细胞工程-细胞

练习题

一、名词解释:(50×2分=100分) 1体细胞杂交

2脱分化

3细胞分化

4互补选择

5悬浮培养

6非对称融合

7胚性愈伤组织

8管状分子（TEs）

9看护培养

10平板培养

11对称融合

12体细胞无性系

13单细胞无性系

14体细胞无性系变异

15愈伤组织

16胚状体

17细胞全能性

18细胞工程

19高频再生系统

20条件培养基

21板植率

22转座子活化

23干细胞

24成体干细胞

25胚胎干细胞

二、选择题（50×1分=50分）

１．下列哪种激素能解除ＩＡＡ对侧芽的抑制作用。（ D ）

A.KT

B.NAA

C.GA 3

D.BA

２．绝大多数情况下，培养基在高压灭菌前后发生ＰＨ值会（ D ）。

A.变化

B.不变化

C.升高

D.降低

３．胚状体发生和进一步成熟的都离不开哪种激素的作用。（ D ）

A 生长素 B.I A A C.NAA D.细胞分裂素

４．在离体培养条件下，细胞全能性表达程度与外植体什么有关。（）

A.环境条件

B.基因型

C.环境条件及基因型

D.2，4-D

５．愈伤组织生长曲线如呈标准“Ｓ”型，所以收获愈伤组织应确定在哪个时期。（）

A.对数生长期

B.延迟期

C.平台期

D.停止期

6. 诱导生根的基质绝大多数都是什么基质。（ B ）

A高盐 B.低盐 C.中等盐 D.不确定

7.下列各时期中，哪个时期不属于愈伤组织形成过程。（ C ）

A.诱导期

B.分裂期 C延迟期 D形成期

8.下列哪种物质的主要作用是诱导脱分化，促进新梢生长，促进生根。（ B ）

A.细胞分裂素

B.生长素

C.赤霉素

D.琼脂

9．下列哪种激素最有利于愈伤组织的形成。（ C ）

A. 赤霉素

B. 细胞分裂素

C.2, 4-D

D.KT

10. （ A ）是一类能够诱导植物产生防卫反应的信号分子。

A. 诱导子

B.激素

C.启动子

D. 生长素

11.下列哪种因素对培养物多胺代谢、呼吸代谢和DNA合成影响最主要。（C ）

A.温度

B.光照

C.pH值

D.渗透压

12．植物组织培养常用的温度范围一般在（ D ）。

A.0~4℃

B.5~10℃

C. 10~20℃

D. 20~30 ℃

13.什么是基因差次表达的结果。（ A ）

A.分化

B.脱分化

C.分裂

D.增殖

14.什么是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄层固体培养表面上进行培养的技术。（ A ）

A.平板培养

B.连续培养

C.微室培养

D.浅层培养

15．体细胞杂交是用双亲的体细胞（ A ）进行融合，然后进行培养、筛选和鉴定，从而获得杂种细胞的过程。

A.原生质体

B.细胞器

C.细胞核

D.细胞质

16．下列哪种方法属于传统的降温冰冻方法（ A ）

A.两步法

B.玻璃化法

C.干燥法

D.包埋脱水法

17.生物反应器的类型包括搅拌式生物反应器、固定化生物反应器和（ B ）。

A. 鼓泡式生物反应器

B. 气升式生物反应器

C. 气动式生物反应器

D. 填充床反应器

18.一般来说，增加培养基中的哪些离子的浓度可以促进细胞的生长。（）

A. N.P.K

B. K.Na.NH+4

C. Fe.Mn.Zn

D. Cl. Ca. Fe

19.无性快速繁殖一般可分成四个阶段，即无菌培养物的建立，芽的增殖，（），试管苗的移植。

A.诱导生根

B.诱导不定芽

C.外植体的选择

D.壮苗和练苗

20.在培养基上借助与培养材料相同种类的离体物进行单细胞培养的一种方法叫（）。

A.平板培养

B.看护培养

C.微室培养

D.悬浮培养

21.实现培养细胞同步化的方法有（）和抑制法。

A.饥饿法

B.激素法

C. TTC法

D.相差显微镜法

22.可利用互补选择法和（）对杂种细胞进行选择。

A.荧光标记选择法

B.低密度植板选择法

C.可见标志法

D. 机械分离法

23．下列哪个不是非对称融合。（）

A． A细胞核+B细胞质 B.A完整细胞+B细胞质

C. A完整细胞+B细胞质和部分细胞核

D. A细胞质+B部分细胞核

24．平板培养时铺板厚度为宜时应该是多少？（）

A.3mm

B.4mm

C.5mm

D.6mm

25. 基质的pH值越高，琼脂浓度应该怎么变化？（）

A.越高

B.越低

C.中度

D.不变

26．下面哪个酶是甲羟戊酸途径过程中母核形成前的一个限速酶。（）

A.HMG-CoA还原酶

B.磷酸化酶

C.异构酶

D.倍半萜合酶

27．以下那种方法不是化学诱导方法。（）

A.NaNO3

B.PEG法

C.多聚化合物法

D.电融合法

28．玻璃器皿洗涤时，先用什么洗涤？（）

A.酸

B.碱

C.蒸馏水

D.冷水

29．下列哪个不是消毒的方法？（）

A.紫外线灭菌

B.抗生素灭菌

C. H2O2灭菌

D.活性碳

30．下面哪种物质与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一。（）

A.鸟嘌呤

B.腺嘌呤

C.胸腺嘧啶

D.胞嘧啶

31．离体培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程是?（）A.分化 B.脱分化 C.细胞分裂 D.细胞裂解

