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醋酸洋红液为什么是碱性染料

醋酸洋红液为什么是碱性染料
醋酸洋红液为什么是碱性染料

醋酸洋红液为什么是碱性染料?

一:醋酸洋红的PH值小于7

高中生物学课本在描述染色质时指出:染色质(体)容易被碱性染料染成深色.实验中对染色质(体)进行染色.须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂.这些染色剂是以龙胆紫或洋红溶解于醋酸溶液中制得.配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性).

二:醋酸洋红是碱性染色剂

那么为什么把龙胆紫溶液称为碱性染色剂呢?

作为染色剂必须具备两个条件:一是具有颜色,二是要与被染组织间有亲和力.染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的.产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质.作为染料物质.除了有发色基团外.还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团.如染料化合物中往往由硝基(-NO2).偶氮基(-N=N-).乙烯基等形成了发色基团.而由

-OH.-SO3H.-COOH等酸性基团和-NH2.-NHCH3.-N(CH3)2等碱性基团构成了助色基团.它们的存在使染料物质离子化.极性增强.促进染料与组织间发生作用.产生染色效果.我们把助色基团中具有酸性或碱性基团的染料分别称为酸性或碱性染色剂.

如硝基是一种发色基团.当苯环中的3个氢原子被3个硝基取代后就成为三硝基苯的黄色化合物.三硝基苯不是染料.仅有一个发色基

团.它不溶解于水.也不能电离.既不酸也不碱.不能与酸或碱形成盐类.如果三硝基苯分子中.用羟基再置换一个氢原子.就成为三硝基苯酚.即苦味酸.它即是一种黄色染料.有电离作用.与强碱能形成盐.这里的羟基便是助色基团.由此可知.苦味酸的颜色是由发色基团(硝基)所致.而它的染色性能则是由助色基团(羟基)形成的.如用氨基代替硝基.就形成无色化合物.不是染料.由此可见.作为染料.必须有发色基团和助色基团相互配合.缺一不可.

如伊红Y含有一个(-COOH)助色基团.在水中电离时放出氢离子.本身带负电荷.配制成伊红Y染料时.与强碱NaOH作用生成盐

(-COONa).此物质的Na+反而在溶液中呈碱性.所以不能认为酸性染料在溶液中就是酸性.

所以.酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的.而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定.一般来说.助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂.反之则为酸性染色剂

