激素为主。而中医药治疗哮喘是通过祛除致病因素，控制哮喘发作症状，提高患者的免疫功能，以达到祛邪治病，改善生活质量的目的。中医治疗哮喘在控制症状、消除病因、减少不良反应等方面有明显优势。 标签：哮喘；中医治疗；研究进展 支气管哮喘（Bronchial asthma）简称哮喘，是由多种炎症细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾患，在中医学中属哮证、哮病、呷嗽等范畴。中医学对哮喘的认识己有几千年历史并积累了丰富的临床经验，尤其对于哮喘缓解期的中医药治疗，不仅可以减轻发作时的症状和发作频率，改善肺功能，而且可以提高机体免疫功能，现分类综述如下： 1从肺脏论治 素问《五脏生成》中有关对肺的重要性论述：“肺者，气之本”“诸气者，皆属于肺”，明确指出肺的主要生理功能是主气，司呼吸，主宣发肃降，朝百脉，主治节等方面，肺气以宣发肃降为基本的运行模式。肺位于上焦，肺叶娇嫩，不耐寒热燥湿诸邪的侵袭[1]。现代多数医家认为，痰阻气道致肺失宣降，风盛痰阻致气道挛急是哮喘急性发作的主要病机，风盛是其主要致病因素，治宜补肺固表，消风化痰为主[2]。汤翠英[3]总结林琳主任治疗哮喘的经验，主张”以温药和之”的治疗原则，其中缓解期，气虚者用玉屏风散合桂枝汤化裁以补肺固表、护卫益气。 2 从肺脾论治 《医方集解》云：“哮虽为肺病，然肺金以脾土为母，故肺中之痰浊亦以脾中之湿为母。”并有”脾为生痰之源，肺为贮痰之器”之说。刘自力等[4]认为哮喘其病位在肺，而本在脾，通过健脾益肺，使脾气健旺，则肺无痰贮，其气喘自平，利于疾病的恢复。刘绳武[5]认为，喘在肺为标，其本在脾胃，而其源在于血瘀。许克奇[6]认为，缓解期多属虚证，主要表现在肺、脾、肾三脏，根据其病情以补肺、健脾、补肾分而治之。《素问●评热病论篇第三十三》中有”不能正偃者，胃中不和也；正偃则咳甚，上迫肺也”说明”卧不安”是由于胃腑不和，逆气上行，进而累及肺气不能肃降，”息有音”而”不能正偃”国外有人研究表明：45%～65%哮喘患者伴有胃食管反流症（GER）[7]。因此，对于用常规平喘药物，尤其是皮质激素治疗也不能缓解夜间频繁发作的哮喘患者，临床上找不到明确的病因，
支气管哮喘发病机制的研究进展
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2016 Vo1.16 No.64 34 [2] 朱远玲,曹奎轩,郭玲,刘鏐，等.针刀疗法配合截血膏外敷治疗早 期膝骨性关节炎180例[J].湖北中医杂志,2011年,第33卷(第10期):62-63. [3] 秦强,王风云.推拿手法配合TDP照射治疗膝骨性关节炎130例[J]. 中国实用医药,2011年8月,第6卷(第24期):233. [4] 张钟浩.中药口服加外敷治疗膝骨性关节炎119例[J].中国中医 药科技,2011年9月,第18卷(第5期):428.[5] 刘明祥.臭氧与玻璃酸钠在骨性关节炎治疗中的应用[J].当代医 学,2011年7月,第17卷(第21期总第248期):77--78. [6] 汤紫英.综合疗法治疗膝关节骨性关节炎[J].特色疗法中国民间 疗法,2011年5月,第19卷(第5期):35. [7] 张蓉,李峰,李珩,王常海,宋月晗，等.膝关节骨性关节炎针灸治 疗选穴特点及分析[J].中国康复医学杂志,2007年,第22卷(第4期):357-358. ·综述· 支气管哮喘发病机制的研究进展 杨潇，沈金花 （中南民族大学生命科学学院 医学生物研究所，湖北 武汉 430074） 摘 要：哮喘是一种气道慢性炎症引起的以气道高反应性和可逆性阻塞为特点的疾病，在老人和儿童群体中具有很高的发病几率。随着学者对其研究的越来越深入，对其发病机制的阐述也越来越全面。本文主要从细胞及细胞因子方面阐述哮喘的发病机制。 关键词：支气管哮喘；发病机制；细胞；细胞因子 中图分类号：R562.2+5 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1671-3141.2016.64.024 0 引言 支气管哮喘(简称：哮喘)是一种严重威胁人类健康的慢性的长期的呼吸系统疾病，目前，全球有大约3亿人口患有哮喘并且患病率还有逐年增加的趋势。哮喘不仅对人类健康造成威胁，而且对经济也产生了巨大的影响。哮喘有两个最重要的两个特征是气管平滑肌细胞的收缩性增强以及气道的兴奋性应答[1]。由于哮喘的发病机制复杂，诱发以及参与发病的因素很多，至今尚未对其机制解释清楚。哮喘是由肥大细胞、嗜酸性粒细胞（EOS）、T 淋巴细胞等多种细胞和细胞因子参与的气道慢性变态反应性炎症，其中，T淋巴细胞在哮喘发病机制中起着尤为重要的作用。同时哮喘也是一种外周免疫耐受机制发生缺陷而引起的疾病，机体免疫耐受受损，导致免疫细胞对自身组织结构和功能的破坏。