32．接种前应提前（）开起超净工作台

A.3分钟

B.5分钟

C.10分钟

D.20分钟

33．什么是指两个完整的细胞原生质体融合，在融合子中包含有两个融合亲本的全套染色体和全部的细胞质。（）

A.对称融合

B.非对称融合

C.异质融合

D.同质融合

34．在愈伤组织生长过程中，生长素和细胞分裂素比率高时促进？（）

A.生根

B.芽的分化

C.愈伤组织的生长

D.不定芽的生长

35．下列哪个名词是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。（）A.细胞分化 B. 脱分化 C.细胞分裂 D.细胞裂解

36．什么在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的促进作用？（）。

A.氨基酸

B.腺嘌呤

C.肌醇

D.酵母提取物

37．生物体内细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，因为（）。

A．细胞丧失了全能性

B．不同的细胞内基因不完全相同

C．基因的表达有选择性

D．在个体发育的不同时期细胞内的基因发生了变化

38．愈伤组织是一类（）。

A．高度液泡化的无定形的薄壁细胞

B．排列紧密的细胞壁

C．具有小泡的薄壁细胞

D．形状规则的一群细胞

39．番茄和马铃薯杂交过程不需要的细胞结构是（）。

A．细胞膜 B．细胞壁

C．细胞核 D．高尔基体

40．植物体细胞杂交尚未解决的问题是（）。

A．去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体

B．将杂种细胞培育成植株

C．原生质体融合机制

D．尚未培育出属间杂种植物

41．下列植物细胞的全能性在提供了适宜条件的情况下，最易表达的是（）。

A．枝条上的一个芽

B．柱头上的花粉

C．胚珠中的珠被细胞

D．根尖分生区细胞

42．可以成为植物组织最基本的培养条件的是（）。

①二氧化碳②有机物③生长素④细胞分裂素⑤水⑥矿质元素

A．①③⑤⑥B．②③⑤⑥

C．②③④⑤⑥ D．①②⑤⑥

43．下列关于植物组织培养的目的，不正确的是（）。

A．生产人工种子 B．生产新品种

C．生产杀虫剂D．生产干扰素

44．通过细胞杂交，获得一个杂种植株，需要的步骤是（）。

A．分离原生质→诱导原生质融合→组织培养法→得到杂种植株

B．分离原生质→原生质直接融合→组织培养法→得到杂种植株

C．获得细胞→原生质融合→组织培养法→得到杂种植株

D．获得细胞→→组织培养法→得到杂种植株

45．用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是 ( )。

A．该愈伤组织是细胞经过脱分化形成的

B．该愈伤组织的细胞没有全能性

C．该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成

D．该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构

46．要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,不需要（）。

A.具有完整细胞核的细胞

B.离体状态

C.细胞的基因型

D.一定的营养物质和激素

47. 光强主要影响培养物的生长、分化、（）。

A.脱分化

B.芽的形成

C.物质积累

D.根的生长

48．以下哪个不是植物基因转化受体系统的必要条件？（）

A.高效稳定的再生能力

B. 较高的遗传稳定性

C. 稳定的外植体来源

D.受体细胞对外源基因的敏感性

49．以下哪种方法不是原生质体纯化的方法？（）

A.沉降法

B.漂浮法

C.梯度离心法

D.包埋法

50．以下哪种方法不是原生质体活力的测定的方法？（）

A. FDA染色法

B.CFW染色法

C.酚藏红花染色法

D.电融合法

三.简答题（30×5分=150分）

1.PH值对培养物有何影响？培养基PH值设置的一般规律？

2.培养物次生代谢调控方式？

3.花药培养中花粉胚状体的发生方式？

4.无性快繁技术中的芽增殖途径及优缺点？

5.酶解法分离原生质体的基本要点？

6.生长调节物质调控器官发生的作用模式？

7.细胞全能性理论的含义？

8.外植体取材时应注意哪些问题？

9.花粉植株倍性复杂的原因？

10.原生质体融合方法及意义？

11.常用的灭菌方法有哪些？

12.高产细胞系的筛选手段？

13.微室培养技术要点？

14.光照对培养物的影响?

15.固定化培养的优点?

16.花药培养取材时应该注意的问题?

17.配制母液时应该注意的问题?

18.基质中蔗糖的作用?

19.培养细胞的功能?

20影响培养植物细胞次生代谢产物产量的因素? 21原生质体纯化的方法?

22 原生质体活力测定的方法?

23主要的互补选择法?

24 动物体细胞杂交的的应用

25培养物冷冻保存技术要点?

26植物基因转化受体系统的条件?

27植物细胞工程和其他学科的关系？

28生物反应器类型？

29植物细胞规模化培养中应注意的技术问题？30植物细胞工程核心技术是什么？

31干细胞的分类

32动植物细胞培养的比较

33 体细胞变异的分子基础

四.论述题（150分）

1．以桔梗或烟草无菌苗为外植体，设计一个获得愈伤组织的试验方案。（7分）

2．根据植物细胞工程的主要研究内容，论述“遗传和环境共同作用决定培养物性状”这一观点的正确性？（8分）

3．植物基因受体系统常见的问题及其解决途径（8分）

4．发根农杆菌Ri质粒转化植物产生发状根的影响因素（7分）

5．发状根的特性及应用（8分）

6．诱导子的分类作用特点、调控机制（8分）

7．突变细胞离体选择的限制因素（7分）

8．原生质体分离、培养、融合技术及理论和实践意义（7分）9．无性快繁技术程序及遗传变异的控制（7分）

10．植物细胞工程学的任务（7分）

11．植物细胞次生代谢产物细胞工程研究进展（7分）

12．影响雄核发育的因子（7分）

13．植物基因转化受体系统的类型以及特性（8分）

14. 影响体细胞胚胎发生的因素（8分）

15. 克隆器官的理论依据（8分）

16．植物激素的应用规律（7分）

17．被子植物克隆器官的规律（8分）18．如何确定培养周期（7分）

20.突变体的筛选方法及鉴定方法（8分）21．克隆器官的技术要点及注意事项（8分）

细胞工程试题及答案

专题2细胞工程 一、选择题 1.运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是( )。 ①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.①②③④ 2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )。 A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培育成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 3.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )。 A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同 4.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )。 A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织的细胞没有全能性 C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5.名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后,给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖。5~7天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中,不正确的是( )。 A.“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程 B.人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降 C.种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人 D.膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口,加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关 6.既可用于DNA重组技术又可用于细胞融合技术的是( )。 A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 7.培育农作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是( )。 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 B.在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体 C.单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 8.下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是( )。 A.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍 B.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 9.经植物组织培养技术培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )。 A.在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进行的是快速分裂和分化