醋酸洋红染色液

醋酸洋红染色液 编码名称规格单位 北京华越洋生物GT12219-100ml醋酸洋红染色液100ml瓶 醋酸洋红染色液说明: 醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。在观察植物细胞有丝分裂时,对染色体进行染色,需要用碱性染液,此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。花粉检测中,可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。华越洋醋酸洋红染色液含高浓度乙酸和洋红,pH呈酸性,是很好的细胞核、线粒体染色剂。 醋酸洋红染色液操作说明:(仅供参考) 1.花粉类颗粒:取少量花粉物质置于载玻片,滴加适量醋酸洋红染色液,充分混合,立即 盖片染色10~30min后,吸去多余液体,显微镜下观察。 2.动植物切片:常规处理(如脱蜡至水),滴加醋酸洋红染色液染色5~20min,自来水冲洗, 封片,显微镜下观察。 3.部分新鲜植物组织(如洋葱表皮),直接浸染于醋酸洋红染色液5~20min,自来水冲洗2~ 3min,置于载玻片并盖上盖玻片,显微镜观察。 醋酸洋红染色液注意事项: 1.染完色后,应立即显微镜下观察。 2.由于醋酸洋红染色液试剂含有高浓度弱酸,有刺激性气味,请注意自我保护。 3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。 储存条件:避光常温保存,复检期为1年。 醋酸洋红染色液的相关染色液: 名称规格名称规格 中性红染色液(0.33%)500ml 结晶紫水溶液(0.1%) 100ml 中性红染色液(0.5%)500ml 核固红染色液(0.1%) 100ml 中性红染色液(0.1% 常规染色) 100ml 天狼星红染色试剂盒2*50mL TTC染色液(0.4%)500ml 0.5%伊文斯蓝/埃文斯蓝溶液100mL Masson三色染色试剂盒7×50ml 茜素红S染色液(1%,pH4.2) 100mL 普鲁士蓝染色试剂盒2*50ml 0.2%核固红染色液100ml 尼氏染色液(焦油紫法) 2*100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液100ml 吕氏碱性美蓝染色液(0.4%)100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液500ml 亮绿SF染色液100ml Ehrlich苏木素染色液100ml 溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液100ml Ehrlich苏木素染色液500ml 饱和油红O染色液100ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 100ml Van Gieson 染色液50ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 500ml Van Gieson 染色试剂盒3×50ml 改良Harris苏木素染色液100ml Schiff试剂50ml 改良Harris苏木素染色液500ml 茜素红S染色液(0.2%)100ml Mayer苏木素染色液100ml 煌焦油蓝染色液100ml Mayer苏木素染色液500ml 2% TTC染色液100ml 苏木素伊红(HE)染色液2×100ml 革兰氏染色液试剂盒4×10ml 苏木素伊红(HE)染色液2×500ml 醋酸洋红染色液100ml Core苏木素染色液100ml 姬姆萨原液100ml Core苏木素染色液500ml 姬姆萨工作液100ml Carazzi苏木素染色液100ml 瑞氏-姬姆萨复合染液100ml Carazzi苏木素染色液500ml 瑞氏染液50ml Delafield苏木素染色液100ml 结晶紫染色液(2.5%) 10ml Delafield苏木素染色液500ml 结晶紫染色液(1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 100ml 结晶紫染色液(0.1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 500ml 荚膜染色液(试剂盒)50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 100ml 芽孢染色液(试剂盒)50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 500ml 鞭毛染色液(试剂盒)100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 100ml 石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 500ml 改良型石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Heidenhain铁苏木素染色液3×100ml 抗酸染色液(试剂盒)50ml×3 天青石蓝苏木素染色液2×50ml 吕氏碱性美蓝染色液(0.1%)100ml 改良MacConaill铅苏木素染色液140ml 卢戈碘液(革兰氏染色)10ml 苏木素无水乙醇溶液(5%) 100ml 番红染色液(沙黄)10ml 苏木素无水乙醇溶液(10%) 100ml 卢戈碘液(标准碘液)100ml 伊红染色液(进口水溶) 100ml Mayer'苏木素染液(免疫组化) 10ml 伊红染色液(进口水溶) 500ml HE染色液(试剂盒) 3×10ml 伊红染色液(水溶) 100ml Cole氏苏木素染色液(常规染色) 100ml 伊红染色液(水溶) 500ml Weigert苏木素染色液2×50ml 伊红染色液(水溶,5%) 100ml

改良型石炭酸复红染液(卡宝品红染色液)使用说明

改良型石炭酸复红染液(卡宝品红染色液)使用说明 货号:G1165 规格:100ml/500ml 保存:室温密封保存,有效期12个月。 产品说明: 改良型石炭酸复红染色液又称卡宝品红(Carbol fuchsin)染色液、改良苯酚品红染色液。该染色液与醋酸洋红有相似之处,醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。生物学上也常用卡宝品红(Carbol fuchsin)作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。染色体染色时用醋酸洋红染色液染色,虽然染色效果较好,但却存在着染色需时较长的问题。 改良型石炭酸复红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法,染液稳定。索莱宝改良型石炭酸复红染色液采用改良配方,加入衬染剂,使染色效果更佳。主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色,是很好的细胞核、线粒体染色剂。 使用步骤(仅供参考): 1.固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液(3份甲醇:1份冰乙酸)中固定2~24h,再分别在95%和85%乙醇中各30min,再转入70%酒精中,可4℃保存备用。 2.解离取固定好的植物组织,用蒸馏水漂洗2~3次,放入1N HCl溶液中60℃水解8~12min,再用蒸馏水洗净。 3.染色将组织放在载玻片中央,用镊子或解剖针将材料轻轻捣碎。滴加改良苯酚品红染液,染色8~15min后,盖上盖玻片。 4.压片在盖玻片上面铺上滤纸,固定好盖玻片,用拇指垂直压片,然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片,至肉眼见材料呈雾状即可,使细胞核染色体分散。 5.镜检观察显微镜下观察染色形态和计数,对典型分裂相细胞进行摄影记录。

注意事项: 组织4℃保存时间最好不超过二个月。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴手套操作。

高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)精编版

1 斐林试剂检测可溶性还原糖 原理:还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热. 应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎. 2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪 原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色 注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察. 应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪. 3 双缩脲试剂检测蛋白质 原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色 注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热). 应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定. 4 碘液检测淀粉 原理:淀粉+碘液→蓝色 注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘. 应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉 5 DNA的染色与鉴定 染色原理:DNA+甲基绿→绿色 应用:可以显示DNA在细胞中的分布. 鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色

应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂. 6 吡罗红使RNA呈现红色 原理:RNA+吡罗红→红色 应用:可以显示RNA在细胞中的分布. 注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色. 7 台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色. 应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性. 8 线粒体的染色 原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色. 应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在. 9 酒精的检测 原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色. 应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶. 10 CO2的检测 原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.

