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细胞活性鉴定

1、细胞活性的鉴定：死细胞对许多抗体均有很强的非特异性染色，这就使样本细胞活性检测变得非常重要，尤其是经过长时间运输和储存的样本。检测的方法通常有两种：（1）实时的流式检测：利用荧光染料PI、7-AAD或EMA 进行死细胞染色，而活细胞拒染这些染料。此方法的优势是细胞表面标志和活性分析可同时进行。尤其适用于高度坏死的样本。7-AAD最常用，因为在488nm激发下，其最大发射光在670nm左右，适合与FITC或PE进行多色标记。但随着时间延长，7-AAD会在固定的细胞群体重新分配，死活细胞的区分变得困难。因此，对于染色并在固定后12小时以上分析的标本，最好用EMA。EMA与死细胞DNA稳定的共价结合保证了长时间固定后仍能很好的区分固定前的死活状态。（2）手工检测：使用Trypanblue或其他细胞活性染料。（3）使用专门的仪器进行检测。如Vi-cell。

2、7-AAD （7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，在流式细胞术中用于鉴定死细胞，这种作用与PI相似。它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD标记DNA的强弱，将细胞分为三群：7-AAD 强为死亡细胞，7-AAD弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD同PI 有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI窄，PI检测时同时占据FL-2和FL-3通道，而7-AAD只占FL-3通道，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI 的最佳替代品，可与Annexin V-EGFP/FITC/PE联合使用。

3、Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用红色荧光染料PE（Phycoerythrin）标记的AnnexinV作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用荧光显微镜、流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。

另外，本试剂盒中提供的7-AAD可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。7-AAD是一种核酸染料，同PI 有着相似的荧光特性，但其发射光谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与Annexin V联合使用。该染料不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可穿透晚期凋亡细胞或者坏死细胞并与其内的DNA结合。因此将AnnexinV-PE与7-AAD联合使用时，7-AAD则被排除在活细胞（AnnexinV-/7-AAD-）和早期凋亡细胞（AnnexinV+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被AnnexinV-PE 和7-AAD结合染色呈现双阳性（AnnexinV+/7-AAD+），可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。。

操作方法

样品染色

1）悬浮细胞：300g，4℃离心5 min收集细胞。

贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化后，300g，4℃离心5 min收集细胞。胰酶消化时间不宜过长，以防引起假阳性。2）用4℃预冷的PBS洗涤细胞2次，每次均需300g，4℃离心5 min。

3）加入250μl 1×Binding Buffer重悬细胞，调节其浓度为1×106细胞/ml。

4）取100 μl细胞悬液于5ml流式管中，加入5μl Annexin V/PE和10 μl7-AAD，轻轻混匀。

5）避光、室温反应15 min。

6）加入400μl1×Binding Buffer，混匀，样品在1小时内检测。

4、CFSE (carboxyfluoresceindiacetate, succinimidyl ester 羧基荧光素双乙酸盐，琥珀酰亚胺酯) 被动扩散进入细胞，其本身是无色无荧光的，被细胞内的酯酶分解后产生高强度的绿色荧光，定位于细胞膜、细胞质和细胞核，在细胞核的荧光染色最强，该荧光产物与胞内的氨基结合长时间留存于细胞内并可被乙醛固定。未结合的试剂与副产物扩散至胞外基质中，被洗去。

传代或胚胎分裂分析，CFSE与赖氨酸侧链或其他氨基基团反应，共价偶联至细胞内和细胞表面的蛋白，细胞分裂时被平均分配至子代细胞，荧光强度降到母代细胞的一半。适合用于胞内示踪，在细胞分裂或融合后分配至子代细胞中，并不会被转移至邻近的细胞。在小鼠淋巴细胞迁移实验中，CFSE注射进入小鼠体内后，标记的淋巴细胞的检测可长达8周。肝内注射荧光显微镜定位检测可长达20天。

房屋安全鉴定报告样本20140612New

附件2：工程名称GCMC 房屋结构安全鉴定报告书报告编号BGBH 鉴定单位（盖章）日期：年月日

房屋结构安全鉴定报告 BGBH 房屋名称：JZW_MC报告编号：

目录一、项目概况 .....................………………..（页码）二、检测方案……………………………………………… (页码) 三、鉴定依据 .............................…….….(页码) 四、房屋现状调查及结构检测.......... ......……...(页码) 五、技术分析 ............................…….…..(页码) 六、鉴定结论 .............................…….. (页码) 七、处理要求及建议……………………………………… (页码) （仅供参考）附件一、房屋建筑和结构图……..…...……….……….……(页码) 附件二、房屋现状照片及现场检测照片...……...….…....(页码) 附件三、检测报告………………………………….…..…... (页码) 附件四、主体结构复核计算书……………………………… . (页码) 附件五、房屋现状照片及现场检测照片...……...….…....(页码)

附件六、地基补充勘察报告或建筑物沉降观测报告………….(页码) 附件七、建筑物整体倾斜观测报告...……...….…....... (页码) 一、项目概况二、检测方案（仅供参考）（一）检测方案： 2005年6月业主委托我公司对该房屋进行结构安全性鉴定。接受委托后，我公司派出了以两位一级注册结构工程师、一位结构工程师为主的检查勘察队伍于2005年6月30日对建筑物进行现场勘查、收集资料等。根据《工业厂房可靠性鉴定标准》GBJ 144－90及《建筑结构检测技术