细胞工程复习题

细胞工程复习题 一、名词解释（每小题3分，共21分）1．酶工程： 2．继代培养 3．人工种子： 4．单倍体培养： 5．微细胞： 6．胚胎工程： 7．克隆： 8．蛋白质工程： 9．外植体： 10．动物细胞与组织培养： 11．组织工程： 12．雌核发育： 13．胚胎融合： 14．转基因动物： 15．生物化学工程： 16．愈伤组织： 17．看护培养： 18．细胞固定化： 19．染色体工程 20．细胞重组： 21．基因工程技术： 二、简答题 1．细胞工程的重要应用体现在哪些方面

2．何为植物细胞两相培养技术建立植物细胞的两相培养系统必须满足的条件是什么 3．动物细胞体外培养有哪些特点 4．动物器官培养技术中，传统的器官培养方法主要有哪些 5．什么是细胞核移植技术以鱼类细胞核移植为例，其技术要点有哪些方面6．植物组织培养与植物细胞培养有什么区别 7．何为细胞悬浮培养怎样做到悬浮培养细胞的同步化 8．动物细胞生物反应器培养生产的生物制品主要有哪些种类 9．什么是试管动物试管动物技术主要包括哪几个主要技术环节 10．何为体细胞克隆技术多莉羊是怎样培育出的 11．芦荟组织培养快速繁殖中，通过哪些途径可以得到完整的植株 12．人工种子利用有何优势 13．用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备哪些基本要求

14．何为胚胎移植主要包括哪些关键技术 15．转基因动物技术的应用主要体现在哪几个方面 三、论述题 1．请阐述单克隆抗体的制备过程 2．植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容有哪些 3．请阐述原生质的分离，纯化和活力鉴定的技术过程 四、计算题 μ和ppm浓度各是什么1．有一培养基的IAA浓度是1.5/ mg L，问其/ mol L （分子量） 2．培养基的配方是 2.0/0.5/ +++水解酪蛋白 MS BA mg L NAA mg L 500mg/L+3%蔗糖+%琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素10倍，微量元素100倍，铁盐100倍，有机物100倍；BA母液浓度ml，NAA母液浓度ml。要配制800ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克 3．要配制1mol/L的 NaOH100ml, 要称取98%的固体NaOH多少克要配制1mol/L的HCl1000 ml,要量取浓HCl多少ml（NaOH分子量40，HCl分子量，浓HCl含量38%，比重） 五、填空题 1．生物工程操作的对象是什么这是与化学工程等其他工程类学科最明显的不同

干细胞与组织工程

干细胞与组织工程 随着生命科学的飞速发展，目前组织工程、干细胞研究已经成为21世纪生命科学研究的焦点和前沿领域。组织工程研究涉及种子细胞、生物支架材料以及组织构建等众多研究方向．干细胞研究则有望解决组织工程研究中的种子细胞来源问题，可能成为组织工程研究中的理想种子细胞。 一“组织工程”的概念 1 “组织工程”的产生和发展 组织、器官的损伤或功能障碍是人类健康所面临的主要危害之一，也是人类疾病和死亡的最主要原因。据美国的一份资料显示，每年有数以百万计的美国人患有各种组织、器官的损伤或功能障碍，每年需进行800万次手术进行修复，年住院日在4000万～9000万之间，年耗资超过400亿美元。 随看现代外科学的发展，人类对组织、器官缺损的治疗有了很大的进步，但仍然存在许多问题。目前临床常用的治疗方法有三种： 1.自体组织移植、 2.异体组织移植、 3.人工合成组织代用品 组织工程是近年来正在兴起的一门新兴学科,1984年， Wolter首先提出“组织工程”（Tissue Engineering）一词。1987年，美国国家科学基金会于正式提出和确定“组织工程”一词，开辟了组织工程学研究的新纪元。它是应用生命科学和工程学的原理与技术，在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下结构与功能关系的基础上，研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态生物替代物的科学。 从事组织工程研究的科学家们利用细胞生物学、分予生物学以及材料科学等学科的最新技术，像工厂生产零部件一样，针对患音组织或器官缺失情况，利用构成组织或器官的基本单位——细胞以及为细胞生存提供空间的支架材料，在体内外培育出所需的人体组织或器官．需要多少就培育多少．量体裁衣制备完成后再给患者安装上去。 组织工程研究的核心是建立由细胞和生物材料构成的三维空间复合体。这一三维的空间结构为细胞提供了获取营养、气体交换、排泄废物和生长代谢的场所，