2017年陕西省普通高中学业水平考试真题

2017年陕西省普通高中学业水平考试真题 (时间:90分钟满分:100分) 一、选择题(共30小题,每小题2分,共60分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的) 1.细胞学说是十九世纪自然科学的三大发现之一。下列有关叙述不正确的是( ) A.一切动植物都是由细胞发育而来的 B.细胞是生物体结构与功能的基本单位 C.细胞学说揭示了生物体结构的统一性 D.人类对细胞的认识已深入到分子水平,不必继续研究 2.认识细胞这个基本生命系统,首先要分析它的物质组成与功能。下列化合物与其功能不符的是( ) A.自由水是细胞内的良好溶剂 B.脂肪是细胞内良好的储能物质 C.糖类是细胞内唯一能源物质 D.无机盐对维持生物体生命活动有重要作用 3.蛋白质是生命活动的主要承担者。下列相关叙述正确的是( ) A.组成蛋白质的基本单位是氨基酸 B.两分子氨基酸缩合成二肽需脱去2分子水 C.生物体中的蛋白质都具有催化作用 D.蛋白质功能的多样性与空间结构无关 4.物质进出细胞的方式与其大小、性质以及细胞膜的结构有关。下列有关叙述不正确的是( ) A.氧气分子进出细胞不消耗能量 B.抗体以胞吐(外排)方式排出细胞 C.协助(易化)扩散速率与载体无关 D.主动运输需要载体蛋白和能量 5.细胞内每时每刻都进行着许多化学反应,这些反应的顺利进行离不开酶与ATP的重要作用。下图表示在酶1和酶2催化下ATP与ADP相互转化的过程,有关叙述不正确的是( ) A.ATP分子的结构简式是A~P~P~P B.ATP是生命活动的直接能源物质 C.酶1、酶2的活性受温度影响 D.酶1、酶2专一性保证图示反应有序进行 6.细胞核是细胞的控制中心。下列有关细胞核的叙述不正确的是( ) A.遗传信息主要储存于细胞核中 B.细胞核是遗传物质复制和转录的主要场所

常用染色液配方

实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升 B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升 B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升 B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升 将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。两液混合即成。 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。 7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。 11动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色:二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min,依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min,蒸馏水洗;入苏木精染液10 min,盐酸酒精分色4 s,自来水洗10 min;依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min,入伊红染液染色 10 min;入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明,中性树脂封片. 一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ;碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。 配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ;95%酒精10ml ;过滤后再加入10ml甘油(2)先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。 (3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1%醋酸洋红(aceto carmine)酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。

铁矾醋酸洋红染色液

铁矾醋酸洋红染色液 简介: Leagene 铁矾醋酸洋红染色液又称明矾胭脂红染色液,主要由高浓度乙酸、洋红(也称胭脂红)等组成,pH 呈酸性。铁矾醋酸洋红染色液主要用于花粉、动植物组织切片等样本中细胞学的染色,尤其适用于小麦花粉、洋葱根尖表皮细胞等,能够较为清楚的显示染色体、细胞核(被染成深红色),细胞质呈浅红色。该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 组成: 自备材料: 1、载玻片 2、盖玻片 3、光学显微镜 操作步骤(仅供参考): 1、花粉类颗粒:取少量花粉物质置于载玻片,滴加适量铁矾醋酸洋红染色液,充分混合,立即盖片染色后,吸去多余液体,显微镜下观察。 2、动植物切片:常规处理(如脱蜡至水),滴铁矾醋酸洋红染色液染色,自来水冲洗,封片,显微镜下观察。 3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮),直接浸染于铁矾醋酸洋红染色液,自来水冲洗2~3min,置于载玻片并盖上盖玻片,显微镜观察。 4、如果效果不佳,在酒精灯上迅速来回轻烤几次,以破坏染色质,使细胞核着色。注意事项: 1、染完色后,应立即显微镜下观察。 2、由于本试剂含有高浓度弱酸,有刺激性气味,请注意自我保护。 3、注意密闭保存,否则染色效率会下降。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。编号 名称DA0043Storage 铁矾醋酸洋红染色液 100ml RT 避光使用说明书1份

有效期:12个月有效。 相关: 编号名称 CS0001ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DA0065台盼蓝染色液(0.4%) DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液 PW0053Western抗体洗脱液(碱性) TC0699植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) TC0733乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)