酵母菌的死活细胞鉴定

酵母菌的死活细胞鉴别与镜检计数一、实验目的 1.掌握鉴别酵母菌细胞死活的染色方法。 2.了解血球计数板的构造，掌握利用它进行酵母菌计数的方法。二、实验步骤 1.酵母菌血球计数板镜检计数 1)取一块盖玻片，加盖在血球计数板中央计数室上方。 2)用滴管吸取菌悬液滴于盖玻片的边缘，通过毛细作用渗入计数室，注意不能有气泡产生，然后放置于载物台，静止5min，使细胞全部沉降到其表面。 3)高倍镜镜检，数对角线上5个中方格中细胞的总数，再计算出菌悬液浓度。为了减少误差，应注意对样品适当稀释，以每个小方格中平均4~6个细胞为佳；另外，也可对同一样品重复计数，取其平均值。附:计数板的结构及测定原理利用血球技术板镜检技术是一种常用的计数方法。血球计数板是一块比普通载玻片厚的特质玻片，其上有四条凹槽，构成三个平台，中间比较宽，其中央又被一短横槽隔成两半，每半边各有一个计数区，其上有9个大方格，只有中央的一个大方格为计数室供计数用。这一大方格的长宽各为1mm。加盖盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的距离为0.1mm，因此计数室的容积为0.1mm3。目前血球计数板常用的是25格×16格型，其计数室被分成25个中格，其中每个中格又分为16个小格，故计数室共有400 小格。计数时，首先把适当浓度的菌悬液注入计数室，然后在显微镜下计数，一般数对角线上5个中方格（共80个小方格）中细胞总数再根据下式求得菌悬液的浓度细胞个数=5000A×B 式中A---5个中方格中细胞总数 B---菌悬液的稀释倍数三、实验结果

个数:30 37 11 25 21 24 17 27 28 25

细胞的组成及其结构

考前回归教材—考前读一读第一部分细胞的组成及其结构 [基本图例] 细胞结构和功能 1．糖类、脂质、蛋白质和核酸共有的元素是C、H、O，除此之外，蛋白质中还含有N等元素，核酸中还含有N、P。 2．组成蛋白质的氨基酸约有20种，不同氨基酸理化性质差异的原因在于R基不同。 3．DNA和RNA在分子组成上的差异表现为DNA中含有脱氧核糖和胸腺嘧啶，而RNA中含有核糖和尿嘧啶。 4．DNA多样性的原因主要是碱基(脱氧核苷酸)的排列顺序不

同；而蛋白质多样性的原因是组成蛋白质的氨基酸的种类、数目、排列顺序以及肽链的空间结构不同。 5．熟记实验中的颜色反应：蛋白质＋双缩脲试剂→紫色； DNA＋甲基绿染液→绿色； RNA＋吡罗红(派洛宁)染液→红色；加热砖红色；还原糖＋斐林试剂――→ 脂肪＋苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液→橘黄色(红色)；线粒体＋健那绿染液→蓝绿色。 6．乳糖和糖原只分布于动物细胞；蔗糖、麦芽糖、淀粉和纤维素只分布于植物细胞。 7．脂质主要包括脂肪、磷脂和固醇，其中固醇又包括胆固醇、性激素和维生素D等。 8.脂肪的含氢量高于糖类，因此氧化分解时，耗O2多，释放能量也多。 9.自由水/结合水的比值越大，生物新陈代谢越旺盛，但其抗逆性相对较小。 10.原核细胞没有核膜、核仁、染色体及除核糖体以外的细胞器。 11.各种生物膜都主要由脂质、蛋白质组成，细胞膜还含有少量糖类。功能越复杂的膜中，蛋白质的种类和数量越多。 12.生物膜的结构特点是具有一定的流动性，功能特性是具有选择透过性。 13.生物膜系统包括细胞膜、核膜及具膜细胞器。核糖体、中心体不是生物膜系统的组成成分。 14.内质网膜与核膜、细胞膜能直接转化，高尔基体膜与内质网

司法鉴定报告模板

徐州中瑞工程造价咨询有限公司地址：徐州市西安北路6号恒茂大厦820室电话：0516－徐中鉴字（2010）第020号司法鉴定报告江苏省邳州市人民法院：根据贵院（2010）邳法司委字第9号司法鉴定委托书的内容及要求，对贵院受理的江苏长安建设集团有限公司和荣盛（徐州）房地产开发有限公司建设合同纠纷一案成立鉴定小组，遵循独立、客观、公正的原则，根据有关文件资料，对案件中涉及到的工程造价进行鉴定并出具报告，现将有关情况报告如下：一、工程概况：工程名称：荣盛文景苑5#、9#楼，局部框剪结构，工程结算经廊坊开发区恒盛工程造价咨询服务有限公司审计，因双方对部分工程造价未达成一致意见，故提出鉴定，鉴定范围经过贵院确认。二、鉴定依据： 1、司法鉴定委托书； 2、委托方提供的相关材料； 3、现场勘查资料；三、鉴定程序： 1、接受江苏省邳州市人民法院的鉴定委托； 2、根据司法鉴定委托书的要求，结合施工合同、结算书及相关材料进行审核鉴定；

3、向委托人出具鉴定报告。四、鉴定结果：一、商业基础回填土： 5#楼：（证据卷宗ⅠP66页）索赔金额：元工程量： 771.49m3（工程量及工作内容经双方认可）工作内容：机械挖土、装车、翻斗车运距2公里、夯填鉴定金额：元（含一次挖机进退场费） 9#楼：（证据卷宗ⅠP72页）索赔金额：元工程量：761.73 m3（工程量及工作内容经双方认可）工作内容：机械挖土、装车、翻斗车运距2公里、夯填鉴定金额：元二、河塘北侧增加回填土： 5#楼：（证据卷宗ⅠP118页）索赔金额：元工程量：618.400 m3（工程量及工作内容经双方认可）工作内容：机械挖土装车、翻斗车运输、运距200米、夯填鉴定金额：元 9#楼：（证据卷宗ⅠP112页）索赔金额：元工程量：644.79 m3（工程量及工作内容经双方认可）工作内容：机械挖土装车、翻斗车运输、运距200米、夯填鉴定金额：元三、铝合金百叶窗调差： 5#楼：（证据卷宗ⅠP35页）索赔金额：元工程量：㎡（工程量经双方认可）调整内容：铝合金百叶窗由原色调整为彩色（土黄色）