细胞与细胞工程教学设计

“细胞与细胞工程”教学设计 佛山顺德一中 孔庆敏 【重点与难点】 重点：生物膜在结构和功能上的联系、生物膜系统的概念； 植物组织培养及体细胞杂交、单克隆抗体。 难点：各种生物膜在功能上的联系、植物体细胞杂交及单克隆抗体。 【延伸与拓展】 第四章：细胞与细胞工程 第一节：细胞的生物膜系统 生物膜的概念：细胞膜、核膜以及组成内质网、高尔基体、线粒体等细胞器的膜统称为生物膜。 细胞中具有双层膜的细胞器有：线粒体、叶绿体。 细胞中具有单层膜的细胞器有：高尔基体、液泡、内质网。 细胞中具有单层膜的结构有：线粒体、叶绿体、细胞核。 一、各种生物膜在结构上的联系 1．内质网与核膜的联系 A ．内质网膜与外层核膜相连 B ．内质网腔与内、两层核膜间的空腔相通 意义：使细胞质与核内物质的联系更加紧密。 2．内质网与线粒体的联系 有些内质网与线粒体外膜相连 意义：由线粒体供给内质网所需要的能量 3．内质网与高尔基体及细胞膜的联系 A ．内质网膜产生的小泡可以移动到高尔基体成为高尔基体的一部分 B ．高尔基体产生的小泡移动到细胞膜成为细胞膜的一部分 C ．细胞膜产生的小泡可以回到细胞质中 上述关系图示如下： 二、生物膜的化学组成 生物膜主要由蛋白质、脂类和少量糖类组成（表现为统一性）； 但在不同的膜中，上述三种物质的含量是有差别的（表现为差异性）。 三、各种生物膜在功能上的联系 科学家用同位素示踪的方法研究了豚鼠胰脏腺细胞分泌物的形成过程，研究出分泌蛋白的合成和运输过程是： 核糖体合成的蛋白质在上述细胞器的运输过程中，主要发生了以下变化：

在以上过程中，都需要由线粒体提供能量，因为在线粒体内膜上含有大量的与有氧呼吸有关的酶。 可见，在细胞内生物膜在结构上相互联系，在功能上既有明确分工，又紧密配合，使细胞能够顺利地完成各项生理功能。 四、生物膜系统 1．概念： 生物膜是指细胞膜、核膜以及内质网、高尔基体、线粒体等由膜构成的细胞器共同构成的结构体系。 2．作用： （1）使细胞具有一个相对稳定的内环境，并使细胞与周围环境进行物质运输、能量交换、信息传递。 （2）为酶提供大量的附着位点，为生化反应有序进行创造条件。 （3）将细胞分成小区室，使生化反应互不干扰。 五、研究生物膜的意义 1．理论上：阐明细胞生命活动规律。如：蛋白质、糖类和脂类的人工合成和运输。 2．工业上：人工模拟生物膜功能。如：海水淡化、污水处理。 3．农业上：改善作物品质。如：抗寒、抗旱、耐盐机理的研究。 4．医学上：人工膜代替病变器官。如：人工肾中的“血液透析膜”。 第二节：细胞工程简介 概念：细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 一、植物细胞工程 常用的技术是：植物组织培养和植物体细胞杂交。 理论基础是：植物细胞的全能性。 1．细胞的全能性 概念：细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。原因是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质及发育为完整个体所必需的全部基因。 在生物的个体发育中，由于基因在特定时间和空间下选择性地表达而形成不同器官，因此，要实现细胞的全能性，首先必须使生物体的细胞处于离体状态。 2．植物组织培养

细胞工程论文设计(胚胎干细胞)

细胞工程 课程论文 题目：胚胎干细胞在生物医学方面的研究及用学号：20100412310035 姓名：周文斌 年级：2010级 专业：生物工程（1）班 指导教师： 完成日期：2013 年11 月28 日 成绩：

胚胎干细胞在生物医学方面的研究及应用 摘要：干细胞，在医学中被称为“万用细胞”，是一类具有自我更新和分化潜能的细胞，在生命的生长与发育中其起主干作用的原始细胞。本文即以干细胞为基础，从胚胎干细胞概念出发，介绍胚胎干细胞的生物学特性，对近年来国外胚胎干细胞的研究历程做出梳理与总结，并对其研究成果、应用前景及存在问题作出概述。 关键词：干细胞；胚胎干细胞；生物学特性；研究历程及成果；应用前景；存在问题 一、干细胞 干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)、多能干细胞（pluripotent stem cell）和单能干细胞（unipotent stem cell）。干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。 二、胚胎干细胞（ESC） 胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESC）是从着床前胚胎细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞[1]。它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。1981年，埃文斯（Evans）和考夫曼（Kaufman）从小鼠胚囊细胞团建立了未分化的小鼠胚胎干细胞[2,3]。1998年，汤姆森（Thomson）在体外受精5 天的人囊胚中成功分离出hES细胞, 体外培养维持不分化状态均传代30 代以上,建立了人的胚胎干细胞系开创了胚胎干细胞的新纪元[4]。 三、生物学特性 1、形态学特征

干细胞与组织工程重大项目课题申请指引

附件1： 863 计划生物和医药技术领域 “干细胞与组织工程”重大项目 课题申请指南 一、指南说明 “十一五”期间，本重大项目以替代、修复或再造人体各种组织器官的“再生医学”为主线，以干细胞与克隆技术、组织工程技术、组织器官代用品和再生医学相关评价体系为重点，利用多学科、多技术交叉合作的关键技术和资源平台，建立具有一定规模的高水平研究、生产和应用基地，形成我国再生医学工程研究开发技术体系，研制具有自主知识产权的系列干细胞与组织工程产品及代用品，建立、完善和细化相应的技术标准、准入规范和相关伦理学指导原则，培育和带动新兴产业，加快实现部分干细胞、组织工程产品和组织器官代用品的产业化，从而使我国再生医学研究和应用的整体水平进入世界先进行列，部分关键技术和产品达到国际领先水平。 本重大项目的任务分解及主要任务指标为：完成1-2 种重要退行性疾病的治疗性克隆临床前研究，力争获得第一个治疗性克隆的临床批 文；完成3-5 种重要疾病干细胞治疗的临床前研究，获得SFDA或卫生 行政主管部门的临床批文，力争1-2种治疗技术或产品 完成临床试验，获得相应证书；初步建立1－2 个国家级人类（疾病）胚胎干细胞库，建立干细胞库有关的硬件标准和管理规范；4-6 种具有自主知识产权的系列组织工程产品获得SFDA临床批文，力争 2-3 项完成临床试验并获得许可证；开发3-5 项具有自主知识产权的新型组织器官代用品，力争获得生产许可证；建立3-5 种针对干细胞和组织工程应用的灵长类动物疾病与评价模型；申请专利200 项左右，其中