颜色反应实验归纳

一、颜色反应归纳及拓展 (1)碘应是单质成分,不是离子成分。若用碘来检测叶片光合作用产生的淀粉,则需要先对叶片进行脱色处理。 (2)斐林试剂和双缩脲试剂均由NaOH 溶液和Cu 2SO 4溶液组成,但两者NaOH 溶液的浓度不同,并且两者的使用方法也不同。如斐林试剂甲液和乙液要等量混合均匀后使用,即现用现配,而且要水浴50-60℃加热,而双缩脲试剂在使用时,先加甲液后再加乙液,加的量不同(甲液1mL ,乙液4滴),而且不需要加热。 (3)蛋白质的鉴定是在碱性环境下Cu 2+与蛋白质的肽键结合成特定化合物的紫色反应。而还原糖的鉴定是新制的的Cu(OH)2 与还原糖的醛基反应,生成砖红色的Cu 2O 沉淀。 (4)健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料。可使活细胞中的线粒体染成蓝绿色,而细胞质接近无色。 (5)观察DNA 和RNA 在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂(即吡罗红甲基绿染色剂),而不是单独染色,应该注意的是该试剂应现用现配。 (6)根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以定量检测酵母菌培养液中CO 2的产生情况。 (7)染色体(染色质)容易被碱性染料龙胆紫溶液染成深紫色,用高倍显微镜可以观察细胞的有丝分裂过程中染色体的行为。另外,脂肪的鉴定和细胞中线粒体的观察,也需要染色后,再借助显微镜观察。 (8)龙胆紫和醋酸洋红均为碱性染料,染色体被龙胆紫染成紫色,而被醋酸洋红染成红色。 2012·安徽卷)某同学以新鲜洋葱鳞片叶内表皮为材料,经不同处理和染色剂染色,用高倍显微镜观察。下列描述正确的是( ) A .经吡罗红甲基绿染色,可观察到红色的细胞核 B .经吡罗红甲基绿染色,可观察到绿色的细胞质 C .经健那绿染色,可观察到蓝绿色颗粒状的线粒体 D .经苏丹Ⅲ染色,可观察到橘黄色颗粒状的蛋白质 解析:甲基绿能将DNA 染成绿色,吡罗红能将RNA 染成红色,DNA 主要分布在细胞核中,RNA 主要分布在细胞质中,A 、B 项错误;健那绿可将线粒体染成蓝绿色,C 项正确;苏丹Ⅲ可以用来鉴定脂肪,不能用来鉴定蛋白质,D 项错误。 答案:C

高中生物常用的染色剂染色机理

普知--关于遗传物质被碱性染料染色~ 碱性液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用1.2龙胆紫C笛HIN具有金属光泽的暗绿色粉末。能溶于水、三氯甲烷和醇;难溶于醚。加热至275℃分解。其1%一2%溶液俗称紫药水,是人们所熟悉的外用药。 2染色剂的配制 2.1配方1醋酸一洋红染液取100mL45%冰醋酸,煮沸后徐徐加入洋红1g,搅拌均匀后加入1颗锈铁钉,煮沸10min,冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。 2.2配方2龙胆紫染液,取龙胆紫1~2g,溶解在100mL2%乙酸溶液中,直到溶液成深紫色为止(实验过程中视具体情况溶液可适当稀释)。保存在棕色瓶内。 3染料的作用机理 3.1碱性染料染色试剂的酸碱性与溶液的酸碱性不是一回事。染色试剂的酸碱性,其划分依据在于染料分子电离后的有色成分是阳离子还是阴离子,如果着色的基团是阳离子的为碱性染料,着色的基团是阴离子的为酸性染料 3_2染色机理龙胆紫能不能染DNA?还是只是把染色质上的蛋白质染色?或是DNA和蛋白质都被染色?上文提到,碱性染料的着色基团是阳离子,着色基团可以与细胞中的带负电荷部分牢固地结合。DNA是酸性物质,可电离出H,其余的部分就带上了负电荷。因此,带负电荷部分就能和碱性染料电离出的着色阳离子通过电荷问的引力作用牢固结合,而被染上颜色。有的染色作用随溶液中的pH值而变动。细胞的主要成分是蛋白质,它含有氨基和羧基,在酸性溶液中,当溶液的pH值小于该蛋白质的等电点时,则蛋白质带正电荷,易被酸性染料染色;在碱性溶液中,当溶液的DH值大于该蛋白质的等电点时,则蛋白质带负电荷。容易被碱性染料染色。所以,可以得出结论:碱性染料使染色体着色,使DNA和蛋白质都被染色。只不过这2种物质被染色的机理是不同的。 4碱性染料用酸配制的原因龙胆紫和洋红都溶于水和酒精。而做实验用的龙胆紫和洋红溶液。却都是用醋酸溶液配制的。这又是为什么呢?原因有2个:1)是为了染色物能方便地进入细胞内,又不会发生细胞膨胀。因为水和酒精这2种溶剂进入细胞的速度是很快的,容易引起细胞膨胀破裂。2)因为像洋红这种碱性染色剂溶于碱性溶液时,能使细胞质和细胞核都染色,只是细胞核较浓些,溶于酸性溶液(如醋酸)时,对染色质有高度的亲合力,对细胞质着色很浅。在煮沸的45%醋酸中加洋红使之饱和,再加入微量的铁离子,配制成的醋酸洋红溶液就能将核或染色体染成红色。如果用1%龙胆紫溶液对根尖进行染色,细胞核内都被