土的分类与鉴定

土的分类与鉴定土属于第四系的松散堆积物，其结构松散，成因复杂。根据地质成因，可划分为残积土、坡积土、洪积土、淤积土、冰积土和风积土等。据土的颗粒级配、塑性指标、液限或孔隙比可将土分为碎土石、砂土、粉土、粘性土和淤泥质土。根据形成时代晚更新世Q3及其以前沉积的土，定为老沉积土；第四纪全新世中近期沉积的土，为新近沉积土。 1．土的描述与定名在岩土工程中，土的分类主要依据其粒度成分，并结合其成因和时代进行命名。因此在现场勘察时应注意划分成因和时代，并详细描述土的成分和结构特征。碎石土应描述：砂土应描述：粉土应描述：粘性土应描述： 2．碎土石的分类粒径大于2mm的颗粒质量超过总质量50%的土，应定名

为碎石土，并按下表进一步分类。定名时，应根据颗粒级配由大到小以最先符合者确定。表1-11 碎石土分类土的名称颗粒形状颗粒级配漂石圆形及亚圆形为主粒径大于200mm的颗粒质量超过总质量

50% 块石棱角形为主卵石圆形及亚圆形为主粒径大于20mm的颗粒质量超过总质量50% 碎石

棱角形为主圆砾圆形及亚圆形为主粒径大于2mm的颗粒质量超过总质量50% 角砾棱角形为主

碎石土的密实度可根据圆锥动力触探锤击数确定，对于平均粒径等于或小于50mm，且最大粒径小于100mm的碎石土，可用重型动力触探锤击数N63.5按表1-12分类。并按表1-13的修正系数对锤击数N63.5进行修正。表1-12 碎石土密实度按N63.5分类重型动力触探锤击数N63.5 N63.5＞20 5＜N63.5≤20 5＜N63.5≤10 N63.5≤5

单位考核鉴定意见

单位考核鉴定意见 1、该同志工作勤奋认真，有很强适应能力和创新意识，能够利用所学知识迅速投入到实际计算机应用程序编写当中，并能够结合自己特点发挥优势弥补不足，在工作过程当中迅速成长起来，不仅历练了自身，也为我单位带来了一股新风，受到合作伙伴一致好评！ 2、该同志坚决拥护中国共产党领导，遵守国家法律法规和集团公司各项规章制度，具有良好思想素质和职业道德；性格温和，团结友善，明礼诚信，严于律己宽以待人，关心团结好身边每一个同事，与领导和同事保持着良好沟通关系，具有较好群众基础；熟悉本专业领域国内外现状和发展趋势，具有丰富计算机理论知识和计算机在企业管理方面经验，具有较强解决本专业实际问题能力，能将本专业与相关专业相互配合，协调解决有关技术难题，并以高度责任感和强烈事业心，围绕集团公司年度生产经营任务目标，切实做好计算机网络维护建设工作，较好完成了部门领导布置各项工作任务。 3、思想上，积极参加政治学习，坚持四项基本原则，拥护党各项方针政策，自觉遵守各项法规。 4、XX同志踏实肯干，吃苦耐劳。有创造性、建设性地独立开展工作思维；具有一定开拓和创新精神，接受新事物较快，涉猎面较宽，在工程计算领域不断地探索，有自己思路和设想。能够做到服从指挥，认真敬业，工作责任心强，工作效率高，执行公司指令坚决。在时间紧迫情况下，加时加班、保质保量完成工作任务。 5、工作上，本人自XXXX年工作以来，先后在某某部门、某某科室、会计科等科室工作过，不管走到哪里，都严格要求自己，刻苦钻研业务，争当行家里手。就是凭着这样一种坚定信念，我已熟练掌握储蓄、会计、计划、信用卡、个贷等业务，成为XX行业务行家里手。 6、XX同志工作态度端正，学习踏实，工作认真，注重理论和实践相结合，将大学所学课堂知识能有效地运用于实际工作中，能吃苦耐劳，工作责任心强，注重团队合作，善于取长补短，虚心好学，具有一定开拓和创新精神，接受新事物较快，涉猎面较宽，在计算机通讯领域不断地探索，有自己思路和设想。 7、记得，刚进XX行，为了尽快掌握XX行业务，我每天都提前一个多小时到岗，练习点钞、打算盘、储蓄业务，虽然那时住处离工作单位要坐车1个多小时，但我每天都风雨无阻，特别是冬天，冰天雪地，怕挤不上车，我常常要提前两、三个小时上班，就是那时起我养成了早到单位习惯，现在每天都是第一个到行里，先打扫卫生，再看看业务书或准备准备一天工作，也是这个习惯，给了我充足时间学习到更多业务知识，为我几年来工作顺利开展打下了良好基础。 8、该同志工作过岗位大部分在前台，为了能更好服务客户，针对不同层次、不同需求客户，我给予不同帮助和服务，记得有一位第一次到我行客户，当我了解到他要贷款买二手房时，由于他不知该怎么办，只是有个想法，我便详细地向他介绍了个贷所有手续。除了在服务客户上我尽心尽力，在行里组织各项活动中我也积极响应，经常参加