10项左右为国际PCT专利，力争10%获得授权。 上述任务分解除个别保密课题外，所有课题均通过公开发布课题申请指南落实任务。 此次发布的是本重大项目课题申请指南，拟安排的主要内容包括干细胞与治疗性克隆、组织工程技术与产品研制、组织器官代用品研发及灵长类动物疾病与评价模型等，拟支持的经费为 2 亿元人民币。课题支持强度依据所承担任务和完成指标而定，课题支持年限为5 年，但依据中期评估进行滚动支持。 二、指南内容 课题 1 、帕金森病或卢迦雷氏病的治疗性克隆研究与应用研究目标：完成治疗性克隆技术及治疗性克隆干细胞的临床前研究及有效性和安全性评价，向SFDA申报临床批文，争取在治疗性克隆领域有所突破。此课题是重大项目总体目标中的重要组成部分和亮点，也是体现本项目水平的重要指标之一。 主要研究内容及考核指标：针对帕金森病或卢迦雷氏病等神经系统退行性疾病，建立治疗性克隆胚胎干细胞系，建立治疗性克隆临床应用评价体系和相关检测手段，完成治疗性克隆技术及治疗性克隆干细胞的有效性和安全性评价等临床前研究，申报SFDA临床批文，争取率先将1－2 种治疗性克隆技术应用到临床。申请30 项左右国家专利及部分PCT力争10%获得授权。 课题支持年限：五年。 课题经费来源及构成：课题拟支持的国拨总经费为1500 万元人民币。作为战略高技术类课题，以国拨经费为主，课题申请单位配套相应的人员经费。 课题2、我国人类（疾病）胚胎干细胞库的建立与应用 研究目标：有计划、有组织、有目标、有分工地利用好、保护好我

大学细胞工程试题及答案

细胞模拟试题及答案 一、填空（每空一分，共25分） 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成，根据其密 封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一细胞 群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细 胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的微生物又 不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。 13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育， 获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等。 二、单项选择题（每题1分，共10分） 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价格昂贵。 目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程

基因工程和细胞工程

基因工程和细胞工程 一、单选题 1．如图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步骤需要用到的工具是 A. DNA连接酶和解旋酶 B. DNA聚合酶和限制酶 C. 限制酶和DNA连接酶 D. DNA聚合酶和RNA聚合酶 【答案】C 【解析】图示表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，其次还需要用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒，故选C。 2．下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是（） A．叶肉细胞已经高度分化,无法表现出全能性 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C．融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜 D．叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性 【答案】D 【解析】 试题分析：叶肉细胞已经高度分化，但在体外培养的条件下也能表现出全能性，A错误；叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织，B错误；融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞壁，C错误；叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性，形成完整植株，D正确 考点：本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程、条件等基础知识，掌握植物细胞具有全能性的原因，能结合所学的知识准确判断各选项。 3．如图为白菜一甘蓝杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（） A．图示白菜一甘蓝植株不能结籽 B．愈伤组织的代谢类型是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂

D．白菜一甘蓝杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果 【答案】D 【解析】白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的“白菜-甘蓝”杂种植株中2个染色体组来自白菜，2个染色体组来自甘蓝，因为“白菜-甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能产籽，故A错误；愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定型状态的薄壁细胞，不能进行光合作用产生有机物，因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型，故B错误；上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培养等过程，其结果是形成“白菜-甘蓝”幼苗，并未发育到性成熟个体，因此整个过程中有有丝分裂和细胞分化，没有减数分裂过程，故C错误；任何性状都是基因选择性表达的结果，故D正确． 【考点定位】植物体细胞杂交的应用 【名师点睛】据图分析，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；原生质体融合所用的方法有物理法和化学法．物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；再生细胞壁形成杂种细胞；脱分化形成愈伤组织，再分化形成“白菜一甘蓝”幼苗． 4．下列有关细胞工程的叙述中正确的一项是（） A．克隆不是无性繁殖 B．用体细胞克隆动物是通过核移植实现的 C．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导动物细胞融合 D．动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分一样 【答案】B 【解析】 试题分析：克隆属于无性繁殖，故A错误。用体细胞克隆动物必须通过核移植才能实现，故B正确。灭活病毒诱导动物细胞融合不是溶解磷脂双分子层而是通过改变膜脂分子排列实现的，故C错误。动物细胞培养液通常需要加入血清，植物组织培养通常需要加入植物激素，故D错误。 考点：本题考查细胞工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。5．以下哪种物质不可以用于植物细胞的诱导融合剂（） A．PEG B．灭活的病毒 C．离心 D．振动电激 【答案】B 【解析】 试题分析：灭活的病毒是动物细胞工程的诱导剂，不能用于植物细胞工程，故选B。 考点：本题考查植物细胞工程等相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。6．下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（） A．在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般都发生改变 B．植物细胞只要在离体状态下即可表现出全能性 C．植物组织培养过程中始终要保持适宜的光照 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得 【答案】D 【解析】 试题分析：在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般不发生改变，A错误；植物细胞的全能性指离体的组织器官的经过培养，发育成完整个体的潜能，B错误；植物组织培养过程中开始是要避光，C错误；植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得，D正确；答案是D。 考点：本题考查植物细胞工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。 7．植物组织培养的过程可以归纳为：①? ?再分化③→④；对此叙述有错误的 ?→ ?→ ?脱分化②? 是( ) A．②→③的再分化过程中，培养基中需要添加细胞分裂素与生长素