碱性染料

碱性染料 “植物细胞有丝分裂”实验操作的核心步骤是:解离、漂洗、染色和压片。在实验中,染色通常都选用龙胆 紫、醋酸洋红等碱性染料,染色后细胞核内的细丝状物质可被染上较深的颜色,称为染色质。有不少学生认为:既然是碱性染料染色,而解离时用的又是盐酸,漂洗当然就是要洗去盐酸,防止酸碱中和从而影响染色。但 事实上以上碱性染料本身的pH值并不呈碱性。 1 碱性染料的界定 作为染色剂必须具备两个条件:一是具有颜色;二是要与被染组织间有亲和力。染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的,产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质。 分子结构的某些基团吸收某种波长的光,而不吸收另外波长的光,从而使人觉得好像这一物质“发出颜色”似的,因此把这些基团称为“发色基团”。例如,苯的衍生物具有可见光区吸收带,可作为发色基团。此 外,发色基团还有硝基(一NO2)、偶氮基(一N=N一)、乙烯基等。 作为染料物质,除了有发色基团外,还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团。由一0H一、SO3H、一COOH等酸性基团和一NH2、一NHCH3、一N(CH3)2等碱性基团构成了助色基团。它们的存在使染料物质离子化,极性增强,促进染料与组织间发生作用,产生染色效果。助色基团中具有酸性基团的染料称为酸性染色剂,而助色基团中具有碱性基团的染料则称为碱性染色剂。 2 龙胆紫碱性染料 高中阶段涉及的碱性染料主要有三种:龙胆紫、醋酸洋红、苏木精。现以龙胆紫为例,说明其“碱性染料”这一称谓的由来。 图1 龙胆紫的结构式 龙胆紫的分子式为c25H30C1N3,结构式如图1所示,其中由三苯甲烷构成发色基团,由(一N(cH3)2)构成助色基团。(一N(Ctt3)2)是极性基团,在水中电离时,可与H 结合而带正电,使染料分子能够与带负电的物质结合,从而使其染上颜色。在配制龙胆紫染液时通常需加入乙酸,酸性条件下H 多,可促进龙胆紫的电离极化。 3 碱性染料的pH值 碱性(或酸性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的,而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定的。一般来说,助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂,反之则为酸性染色剂。以高中阶段学生实验常用的醋酸洋红和龙胆紫两种碱性染料为例,看碱性染料的pH值。 首先,从配制方法上看。龙胆紫染液的配制过程:取龙胆紫溶解在2%乙酸溶液,直到溶液不变成深紫色为止;醋酸洋红的配制过程:取100mlA5%乙酸,煮沸30s,加入1g 洋红,搅拌,再煮2~5min,冷却,过滤。这两种碱性染料的配制过程中用到的溶剂都是乙酸。 其次,从pH值的测定结果上看。由于传统的pH试纸法需通过试纸的颜色来判断试剂的pH值,会受到染液本身颜色的干扰,因此可采用更为可靠的pH计测定法。测定结果显示:龙胆紫的pH值为3.0,醋酸洋红的pH值为1.9,两者均为酸性溶液。 4 碱性染料的染色原理

高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)

1斐林试剂检测可溶性还原糖 原理:还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热. 应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎. 2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪 原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色 注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察. 应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪. 3 双缩脲试剂检测蛋白质 原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色 注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热). 应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定. 4 碘液检测淀粉 原理:淀粉+碘液→蓝色 注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘. 应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉 5 DNA的染色与鉴定 染色原理:DNA+甲基绿→绿色 应用:可以显示DNA在细胞中的分布. 鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色

应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂. 6 吡罗红使RNA呈现红色 原理:RNA+吡罗红→红色 应用:可以显示RNA在细胞中的分布. 注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色. 7 台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色. 应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性. 8 线粒体的染色 原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色. 应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在. 9 酒精的检测 原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色. 应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶. 10 CO2的检测 原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.