司法审计报告模板

司法会计鉴定意见书一、绪言： 1 、案情：原某市电信局劳动服务公司出纳员张强，采用提取现金和收取营业收入不入账的方法，贪污公款50 000 元。 2 、鉴定要求：（1）确认财务会计资料中有无张强贪污公款50 000 元的会计事实；（2）确认张强所经管的库存现金损失数额。 3 、检材：送检员送来检材：2006年1月1日?2008年12月31日电信局劳动服务公司现金日记账、银行存款日记账及会计凭证、收款收据存根。二、检验：鉴定人对某市电信局劳动服务公司由张强经管库存现金所涉及的现金日记账、银行存款日记账及会计凭证、收款收据存根进行了检验。经检验发现：（一）张强同时经管本公司飞跃旅馆、工程服务部、综合服务部等三个部门的库存现金，并分别建有现金日记账。其中： 1 、飞跃旅馆现金日记账到2007年3月底，余额为24126.49 元。 2 、工程服务部的现金日记账2007 年到4 月底，余额为1942.30 元。 3 、综合服务部的现金日记账到2007年12月底，余额为718.43 元。（二）飞跃旅馆从银行提取现金的下列业务未记账： 1 、2006 年12月31 日，签发1631039＃现金支票提取现金7000 元。 2 、2006年3月1日，签发00302210＃现金支票提取现金5000元。 3 、2007年4月12日，签发0030216＃现金支票提取现金8000元。另外，综合服务部2007 年3月2日使用0399551＃现金支票从银行提取18000元现金未记账。上述提取现金未记账金额共计38000 元。（三）检验有关凭证、账簿和收款收据存根发现： 2006 年1 月1 日?2007年12月31 日《收款收据》所列营业收入现金共计20399.25 元均未记账。（四）经检验，某市电信局劳动服务公司2007年2月共有6笔现金支出，共计21968.50 元均未记账。（五）经检验某市电信局劳动服务公司2007年4月已编制记账凭证但尚未记账的现金收入为21336.24 元，尚未记账的现金支出为23821.16 元。三、论证根据前述第（一）（二）（三）（四）（五）项检验结果可知：某电信局劳动服务公司由张强经管的现金账面余额为26787.22 元。未入账收入为79735.49 元（38000、20399.25 、 21336.24 ）未入账支出为45729.66 元（21908.5、23821.16）张强经手的现金实际余额应为60793.05 （60793.05 =原账面余额26787.22 +未入账收入79735.49 —未入账支出45729.66 ）四、鉴定意见经检验鉴定得出张强担任某市电信局劳动服务公司出纳员期间，2001 年末现金日记账实际余额应为60793.05 元，但账实核对时张强现金实际库存数仅为1774.4 元（1774.4 元数字来自司法会计检查），从而短缺现金59018.65 元。 XX市人民检察院司法会计师：XXX

1酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别4学时

实验一酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别预习内容: 1、光学显微镜的使用（参见周德庆,微生物学实验教程第3 版,23-27 页） 2、酵母菌的美蓝染色观察（参见周德庆,微生物学实验教程第3 版,91-95 页）预习思考题: 1、随着物镜放大倍数的增加,视野的亮度就是增强还就是减弱？应如何调节？视野范围就是如何变化的？ 2、制作水浸片时如何避免产生气泡？ 3、影响活菌数目的因素有哪些？染液浓度、染色时间及染色时的pH 等因素对死活细胞数目比例有什么影响？ 4、如何测定酵母菌死亡率？简述其原理。 5、标本片上的某一物象,第一次瞧到后如何再次找到它? 一、实验目的与要求 1、了解普通光学显微镜的构造及原理,正确掌握使用显微镜的方法; 2、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式; 3、学习区分酵母菌死活细胞的实验方法; 4、掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。二、实验原理 1、酵母菌酵母菌就是不运动的单细胞真核微生物,其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍,不必染色即可用显微镜观察其形态。但由于细胞个体大,采用涂片的方法制片有可能损伤细胞,一般通过美蓝染液水浸片或水-碘液浸片法来观察酵母细胞。大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖,有的分裂繁殖;有性繁殖就是通过接合产生子囊孢子。本实验通过美蓝染液水浸片与水一碘液水浸片来观察酵母的形态与出芽生殖方式,并对酵母细胞进行死活染色鉴别。

美蓝就是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态,也可用来鉴别酵母菌的死细胞与活细胞。图1：酵母菌美蓝浸片观察3min(10 X40)图2:酵母菌美蓝浸片观察30min(10 X40) 三、实验设备及材料 1、菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisia? 或卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensi培养2天左右的豆芽汁液体培养物(需稀释)。 2、溶液或试剂：0、1%与0、05%吕氏碱性美蓝溶液(或0、01%美蓝水溶液), 革兰氏染色用碘液等。 3?器材:显微镜，擦镜纸，吸水纸,盖玻片、酒精灯、接种环、镊子、胶头滴管、小烧杯、洗瓶等等。四、实验步骤与内容 1. 美蓝浸片的观察 (1) 在载玻片中央加一滴0、1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作接种环挑取少量酵母菌放在染液中，并用接种环将其混合均匀，酒精灯上灼烧清洗接种环。注:染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡。用接种环将菌体与染液混合时，不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。 (2) 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上，用吸水纸吸取多余的液体。 2、美蓝染液

司法鉴定执业分类规定(试行)(2000年11月29日)

司法鉴定执业分类规定(试行) 司法部司法鉴定执业分类规定(试行) (2000年11月29日) 第一章总则第一条为加强对面向社会服务的司法鉴定工作的管理，规范司法鉴定执业活动，根据面向社会服务的司法鉴定工作的实际需要，制定本执业分类规定。第二条本执业分类规定根据当前我国司法鉴定的专业设置情况、学科发展方向、技术手段、检验和鉴定内容，并参考国际惯例而制订。第三条本执业分类规定是确定面向社会服务的司法鉴定人职业(执业)资格和司法鉴定机构鉴定业务范围的依据。第二章分则第四条法医病理鉴定：运用法医病理学的理论和技术，通过尸体外表检查、尸体解剖检验，组织切片观察、毒物分析和书证审查等，对涉及与法律有关的医学问题进行鉴定或推断。其主要内容包括：死亡原因鉴定、死亡方式鉴定、死亡时间推断、致伤(死)物认定、生前伤与死后伤鉴别、死后个体识别等。第五条法医临床鉴定：运用法医临床学的理论和技术，对涉及与法律有关的医学问题进行鉴定和评定。其主要内容包括：人身损伤程度鉴定、损伤与疾病关系评定、道路交通事故受伤人员伤残程度评定、职工工伤与职业病致残程度评定、劳动能力评定、活体年龄鉴定、性功能鉴定、医疗纠纷鉴定、诈病(伤)及造作病(伤)鉴定、致伤物和致伤方式推断等。第六条法医精神病鉴定：运用司法精神病学的理论和方法，对涉及与法律有关的精神状态、法定能力(如刑事责任能力、受审能力、服刑能力、民事行为能力、监护能力、被害人自我防卫能力、作证能力等)、精神损伤程度、智能障碍等问题进行鉴定。第七条法医物证鉴定：运用免疫学、生物学、生物化学、分子生物学等的理论和方法，利用遗传学标记系统的多态性对生物学检材的种类、种属及个体来源进行鉴定。其主要内容包括：个体识别、亲子鉴定、性别鉴定、种族和种属认定等。第八条法医毒物鉴定：运用法医毒物学的理论和方法，结合现代仪器分析技术，，对体内外未知毒(药)物、毒品及代谢物进行定性、定量分析，并通过对毒物毒性、中毒机理、代谢功能的分析，结合中毒表现、尸检所见，综合作出毒(药)物中毒的鉴定。第九条司法会计鉴定：运用司法会计学的原理和方法，通过检查、计算，验证和鉴证对会计凭证、会计账簿、会计报表和其他会计资料等财务状况进行鉴定。第十条文书司法鉴定：运用文件检验学的原理和技术，对文书的笔迹、印章、印文、文书的制作及工具、文书形成时间等问题进行鉴定。