细胞工程知识点

细胞工程知识点 1、细胞工程：以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。 2、细胞工程的应用： 1)动植物快速繁殖技术：植物组织培养、人工种子、试管动物、克隆动物 2)新品种的培育：细胞融合、细胞水平的重组 3)细胞工程生物制品：单克隆抗体制备、疫苗生产 4)细胞疗法与组织修复： 2细胞工程理论基础 1、细胞全能性：每个活的体细胞都具有像胚性细胞那样，经过诱导能分化发育成为一个新个体的潜在能力，并且具有母体的全部的遗传信息。 2、细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。 3、细胞的脱分化：在一定营养和刺激因素作用下,具有特定结构与功能的植物组织的细胞被诱导而改变原来的发育途径,逐步失去原来的分化状态,细胞特性消失,转变为具有分生机能的细胞,并进行活跃的细胞分裂,这一过程称为去分化。 3细胞工程技术 1、实验室条件：组成：准备室、无菌间、操作间、培养室、分析室。 2、无菌技术、显微技术、细胞观察与分析、细胞分离、细胞保存与复苏 （1）细胞保存方法传代培养保存法低温冷冻保存法(低温、超低温保存) 液体固化的方式（形成冰晶、形成无定型的玻璃化状态） 玻璃化指液体转变为非晶态（玻璃态）的固定化过程，在此状态时，水分子没有发生重排，不产生结构和体积的变化，因此不会由于机械或溶液效应造成组织和细胞伤害，化冻后的细胞仍有活力。 冷冻方法（缓慢冷冻法、快速冷冻法预冷冻法包括逐级冷冻和两部冷冻） 细胞复苏按一定复温速度将细胞悬液由冻存状态恢复到常温的过程。 复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。 细胞培养和代谢调控：

干细胞工程

干细胞的研究及应用 摘要;由于干细胞具有特定的分化潜能，表现其全能性、多能性和专能性，近几年来世界各国科学家对干细胞的临床应用研究已取得很大的进展。干细胞是目前细胞工程研究最活跃的领域，随着基础研究、应用研究的进一步深化，这项技术将会在相当大程度上引发医学领域的重大变革，它已成为 21世纪生命科学领域的一个热点。本人将对干细胞及其应用前景展开论述。 关键词：干细胞应用前景 干细胞具有无限制自我更新能力、同时也可分化成特定组织的细胞，在细胞发育过程中处于较原始阶段。干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)和成体干细胞(somatic stem cell)。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)、多能干细胞（pluripotent stem cell）和单能干细胞（unipotent stem cell）。干细胞(Stem Cell)是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。 1干细胞研究进展 干细胞在体外能自我更新和定向分化为各种特定功能细胞的潜能获得了各国科学家的青睐，成为２１世纪研究热点，在再生医学和临床医学上干细胞提供了新的治疗途径。大量研究结果证实，干细胞的分化能力及其分化方向受到体内外多种调控因素的影响，干细胞通过与这些调控因素之间的相互作用，调节其自身的增殖、分化，从而决定干细胞的命运⑴。 干细胞为再生医学与组织工程学提供了新的治疗思路。干细胞在医学上的研究仍处于起步阶段，明确其分化调控机制是其临床应用的前提和基础。目前对干细胞的分化调控研究主要集中在单个调控因素的影响，但干细胞的分化是各调控因素相互影响共同作用的结果，说明对其机制仍需作更深入的研究⑵。 2干细胞种类 2．1 胚胎干细胞 胚胎干细胞(Embryonic Stem cell，ES细胞) 当受精卵分裂发育成囊胚时，内层细胞团(Inner CellMass)的细胞即为胚胎干细胞。日前许多研究工作都足以小鼠ES细胞为研究对象展开的，如：德美医学小组在去年成功的向试验鼠体内移值了由ES细胞培养出的神经胶质细胞。此后，密苏里的研究人员通过鼠胚细胞移植技术，使瘫痪的猫恢复了部分肢体活动能力。随着ES 细胞的研究日益深入，生命科学家对人类ES细胞的了解迈人了一个新的阶段。在98年末，两个研究小组成功的培养出人类ES细胞，保持了ES细胞分化为各种体细胞的全能性。这样就使科学家利用人类ES细胞治疗各种疾病成为可能⑷。 2．2 成体干细胞 成体干细胞是在许多组织和器官具有修复和再生能力的细胞。在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。主要的成体干细胞有造血干细胞、神经干细胞等⑷。 2．3 造血干细胞 造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。最近又在肌肉组织中发现了具有造血潜能的干细胞。造血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。在临床治疗中，造血干细胞应用较早，在20世纪五十年代，临床上就开始应用骨髓移植(BMT)方法来治疗血液系统疾病。

细胞与细胞工程 论文

细胞与细胞工程 摘要：细胞生物学在19世纪以前，许多学者的工作，都着眼于细胞的显微结构方面，主要从事于形态上的描述，1838-1839年，德国植物学家施莱登和动物学家施旺根据自己研究和总结前人的工作，首次提出了细胞学。 细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上，遵循细胞的遗传和生理活动规律，有目的地制造细胞产品的一门生物技术。 关键词：细胞生物学、、研究内容和现状、研究趋势、重要领域、学习方法及态度染色体工程细胞融合工程 1.20世纪后半叶生命科学各领域所取得的巨大进展，特别是分子 生物学的突破性成就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。 2.2.生命科学将成为21世纪自然科学的带头学科 20世纪50年代DNA双螺旋结构模型的发现，随后遗传信息传递“中心法则”的确立与DNA重组技术的建立使生命科学的面貌起了根本性的变化。分子生物学与遗传学的结合将用10一15年测定出人类基因组30亿个碱基对（遗传密码）的全序列，人体细胞约有10万个基因。人类基因组的“工作草图”迄今20％的测序已达99.99%的