染料基础知识

染料基础知识 染料是指在一定介质中,能使纤维或其他物质牢固着色的化合物。我们介绍的染料和颜料只限于有机化合物。古代染料取自动植物。1856年Perkin发明第一个合成染料——马尾紫,使有机化学分出了一门新学科——染料化学。20世纪50年代。Pattee和Stephen发现含二氯均三嗪基团的染料在碱性条件下与纤维上的羟基发生键合,标志着染料使纤维着色从物理过程发展到化学过程,开创了活性染料的合成应用时期。目前,染料已不只限于纺织物的染色和印花,它在油漆、塑料、纸张、皮革、光电通讯、食品等许多部门得以应用。染料的分类染料的分类方法有三种:按来源划分(天然和合成染料)、按应用性能划分、按化学结构划分。常用后两种分类方法。染料按应用性能分为以下几类: 1.直接染料(direct dyes) 该类染料与纤维分子之间以范德化力和氢键相结合,分子中含有磺酸基、羧基而溶于水,在水中以阴离子形式存在,可使纤维直接染色。 2.酸性染料(acid dyes)在酸性介质中,染料分子内所含的磺酸基、羧基与蛋白纤维分子中的氨基以离子键相合,主要用于蛋白纤维(羊毛、蚕丝、皮革)的染色。 3.分散染料(disperse dyes)该类染料水溶性小,染色时借助分散剂呈分散状态而使疏水性纤维(涤纶、锦纶等)染色。 4.活性染料(reactive dyes)染料分子中存在能与纤维分子的羟基、氨基发生化学反应的基团。通过与纤维成共价键而使纤维着色。又称反应染料。主要用于棉、麻、合成纤维的染色,也可用于蛋白纤维的着色。 5.还原染料(vat dyes)有不溶和可溶于水两种。不溶性染料在碱性溶液中还原成可溶性,染色再经过氧化使其在纤维上恢复其不溶性而使纤维着色。可溶性则省去还原一步。该类染料主要用于纤维素纤维的染色和印花。 6.阳离子染料(cationic dyes)因在水中呈阳离子状态而得名。用于晴纶纤维的染色,常并入碱性染料类。 7.冰染染料(azoic dyes)为不溶性偶氮染料,染色时需在冷冻条件(0-5℃)下进行,由重氮和偶分组分直接在纤维上反应形成沉淀而染色。 8.缩聚染料(polycondesation dyes)该类染料染色时脱去水溶性基团缩合成大分子不溶性染料附着在纤维上,称为缩聚染色。此外还有氧化染料、硫化染料等。 按化学结构分类(主要是根据染料所含共轭体系的结构来分)。可分为:偶氮、酞菁、蒽醌、菁类、靛族、芳甲烷、硝基和亚硝基等染料。在有的大类别中又可分为若干小类。实际上,现在有些染料很难仅以其结构和使用性能来分类,上述两种分类方法均有待于进一步完善。染料命名染料分子结构复杂。厂商为了各自的利益,常使一个染料有多个商品名称。系统命名和商品名对于染料都比较繁杂。各国均对染料有自己的统一的命名办法。我国对染料的命名法,简单地讲,染料命名可由三段组成。第一段为冠称,有31种,表示染色方法和性能。第二段为色称,有30个色泽名称,表示染料的基本颜色。第三段为词尾,以拉丁字母或符号表示染料的色光、形态及特殊性能和用途。例如,活性艳红X-3B染料:“活性”即为冠称,“艳红”即为色称,X-3B是词尾;X表示高浓度,3B为较2B稍深的蓝色。表明该染料为带蓝光的高浓度艳红染料。中国染料命名用词 1 冠称直接,直接耐晒,直接铜

Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍

Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明: 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一,可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单,操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟,蒸馏水2 分钟, b)对于冰冻切片:蒸馏水2 分钟, c)对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10 分钟以上,蒸馏水洗涤2 分钟,换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2 分钟。 2、苏木素(HE)染色对于上述处理好的样品,用苏木素染色5-10 分钟(可以根据染色结果和要求调整时间),用自来水洗去残留的染色液,约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片:95%乙醇脱水2 分钟,换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟;二甲苯透明 5 分钟,换用新鲜的二甲苯,再透明 5 分钟,用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色:如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色,在苏木素染色后,70%乙醇洗涤2 次,每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用