二手车鉴定评估报告模板

旧机动车鉴定评估报告 XX00101评报字<2019>第00101号车牌号：车主名称： XXXX二手车鉴定评估有限公司 XXXX年XX月XX日

旧机动车鉴定评估报告一、绪言 XXXX二手车鉴定评估有限公司(鉴定评估机构)接受 XXX 委托，根据国家有关资产评估的规定，本着客观、独立、公正、科学的原则，按照公认的资产评估方法，对车牌号为 XXXXXXX 的车进行了鉴定评估。本机构鉴定人员按照必要的程序，对委托鉴定评估车辆实施了实地查勘、市场调查与征询，对委托评估车辆在XXXX年XX月XX 日所表现的市场价格作出了公正反映。现将车辆评估情况及鉴定评估结果报告如下。二、委托方与车辆所有方简介委托方：XXX 委托方证件号：XXXXXXXXXXXXXXXXXX 三、评估目的根据委托方的要求，本项目评估目的：□交易□转籍□拍卖□置换□抵押□担保□二手车贷款□咨询□司法裁决□典当□其他四、评估对象厂牌型号XXXXXXXXXXXXXXXXX 牌照号XXXXXXX 车架号XXXXXXXXXXXXXXXX 发动机号XXXXXXXXXXXXXXXX 年审合格至XXXX年XX月其它齐全/有效XXXX 五、鉴定评估基准日鉴定评估基准日：XXXX年XX月XX日六、评估原则严格遵循“客观性、独立性、公正性、科学性”原则。七、评估依据（一）行为依据：旧机动车鉴定评估委托书2012年第A368号（二）法律、法规依据

1.《国有资产评估管理办法》 2.《国有资产评估管理办法实施细则》 3.《二手车流通管理办法》 4.《二手车流通管理办法实施细则》 5.《汽车报废标准》 6.其他相关的法律、法规等。（三）产权依据委托鉴定评估车辆的机动车登记证书编号：XXXXXXXXXXXX （四）评定及取价依据 1.技术标准资料：《机动车运行安全技术条件》（GB7258-2004）和《国家机动车排气污染物排放的相关规定》 2.技术参数资料：汽车技术参数及价格手册（2003年版） 3.技术鉴定资料：车辆情况鉴定表、维修记录、车辆安全检测报告（年检）、事故车辆维修报告和旧机动车鉴定的其他有关资料 4.其他资料：车辆价格网页资料八、评估方法重置成本法现行市价法□收益现值法□其他计算过程如下： 1.重置成本：因该车鉴定评估目的为交易重置成本=市场综合价=XXX万元经济里程成新率=[1-(公里数)万公里/60万公里]×100%=XXX% 技术概况成新率=技术检测得分×100%=XXX% 年限成新率=[1-(使用月数)月/180月]×100%=XXX%

死活细胞的鉴定方法

活细胞的鉴定在生物学和医学上具有很重要的意义。细胞培养过程中要随时记录细胞的生长情况，需要经常测定细胞的存活率；在肿瘤细胞的研究中，为了检验各种药物对肿瘤细胞的杀伤力，也需要测定肿瘤细胞的存活率。在临床医学中死活细胞的鉴定也有很大的应用，例如为了检测某一男子的生育能力，测定精子细胞的存活力是比较常用的办法。死活细胞的鉴定方法有很多种，常用的有染色法和仪器分析法。染色法是常用的细胞死活鉴定方法，简便，易于操作。但是通过直接的形态观察来鉴别细胞死活，实验结果很容易受操作者的主观因素的影响，存在一定的误差，所以，在实际操作中也常采用一些仪器来进行精确的批量检测。不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理，但无论采用何种办法，都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异。常用的方法包括染色法和仪器分析法。 1 染色法染色法分化学染色法和荧光染色法，根据染色机理的不同，染料或使死细胞着色，或使活细胞着色。死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括：死活细胞细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性的通过；而细胞死亡之后，细胞膜受损，通透性增加。常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝，又称锥蓝，是一种阴离子型染料，不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色，而活细胞不被着色。甲基蓝有类似的染色机理。植物细胞的质壁分离也可鉴定死活。死活细胞在代谢上的差异：是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据。美蓝是一种无毒染料，氧化型为蓝色，还原型为无色。由于活细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型，因此美蓝染色后活的酵母细胞无色；而死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们的无还原能力或还原能力极弱，使美蓝处于氧化态，从而被染成蓝色或淡蓝色。荧光素双醋酸酯（FDA）是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料，其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异：FDA本身

细胞工程复习题及答案

细胞工程复习题一、名词解释 1.细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。 2.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料 3.植物组织培养：将植物的器官、组织或细胞，在无菌条件下接种于人工配置的培养基上，使其细胞分裂、增值、分化、发育，甚至形成完整植株的方法。 4.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。 5．离体无性繁殖:简称离体繁殖，是指利用组织培养方法进行植物离体培养，在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。 6．继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。 7.体细胞杂交：（原生质体融合）指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。 8 细胞分化：即由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变，或发育方式改变的过程。 9 细胞脱分化：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。 10 细胞再分化：即脱分化后的分生细胞在特定的条件下，重新恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完整植物体，这一过程成为细胞再分化。 11 人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。 12 植物细胞全能性：指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育完整植株的潜在能力。 13 胚状体：在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。

