WB注意事项

WB注意事项

1.制胶时，长短板下端对齐，以免漏胶，可以先用水进行检漏

2.制胶时，需根据蛋白分子大小配制分离胶，因此需要提前确定蛋白分子大小

3.制备样品时，样品需95 度灭活，maker 不需要

4.上样时，尽量做到快、准、稳，小心样品弥散

5.上样时，如有多余的孔，则加入与样品等量的上样缓冲液

6.跑电泳时，注意观察底部是否有气泡上升，如未发现气泡，则检查装置安装是否有误

7.转膜前，需提前制冰，转膜液需提前预冷

8.转膜时，注意膜与胶的摆放位置与顺序，放好后赶出气泡

9.转膜结束时，根据蛋白分子大小对膜进行剪裁，注意在膜的正面做标记

10.孵育抗体时，一抗可以重复使用4-5次，每次用完注意回收，二抗现配现用，不可重复使用

11.显影时，需将放置膜的板子擦拭干净，有条件可覆盖一层保鲜膜，然后再将膜放上去，滴加显影液