本文主要就引起哮喘的细胞及细胞因子和免疫学机制做一综述。 1 T淋巴细胞在哮喘中的影响 自1980年以来，辅助性T细胞(Th细胞)已经被确定为可以调控免疫反应的一类关键的免疫细胞，Th细胞可以分为Th1、Th2等。Th1细胞也称为炎症性T细胞，主要介导细胞免疫和炎症反应，通过释放IL-2、IL-3、INF-γ、TNF-β等细胞因子产生免疫应答反应，对哮喘具有较好的保护作用。Th2可以产生IL-4、IL-5、IL-6和IL-13等细胞因子，在寄生虫入侵引起的免疫反应中扮演了关键的角色[2]，也在过敏性哮喘的发病机制中具有重要作用。Th2存在于肺部疾病缓解期间，接触过敏原，刺激感受器激活，参与病情恶化[3]。 现在学者一致认为哮喘的发生是体内Th1/Th2比例失衡所导致的。Th1/Th2比例失衡是哮喘发病的重要基础。Th1/Th2比例关系趋于Th2占优势，IL-4、IL-5、IL-6和IL-13等细胞因子明显增多，IL-4促进IgE的产生，IL-5促进嗜酸性粒细胞的生长分化，IL-13促进粘液的分泌和诱导气道高反应。可见，Th2细胞的异常增殖在哮喘发病机制中尤为重要。B7分子表达与活化的B细胞表面，CD28和CTLA-4都表达在活化的T细胞上。在免疫调节中，B7与CD28结合可以为初始T细胞提供协同刺激信号，促进T细胞活化增殖，而B7与CTLA-4结合则提供抑制信号给活化的T细胞，抑制T细胞增殖。因此，此途径可以纠正Th1/Th2平衡失调，对治疗哮喘具有重要的意义。2 细胞因子对哮喘的影响 细胞可以诱导气道的慢性炎症，但细胞因子是免疫活性细胞的效应因子，细胞因子的免疫调节功能在哮喘发病机制中处于中心地位。这里主要介绍IL-3、IL-4、IL-5和IL-13等细胞因子的功能。 2.1 IL-3。IL-3也称为多能集落刺激因子，是嗜酸性粒细胞（EOS）的活化因子，主要由活化的CD4+T细胞产生。IL-3可以促进组胺的释放，增强EOS的活性，促进EOS抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用，破坏气道上皮，参与气道炎症形成。 2.2 IL-4。Th0细胞产生IL-4，产生的IL-4诱导Th0细胞向Th2细胞转化，并刺激Th2细胞产生更多的IL-4。IL-4是B细胞生长因子，作用于B淋巴细胞，促进其增殖分化为浆细胞，产生IgE，IL-4还可以改变B细胞产生抗体的类型，使IgM转化为IgE，与哮喘变应性炎症的发生。 2.3 IL-5。IL-5由抗原活化的CD4+ T细胞和肥大细胞产生，主要刺激嗜酸性粒细胞的增殖分化。IL-5对气道炎症中EOS浸润和活性调节起着重要作用，IL-5可以通过阻止EOS发生凋亡而延长其存活。IL-5特异性的作用于EOS，引起EOS增殖和活化，引起气道上皮损伤和气道高反应。目前，IL-5已经成为筛选抗哮喘药物的新的重要靶点。 2.4 IL-13。IL-13也是由T细胞分泌的细胞因子，作用于B细胞，可促进B细胞的分化，诱导B细胞产生IgG、IgM抗体并向IgE 转化，提高体内IgE水平，参与哮喘的发生。IL-3还可以激活内皮细胞表达VCAM-1，血液中的嗜酸性粒细胞能自发地黏附VCAM-1，导致呼吸急促以及嗜酸性细胞释放蛋白。 综上所述，哮喘是一种有多个因素参与的，复杂的呼吸道疾病，并且每一个因素都在其发病机制中参与了重要的作用。随着研究更加深入，更多有效的新型药物将被应用于临床，哮喘的治疗手段也逐渐由传统的单一疗法转变为联合治疗，这必将使广大哮喘患者的症状得到更好的控制，生存质量也不断提高。 参考文献 [1] Katsumoto TR, Kudo M, Chen C, Sundaram A, Callahan EC, Zhu JW, Lin J, Rosen CE, Manz BN, Lee JW et al: The phosphatase CD148 promotes airway hyperresponsiveness through SRC family kinases. The Journal of clinical investigation 2013, 123(5):2037-2048. [2] Li Z, Zhang Y, Sun B: Current understanding of Th2 cell dif- ferentiation and function. Protein & cell 2011, 2(8):604-611. [3] Epstein MM: Targeting memory Th2 cells for the treatment of aller- gic asthma. Pharmacology & therapeutics 2006, 109(1-2):107-136.