土的分类和鉴定

粒组划分 00粒组统称细粒粗粒巨粒粒组名称黏粒粉粒砂粒细粒粗粒卵石粒漂石粒粒组粒径d的范围/mm ≤ 0.05 0.05＜d≤ 0.075 0.075＜d≤ 2 砾粒60＜d≤200 d＞200 2＜d ≤20 20＜d≤ 60

巨粒土和含巨粒的土的分类砾类土的分类土类粒组含量土代号土名称砾细粒含量＜ 5% 级配Cu≥5， Cc=1～3 GW 级配良好砾级配不同时满足上述要求 Gp 级配不良砾含细粒土砾细粒含量5%～15%GF 含细粒土砾细粒土质砾15%＜细粒含量 ≤50%细粒为黏土GC 粘土质砾细粒为黏土GM 粉土质砾土类土代号土名称巨粒土巨粒含量≥75%漂石粒> 50% B 漂石漂石粒≤ 50% Cb 卵石混合巨粒土50%<巨粒含量 <75% 漂石粒> 50% BSI 混合土漂石漂石粒≤ 50% CbSI 混合土卵石巨粒混合土15%≤巨粒含量 ≤50% 漂石> 卵石SIB漂石混合土漂石≤卵石SICb卵石混合土

砂类土的分类土类粒组含量土代号砂细粒含量＜5% 级配Cu≥5 Cc=1～3 SW 级配良好砂级配不同时满足上述要求 SP 级配不良砂含细粒土砂细粒含量5%～15%SF 含细粒土砂细粒土质砂15% ＜细粒含量≤50% 细粒为黏土SC 黏土质砂细粒为黏土SM 粉土质砂细粒土的分类土的塑性指标在塑性图中的位置土代号土名称塑性指数I P 液限w L I P ≥0.63(w L -20) 和I P ≥10 ≥40% CH 高液限粘土

<40% CL 低液限粘土 I P <0.63(w L -20)和I P <10 ≥40% MH 高液限粉土 <40% ML 低液限粉土黄土,膨胀土和红黏土的分类土的塑性指标在塑性图中的位置土代号土名称塑性指数液限w L I P ≥0.73(w L -20) <40% CLY 低液限粘土（黄土）

细胞死活鉴定

姓名陈傲蕾系年级13级生科组别同组者科目细胞生物学实验题目细胞培养与细胞死活鉴定学号【实验目的】 1、回顾细胞培养的有关知识； 2、学习小鼠脾细胞的分离技术及简单的细胞培养技术 3、掌握无菌操作的具体过程及无菌操作台的使用； 4、了解细胞原代培养的基本方法及操作过程； 5、学习掌握染色法鉴别细胞的生死状态的原理及方法； 6、学习使用血球计数板对细胞总数及活细胞数进行计数； 7、学习实验过程的详细描述及实验记录。【实验原理】细胞培养指的是在无菌条件下，把动、植物细胞从组织中取出，在体外模拟体内的生理环境，使离体的细胞在体外生长和繁殖，并且维持其结构和功能的一种培养技术。动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。从供体获得组织细胞，在无菌条件下，用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法称为细胞的原代培养。当培养的动物细胞生长增殖达到一定密度，形成致密的单层细胞时，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，从一个容器中以1：2或其他比例转移到另一个容器中扩大培养的方法，称为细胞的传代培养。传代培养的累计次数就是细胞的培养代数。高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的。但如果把活细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究，则要方便和简单得多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类揭开生、老、病、死的规律，探索优生、抗衰老和防治各种疾病的途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，使其向有利于人类健康长寿的方向发展。因此动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。细胞生死状态的鉴别方法主要是化学染色法和荧光染色法。活细胞和死亡细胞在生理技能和性质上主要存在一下差异：①细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性地通过；而细胞死后，细胞膜受损，其通透性增加。基于此，发展出了以台盼蓝、伊红、苯胺黑、赤藓红、甲基蓝以及荧光染料碘化丙啶或溴化乙啶等为染料鉴别细胞生死状态的方法，上述染料能使死亡细胞着色，而活细胞不被着色。此外，应用植物质壁分离的性质也可鉴定植物细胞的生死状态。活细胞的原生质具有选择透过性，死细胞因其原生质的选择透过性已遭破坏，故与高渗透压溶液接触时不产生质壁分离。②代谢上的差异：活细胞中新陈代谢作用强，细胞内的酶具有较强的活性和还原能力。基于此，发展处了以荧光素二乙酸酯（FDA）、荧光素二丙酸酯、荧光素二丁酸酯或荧光素二苯甲酰酯等酯化的荧光素鉴别细胞生死状态的方法，上述酯化的荧光素亲脂性提高，容易被细胞吸收进入，活细胞内的酯酶具有较强的活性，可将酯化的荧光素分解而释放出能发荧光的荧光素，该物质不能自由透过活的细胞膜，积累在细胞内，荧光显微镜下显示有明亮的绿色或黄绿色荧光；而死亡细胞内的酯酶因失去活性，不能分解酯化的荧光素，荧

微生物分类鉴定

第三节微生物的分类鉴定方法一、微生物鉴定的依据获得纯化的微生物分离菌株后，首先判定是原核微生物还是真核微生物，这实际上在分离过程中所使用的方法和选择性培养基已经决定了分离菌株的大类的归属，从平板菌落的特征和液体培养的性状都可加以判定。然后，如是原核微生物，便可根据表14-3 所示的经典分类鉴定指标进行鉴定，如条件允许，可做碳源利用的BIOLOG-GN 分析和16S rDNA 序列分析。多项结果结合起来确定分离菌株的属和种。表14-3 微生物经典分类鉴定方法的指标依据二、微生物鉴定的技术与方法根据目前微生物分类学中使用的技术和方法，可把它们分成四个不同的水平：①细胞形态和行为水平，②细胞组分水平，③蛋白质水平，④基因组水平；在微生物分类学发展的早期，主要的分类鉴定指标是以在细胞形态和习性为主，可称为经典的分类鉴定法。其他三种实验技术主要是60 年代以后采用的，称为化学分类和遗传学分类法，这些方法再加上数值分类鉴定法，可称为现代的分类鉴定方法。（一）、经典分类鉴定法经典分类法是一百多年来进行微生物分类的传统方法。其特点是人为地选择几种形态生理生化特征进行分类，并在分类中将表型特征分为主、次。一般在科以上分类单位以形态特征、科以下分类单位以形态结合生理生化特征加以区分。最后，采用双歧法整理实验结果，排列一个个的分类单元，形成双歧检索表（图14-4 ）。 A. 能在60 o C 以上生长 B. 细胞大，宽度1.3~1.8mm ……………………………………… 1. 热微菌属 ( Thermomicrobium )