准确率和完成率 3.21世纪初生命科学的重大分支学科和发展趋势 80年代有远见的生物学家把分子生物学（包括分子遗传学）、细胞生物学服务、神经生物学与生态学列为当前生物科学的四大基础学科，无疑是正确地反映了现代生命科学的总趋势。遗传学（主要是分子遗传学）不仅当前是生物科学的带头学科，在今后多年还将保持其在生命科学中的核心作用。 植物克隆 组织培养不仅是一种植物快速繁殖的手段，同时也是植物改良、种植保存和次生物质生产的理性途径。[1]烟草作为植物组织培养的“模式植物”之一[2]，在组织培养中有重要的作用。目前烟草的组织培养和细胞培养已有不少报道。[3]近年来对烟草在抗性方面的研究，基因转化和次生物质生产等方面也取得了一些进展。 克隆（ｃｌｏｎｅ）来源于希腊文，表示用离体的细枝或小树枝增殖，后将其引入园艺学，指由一个单细胞或共同的祖先经有丝分裂产生出的细胞或生物体所构成的一个群体，其繁殖是无性的。以后逐渐将克隆的概念应用于植物学，动物学和医学等方面，并形成了比较一致的克隆动物就是将供体细胞核移入去核的卵母细胞中，使后者不经精子穿透等有性过程即可被激活，分裂并发育成个体，使得核供体的基

细胞工程

细胞工程学复习资料 一、名词解释 1、细胞工程按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。 2、接触抑制由于细胞的移动而互相靠近发生接触时，细胞不再移动的现象。其实质是由于细胞接触而抑制细胞运动的现象。 3、密度抑制当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分的减少，代谢产物的增多。细胞因营养的枯竭和代谢物的影响而导致细胞分裂停止的现象。 4、无血清培养基是指不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。 5、原代培养即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大，是检测药物很好的实验对象。 6、传代培养当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养。这个过程就称为传代培养。 7、饲养细胞也称滋养细胞，是一层经过射线照射或丝裂霉素C作用后失去分裂能力，供其他细胞附着的细胞层。 8.细胞系原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。 9.细胞株从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选购方法,由单细胞增殖形成的细胞群. 10.单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术: 单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。 11.外植体把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。 12.愈伤组织脱分化的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性、松散的细胞团。是植物细胞体外再生的第一步，关键一步。 13.继代培养指培养组织在培养基上生长一段时间后，营养物质枯竭，水分散失，并已积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上，这种转移称为继代培养。14脱分化：分化的细胞在一定条件下，可以转变为胚性状态，重新获得分裂能力。 15再分化：是脱分化后的分生细胞在一定的条件下，重新分化为各种类型的细胞，并进一步发育成完整植株。 16组织工程是指应用工程学和生命科学的原理和方法来研究正常或病理状况下哺乳动物组织的结构、功能和生长的机制，研究开发能够修复、维持或改善损伤组织的人工生物替代物的一门学科。其核心是有种子细胞核生物活性材料构成的三维空间复合体。 17顶体反应是指精子在进入卵丘细胞后由精子头部释放顶体小泡中的内含物，有助于精子穿过透明带的反应过程。 18胚胎发育阻滞是指体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不在发育，这种现象及胚胎发育阻滞。 二、填空题 1、以细胞工程为基础，发展派生出了不少以工程冠名的新领域，如组织工程、胚胎工程、染色体工程等 2、动物细胞工程实验室的设置严格要求无菌环境，避免微生物及其它有害因素的影响。一

高考生物复习题细胞工程含解析

配餐作业(四十一) 细胞工程 1．下列关于植物克隆的叙述，错误的是( ) A．通过花药离体培养可获得单倍体 B．通过平衡植物激素种类可实现器官发生 C．可利用细胞培养生产人参皂苷等中药成分 D．对植物愈伤组织进行诱变、培育和筛选可获得新品种 解析在植物组织培养中，通过控制不同浓度的不同类型的植物激素，可诱导产生不定根或丛芽，不能通过平衡植物激素种类使其发挥作用。 答案 B 2．下列有关动物细胞培养的叙述，错误的是( ) A．恶性肿瘤细胞系具有不死性和失去接触抑制等特性 B．利用液体培养基和CO2培养箱，模拟动物体的内环境 C．因细胞具有相互依存关系，细胞克隆需滋养细胞支持生长 D．细胞株没有差异性，在连续传代过程中遗传性状始终保持稳定 解析动物细胞的培养过程，是细胞有丝分裂的过程，在分裂过程中，由于基因突变或染色体变异会造成遗传物质的改变。 答案 D 3．如图为植物细胞融合后再生出新植株的部分过程示意图，请据图分析，以下叙述中不正确的是( ) A．使植物细胞形成原生质体阶段的关键技术是使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B．植物细胞融合一般要用聚乙二醇(PEG)等诱导剂进行诱导 C．原生质体融合成为一个新的杂种细胞的标志是出现新的细胞核 D．亲本植物A的细胞与亲本植物B的细胞两两融合后的细胞类型有3种 解析本题考查植物细胞融合的相关内容，意在考查考生的理解与分析能力。植物体细胞杂交前首先要用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁以得到原生质体，A正确；诱导植物原生质体融合时，常用聚乙二醇作诱导剂，B正确；原生质体融合成一个新的杂种细胞

的标志是出现新的细胞壁，C不正确；A细胞和B细胞融合后形成AA、BB和AB三种类型的融合细胞，D正确。 答案 C 4．如图所示为白菜—甘蓝的培育流程，下列叙述错误的是( ) A．过程①用到的酶是纤维素酶和果胶酶 B．过程②常用的化学试剂是聚乙二醇 C．过程④使细胞的全能性提高 D．过程⑤使细胞的全能性降低，最终失去全能性 解析植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以去除细胞壁应用纤维素酶和果胶酶，A正确；杂种细胞是已经分化的细胞，而愈伤组织是未分化的细胞，所以愈伤组织的全能性要高于杂种细胞，C正确；无论是分化的还是未分化的植物细胞都具有全能性，D错误。 答案 D 5．如图示植物组织培养过程。据图分析下列叙述正确的是( ) A．⑤植株根尖细胞的全能性比①植株根尖细胞的强 B．②试管的培养基中含有植物生长调节剂，不含有机物 C．③试管中的细胞能进行减数分裂 D．调节④培养基中植物生长调节剂的比例可诱导产生不同的植物器官 解析⑤植株根尖细胞的全能性与①植株根尖细胞相同。②试管的培养基中含有植物生长调节剂和有机物等。③试管中的细胞进行的分裂方式为有丝分裂。调节④培养基中植物生长调节剂的比例，可诱导产生根或芽。 答案 D 6．对于下面制备单克隆抗体过程示意图，不正确的叙述是( ) A．①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，均是从小鼠的脾脏中提取的 B．④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的