于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时,可使用染色架和染色缸,以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次,但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地:国产 提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。 保存:室温避光储存,有效期至少12 个月。 关键词:Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:

常用染色液的配制

附录二:常用固定液和染色液的配制 常用染色液的配制 1. 番红水液 番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。 2. 番红酒液 番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml。 3. 固绿染液 固绿0.1g溶入95%酒精,定溶至100ml。 4. 碘-碘化钾染液 碘化钾溶入100ml蒸馏水,再加入1g碘,溶解后即可使用。 5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液 将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。6.改良苯酚品红染液 原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。 原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。染色液:取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀,再加入1g 山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。 7. 间苯三酚染液 将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。 8. 中性红染液

将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水,用时稀释10倍。 9. 钌红染液 将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。 10.龙胆紫染液 将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。 11.铁醋酸洋红染液 先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末(切记不可一次倒入)。待全部倒入后,再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min 后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。 12.苏木精染液 苏木精的配方很多,常用的有如下3种: 配方Ⅰ:苏木精水溶液 0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。 配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin) 甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml 乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml 丙液:甘油25ml + 甲醇25ml 分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加

高考生物试题中有关染色剂使用的考查

高考生物试题中有关染色剂使用的考查 一染色剂的应用 1 DNA和RNA的染色鉴定 甲基绿和吡罗红是混合染色剂。甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水,显蓝绿色。稍溶于乙醇,不溶于戊醇。吡咯在盐酸作用下聚合成为吡咯红,可与 RNA 结合呈现红色。 这两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以观察到DNA和RNA在细胞中的分布情况。 注意:①盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进人细胞,同时使染色体中的DNA 与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。② 2种染色剂要混合使用,而且要现配现用。 2 健那绿染液与线粒体的观察 健那绿染液是专一性的线粒体的活细胞染料,线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态( 即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原成为无色状态。因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。 线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时,通过染色,可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。 3. 碱性染料与染色体的观察 生物实验中所用的染料,按其来源可分为天然染料和人工染料两大类。人工染料根据其主要化学成分的性质,又分成碱性染料、酸性染料和中性染料三大类,其碱性、酸性和中性是由染料中有色部分的性质所决定的。若染料的有色部分为阴离子,即为“酸性”染料;若染料的有色部分为阳离子,则称为“碱性”染料;若染料的阴、阳离子均有颜色,则称为“中性”染料。染色体(质)是细胞核内容易被碱性染料染成深色的物质。 在观察植物细胞有丝分裂实验中,常用龙胆紫溶液使染色体染成紫色,也使用醋酸洋红溶液使染色体着红色。二者染色时间都不可过长。 l %~ 2 %龙胆紫溶液俗称紫药水,是人们所熟悉的外用药。龙胆紫溶液的配制是将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成。染色中使用的龙胆紫溶液略呈酸性, l%醋酸洋红本身也是酸性,同样具有碱性的助色基团。配方中的醋酸是染料的溶剂,在染色时增加了细胞的通透性,利于染液的离子进入细胞而使细胞核内的染色体着色。

常用染色剂的配方

常用染色剂的配方 常用染色剂的配方 (一)天然染料 1、苏木精(Hematoxylin)苏木精是从南美的苏木(Haematoxylon campechianum)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。 2、洋红(Carmine)洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出胭脂红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。 3、靛蓝洋红(Indigo carmine)是由木蓝(Indigofera)提出的靛蓝(Indigo)加上亚硫酸钠而成。为蓝色酸性染料,作为细胞质的染色剂。常与苦味酸合成苦味酸靛蓝洋红(picro-indigo-carmine),呈绿色,可与碱性品红作对比染色。 4、地衣红(Orcein)是由地衣(Lecanora parella)中取得的染料,可在酸性或碱性溶液中染色。植物细胞学中应用较多,尤其对于某些植物的染色体染色,效果比醋酸洋红更好。配制方法与洋红相似,通常也多溶入醋酸中(2.2%)染色。现在已多用其人工合成染料。 (二)人工染料 人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。 1、酸性品红(Acid fuchsin)酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。它跟甲基绿同染,能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色

高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)教学内容

高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完 整版)

1 斐林试剂检测可溶性还原糖 原理:还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热. 应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎. 2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪 原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色 注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察. 应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪. 3 双缩脲试剂检测蛋白质 原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色 注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热). 应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定. 4 碘液检测淀粉 原理:淀粉+碘液→蓝色 注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘. 应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉 5 DNA的染色与鉴定 染色原理:DNA+甲基绿→绿色 应用:可以显示DNA在细胞中的分布.

鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色 应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂. 6 吡罗红使RNA呈现红色 原理:RNA+吡罗红→红色 应用:可以显示RNA在细胞中的分布. 注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色. 7 台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色. 应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性. 8 线粒体的染色 原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色. 应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在. 9 酒精的检测 原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色. 应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶. 10 CO2的检测

碱性染料和酸性染料

碱性染料和酸性染料 高中生物学教材在描述染色质时指出:染色质(体)容易被碱性染料染成深色.实验中对染色质(体)进行染色,须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染料,这些染料是以龙胆紫或洋红溶解于醋酸溶液中制得,配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性).那么为什么把龙胆紫溶液称为碱性染料呢 作为染料必须具备两个条件:一是具有颜色;二是要与被染组织间有亲和力.染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的,产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染料的染色性质.作为染料物质,除了有发色基团外,还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团.如染料化合物中往往由硝基(-NO2),偶氮基(-N=N-),乙烯基等形成了发色基团,而由-OH,-SO3H,-COOH等酸性基团和-NH2,-NHCH3,-N(CH3)2等碱性基团构成了助色基团.它们的存在使染料物质离子化,极性增强,促进染料与组织间发生作用,产生染色效果.我们把助色基团中具有酸性或碱性基团的染料分别称为酸性或碱性染料.如硝基是一种发色基团,当苯环中的3个氢原子被3个硝基取代后就成为三硝基苯的黄色化合物.三硝基苯不是染料,仅有一个发色基团,它不溶解于水,也不能电离,既不酸也不碱,不能与酸或碱形成盐类.如果三硝基苯分子中,用羟基再置换一个氢原子,就成为三硝基苯酚,即苦味酸,它即是一种黄色染料,有电离作用,与强碱能形成盐,这里的羟基便是助色基团.由此可知,苦味酸的颜色是由发色基团(硝基)所致,而它的染色性能则是由助色基团(羟基)形成的,如用氨基代替硝基,就形成无色化合物,不是染料.由此可见,作为染料,必须有发色基团和助色基团相互配合,缺一不可. 如伊红Y含有一个(-COOH)助色基团,在水中电离时放出氢离子,本身带负电荷.配制成伊红Y 染料时,与强碱NaOH作用生成盐(-COONa),此物质的Na+反而在溶液中呈碱性,所以不能认为酸性染料在溶液中就是酸性. 所以,酸性(碱性)染料的界定并非由染料溶液的pH值决定的,而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定.一般来说,助色基团带正电荷的染料为碱性染料,反之则为酸性染料. 碱性染料pH不一定大于7,酸性染料pH不一定小于7.

高中生物课程中常见染色剂染色原理及使用注意事项

高中生物课程中常见染色剂染色原理及使用注意事项 朱秋霖,马天兵 兰州二中,兰州 730000 摘要:目的:探究高中生物试验中常见染色剂的使用方法及常见问题与注意事项方法:通过 一些简单的实验验证与参考文献得出结论。结果:验证与总结出生物试验中常见染色剂的染 色原理及所遇到的染色问题的原因。 关键词:高中生物学实验染色剂显色原理注意事项 The common dye staining principle and precautions in the high school biology curriculum Zhu Qiulin,Ma Tianbing Lanzhou NO.2 middle secondary school class8 grade2,lanzhou 730000 Abstract:Objective: To explore the use of high school biology test stains and FAQs Note method: through some simple experiments verify references concluded.Results:Validation and summed up a common biological test stain dyeing principle and coloring problem encountered by reason. Keywords:high school biology experiment stain color rendering principle Precautions 1.常见染色剂 常见的高中生物染色显色反应,其实质是化学反应或者物理反应,按照其反 应本质,可分为下列几类[5]: 1.1 氧化还原反应类染色剂 通过氧化还原反应生成某些具有特殊颜色的物质,利用其与生物组织中某些 具有还原性的物质或代谢产物进行化学反应,宏观上产生颜色变化,通过颜色变 化,鉴别某些生物组织中的目标物质。 1.1.1 斐林试剂 由于生物组织中的葡萄糖,果糖和麦芽糖等含有具有还原性的醛基,因此称 其为还原性糖[1]。利用斐林试剂,与还原糖发生还原反应,生成砖红色沉淀。利

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