BB. 细胞小，宽度0.4~0.8mm C. 能以葡萄糖为碳源生长 D. 能在pH4.5 生长…………………………………………… 2. 热酸菌属 ( Acidothermus ) DD. 不能在pH4.5 生长………………………………………………… 3. 栖热菌属 ( Thermus ) CC. 不能以葡萄糖为唯一碳源……………………… 4. 栖热嗜油菌属( 栖热嗜狮菌属Thermoleophilum ) AA. 不能在60 o C 以上生长图14-4 双歧法检索表例样应用BIOLOG-GN 仪检测分离菌株对众多碳源的利用情况判断分离菌株的分类地位，近年来也时有应用。在BIOLOG-GN 仪上有96 个小孔，其中95 孔内分装有95 种不同碳源的缓冲液，1 孔为无碳源的缓冲液对照，各孔接入适宜菌浓度和液量的分离菌株培养物，定温培养，每日定时读取BIOLOG-GN 仪计算机上各碳源利用情况，一般为时1 周，BIOLOG-GN 仪可显示出该鉴定菌株的最可能归属。（二）、数值分类法又称阿德逊氏分类法() 。它的特点是根据较多的特征进行分类，一般为50 ～60 个，多者可达100 个以上，在分类上，每一个特性的地位都是均等重要。通常是以形态、生理生化特征，对环境的反应和忍受性以及生态特性为依据。最后，将所测菌株两两进行比较，并借用电子计算机计算出菌株间的总相似值，列出相似值矩阵( 图14-5) 。为便于观察，应将矩阵重新安排，使相似度高的菌株列在一起，然后将矩阵图转换成树状谱(dendrogram)( 图14-6) ，再结合主观上的判断( 如划分类似程度大于85 ％者为同种，大于65 ％者为同属等) ，排列出—个个分类群。图14-5 显示6 个细菌菌株的遗传相似矩阵图

司法鉴定业务分类概况

司法鉴定业务分类概况根据全国人民代表大会常务委员会《关于司法鉴定管理问题的决定》第二条规定：国家对从事下列司法鉴定业务的鉴定人和鉴定机构实行登记管理制度：（一）法医类鉴定；（二）物证类鉴定；（三）声像资料鉴定；（四）根据诉讼需要由国务院司法行政部门商最高人民法院、最高人民检察院确定的其他应当对鉴定人和鉴定机构实行登记管理的鉴定事项。法律对前款规定事项的鉴定人和鉴定机构的管理另有规定的，从其规定。其中：（一）法医类鉴定，包括法医病理鉴定、法医临床鉴定；法医精神病鉴定、法医物证鉴定和法医毒物鉴定。（二）物证类鉴定，包括文书鉴定、痕迹鉴定和微量鉴定。（三）声像资料鉴定，包括对录音带、录像带、磁盘、光盘、图片等载体上记录的声音、图像信息的真实性、完整性及其所反映的情况过程进行的鉴定和对记录的声音、图像中的语言、人体、物体作出种类或者同一认定。此外根据诉讼活动的需要，诉讼中涉及到的其它鉴定业务还有：计算机司法鉴定、环境监测司法鉴定、工程造价司法鉴定、产品质量司法鉴定、司法会计鉴定、知识产权司法鉴定、税务司法鉴定、农业司法鉴定、资产评估司法鉴定、建筑工程司法鉴定、枪弹痕迹司法鉴定等。上述鉴定机构和鉴定人的统一登记管理事项在国务院司法行政部门商最高人民法院、最高人民检察院确定后，将统一纳入司法行政部门登记管理范围。法医病理鉴定 “法医病理鉴定”，俗称尸体鉴定。参考目前国内的有关规定，法医病理鉴定，是指运用法医病理学的理论和技术，通过尸体外表检查、尸体解剖检验、组织切片观察、毒物分析和书证审查等，对涉及与法律有关的医学问题进行鉴定或推断。其主要内容包括：死亡原因鉴定、死亡方式鉴定、死亡时间推断、致伤（死）物认定、生前伤与死后伤鉴别、死后个体识别等。刑事诉讼法第条规定：“对于死因不明的尸体，公安机关有权决定解剖，并通知死者家属到场。”公安部关于《刑事案件现场勘查规则》规定：“勘验有尸体的现场，必须有法医参加，尸体检验要求做到：详细检查死者的衣着情况，尸体的外表现象以及伤痕的形状、大小和位置；根据需要，捺印十指指纹和掌纹，提取血、尿、胃内容等；对无名尸体的相貌特征，生理、病理特征，以及衣着、携带物品和尸体包装物的特征，进行细致检查，详细记载，并一律捺印十指指纹和掌纹。”法医病理鉴定主要涉及以下内容：一是确定死亡原因，主要在于确定自然死亡（病死或老死）还是非自然死亡（暴力死亡），在同时存在损伤与疾病时，要分析损伤、疾病与死亡的关系，对于存在几种致命性损伤，应确定主要死因，以便澄清谁应负主要致死责任。二是判定致死方式，即判定是他杀、自杀还是意外死亡，判定致死方式要比确定