细胞培养实验室的设置及设备

一、细胞培养实验室的设置及设备 （一）细胞培养实验室的设置 组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。目前，超净工作台的广泛使用，很大程度上方便了组织细胞培养工作，并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。 细胞培养实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。 1．无菌操作区 （1）无菌操作室：无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，最好能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。 理想的无菌操作室应划为三部分： a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。 b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。 c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线的有效灭菌效果；墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。

无菌操作间的空气消毒： 紫外线灯—－产生臭氧，并且室温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。 空气过滤的恒温恒湿装置—－最好。 表1 洁净室（区）空气洁净度级别表 洁净度级别尘粒最大允许数／立方米微生物最大允许数浮游菌／立方米沉降菌／皿 100级3,500 0 5 1 10000级350,000 2,000 100 3 100000级3,500,000 20,000 500 10 300000级10,350,000 60,000 - 15 无臭氧紫外线消毒器 电子消毒灭菌器—－在高压电场作用下，电子管的外电极发生强烈电子轰击，使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂，能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应，从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的，消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30～40min即能自行还原成氧气，空气不留异味，消毒物体表面不留残毒。

第一节 植物细胞工程实验室设置与培养条件.ppt.Convertor

第一章植物细胞工程原理与技术 第一节实验室设置及培养条件 第二节培养基 第三节植物材料的接种 一实验室设置及内部设备 二培养环境条件 第一节实验室设置及培养条件 一实验室设置及内部设备 实验室建设应考虑的问题： 1、实验的性质 2、实验室的规模 细胞工程实验室: 基本实验室:准备室、无菌操作室、培养室 辅助实验室：细胞学实验室、生化分析实验室 贮藏室 温室 基本实验室 1、准备室 完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装及高压灭菌；器皿、材料的洗涤等工作。 主要设备 纯水器工作台药品厨天平电磁炉冰箱玻璃器皿酸度计高压灭菌锅干燥箱等 ◆ 培养容器 2、无菌操作室（接种室） 用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。 接种室应用推拉门，设有缓冲间，面积2m2为宜。进入接种室前更衣换鞋，减少带入接种室杂菌。 接种室主要设备 超净工作台 每次实验前要用紫外灯灭菌20min，关掉紫外灯开始工作，工作过程中注意一直开着吹风机。 无菌操作用具 离心机 细胞融合仪 ◆ 接种用具 3、培养室 用于接种材料的培养。培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。

控制：温度、光照、湿度。 培养室主要设备： 1、培养架放置培养物，每层顶部装有灯管进行照明，可用灯管数量来调节光照强度。培养架多由金属制成，一般设5层，最低一层离地高约l0cm，其他每层间隔40cm左右，培养架高 1.7m左右。培养架长 度根据日光灯长度设计， 如采用40W日光灯，则 长1.3m，30W的长lm， 宽度一般为60cm。 2、空调 3、时控器自动开灯、关灯 4、温度自动记录仪 5 、摇床 培养室主要设备： 培养箱 辅助实验室 1、细胞学实验室：对培养材料进细胞学鉴定和研究。 由制片室和显微观察室组成。 主要设备:切片机、磨刀机、温箱及切片染色设备； 实体显微镜、倒置显微镜、生物显微镜、 照相设备 显微观察室 生化分析实验室 植物细胞工程实验室布局 南 北 二培养条件 1.一般控制在 25土2℃。最低15oC，最高35oC。 2.不同植物最适温度不同。如百合20℃；月季25－27℃。 （一）温度 （二）光照 1.光强1500－3000lux ★影响外植体细胞的增殖、组织和器官的分化。 ★愈伤组织一般在黑暗或弱光下诱导；光照强，幼苗生长健壮；光照弱，幼苗生长弱小，容易徒长。 ★不同波长的光对细胞的分裂和器官的 分化有影响。 2.光质 ★红光促进杨树愈伤组织的生长， 蓝光阻碍其生长。 （二）光照 3.光照时间

细胞培养实验室构建方案-new

细胞培养实验室构建方案 （一）细胞培养实验室的设置 细胞培养实验室与其他一般实验室的主要区别在于要求保持无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。 细胞培养实验室应分为以下几个区：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。 1．无菌操作区 （1）无菌操作室：无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，最好能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰，一般地理位置在最后部分。 理想的无菌操作室应划为三部分： a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。 b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。 c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线的有效灭菌效果；墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。 （2）净化工作台：操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种：a)侧流式或称垂直式b)外流式或称水平层流式。 净化工作台工作原理（大致相同）――通常是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经高效空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。 净化工作台应用注意： （1）净化工作台应安装在隔离好的无菌间或清洁无尘的房间内，以免尘土过多易使过滤器阻塞，降低净化效果，缩短其使用寿命。 （2）新安装的或长期未使用的工作台，工作前必须对工作台和周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作，然后再采用药物灭菌法或紫外线灭菌进行灭菌处理。 （3）使用净化工作台前，应先用75％酒精擦洗台面，并提前以紫外线灭菌灯照射30～50min处理净化工作区内积存的微生物。关闭灭菌灯后应启动风机使之运转两分钟后再进行培养操作。 （4）净化工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流流型不受干扰。