司法鉴定报告书模板

XXXX法医临床司法鉴定所对xxx伤残鉴定意见书 XX法［20xx］临鉴字第xx号一、基本情况委托人：XXXXXXXXX 委托鉴定事项：对XXX进行伤残程度评定受理日期：20XX年X月XX日鉴定材料：1、XXXXXXXXX委托书1份 2、XXXXXX人民医院住院病历复印件1份 3、DR、CT、MRI片共XX张 4、XXXXXX身份证复印件1份在场人员：XXX XXX XXX XXX 鉴定地点：XXXXXXXXXX 鉴定日期：20XX年XX月XX日被鉴定人：XXX、男、汉族、出生年月：19XX年XX月XX日现住址：河南省XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 身份证号：XXXXXXXXXXXXXXXXXX 二、检案摘要根据送检材料及委托书记载：20XX年X月XX日被鉴定人XXX因交通事故受伤，伤后到XXXX人民医院住院治疗。

20XX年X月XX日我所接受XXXXXXXXXXX委托对XXX进行伤残等级鉴定，X月XX日对其进行活体检查。三、检验过程 1、查阅XXXX人民医院住院病历（号：152342）记载：入院日期：2013年6月30日主诉：外伤后头痛头晕并双下肢疼痛2小时体格、专科检查摘要：T：36.3℃，P：86次／分，R：19次／分，BP：100／60mmHg；神志清，精神差，左枕部肿胀、压痛；胸廓无畸形、压痛；左小腿中段及右股部中上段肿胀、压痛，可触及骨擦感；左手背有一约9cm长纵形裂口，部分深达骨膜，皮肤挤皮下组织向两侧潜行剥离，宽约4cm，左腕部背侧约6×5cm大小范围内有多条不规则裂口，皮缘不整，部分伤口深达骨膜，皮肤与皮下组织有剥离，皮瓣厚薄不均，皮肤有部分缺失，创面污染重，有玻璃碎块及沙粒残留，手指活动尚好；四肢肌力、肌张力正常。头颅SCT：1、枕骨左侧骨折；2、蛛网膜下腔出血；3、左枕部头皮损伤。X线片：右侧胫腓骨骨折、左侧股骨骨折。入院诊断：1、急性闭合性颅脑损伤：①脑挫裂伤；②蛛网膜下腔出血；③枕骨骨折；④左枕部头皮挫伤；2、右侧胫腓骨骨折；3、左侧股骨骨折；4、左手背皮肤撕脱伤；5、左腕部挫裂伤。诊疗经过：入院后完善相关检查，左手及左腕部伤口给予清创缝合，抗生素应用，术前检查无手术禁忌症后在麻醉下行“左股骨骨折切开复位髓内钉内固定术、右胫骨骨折切开复位外固定架固定术

死活细胞的鉴别word版

（一）、死活细胞的鉴别生活细胞近似无色透明，用普通光镜无法观察其形态，需用相差显微镜来观察。染色排除法：组织培养中检查死活细胞最常用的是“染色排除法”这类方法简单但不甚严格，它只能判断细胞的代谢死亡，不反映细胞能否增殖。由于未经过固定、专门染色，所以看不到死活细胞的形态差别。所用染料的分类：一般的生物染料不能穿过活细胞膜只有细胞被固定或细胞膜被破坏，染料才能进入细胞膜。第一类：死细胞着色，使死细胞着色的大部分是酸性染料。它们不容易穿透活细胞的质膜，进入胞内，但却能渗透死亡的细胞，使之着色。如①台盼兰（Trypan blue）：0.5-1%的台盼兰，pH7.0-7.2，每毫升细胞悬液加 0.1ml 染液，2 分钟后镜检，活细胞没有染上，死细胞全部被染成蓝色。②苯胺兰(Aniline’ black)： 0.05%的苯胺黑以 1：10 的量与细胞悬液混匀，1-2 分钟后，死细胞被染成黑色。 ③伊红 Y：细胞悬液与细胞悬液混喝，2 分钟后死细胞被染成桃红色。等。第二类：活细胞着色，多为碱性染料，如中性红、健那绿、亚甲蓝、甲苯胺蓝等。它们是一些无毒或毒性很小的染料，由于电性吸引而堆积在细胞中某一特定的结构上从而显色，即它们解离后带正电，其中有的染料可与胞内某些结构专一性的结合。 ①1%结晶紫染色生理 1%结晶紫盐水与细胞悬液 1：2 混合，立即镜检，或细胞被染成蓝紫色，而死细胞不着色。属于活细胞染料。活细胞染料无毒，无物理、化学变化，基本上不影响细胞的生命活动。 ②用呀啶橙染色可以鉴别出细胞固定前的死活状态。丫啶橙是一种与 DNA 和 RNA 都能结合的荧光染料，在兰光或紫外光激发下，DNA 可激发出 530nm 的荧光发射峰，RNA 可激发出 640nm 的荧光发射峰，它与双链 DNA 的结合方式是潜入双链之间，而与单链 DNA 和 RNA 则由静电吸引堆积在磷酸根上。在蓝光的激发下，细胞核发亮绿色荧光，核仁和胞质 RNA Page 9发桔红色荧光。因此，原来的活细胞经固定、染色后细胞核呈亮绿色，核仁和散布在细胞质中的 RNA 呈桔红色，胞质其余部分为淡红褐色。死亡的细胞，因物质发生变形，其核呈暗绿色，胞质整个呈暗绿色。但丫啶橙的阳离子也可以结合在蛋白质、多糖和膜上而发荧光，但由于经过细胞固定抑制了这种结合，从而主要显示出的是 DNA 和 RNA 两种核酸。本次实验即选用活细胞染料健那绿来显示线粒体。（二）细胞核和染色体的染色 Giemsa 染色：姬姆萨是常用的染料，可观察核、染色体。醋酸地依红染色：可显示有丝分裂染色体的微细结构，如次缢痕、染色质丝的螺旋化等。该染料同时具有固定和染色的作用，因此也可用来坐快速检查有丝分裂指数。（细胞涂片，0.075 mol 的 KCI 低渗 5-10 分钟，使细胞膨胀，染色体分裂；甲醇固定 10 分钟，空气干燥，滴加 2%醋酸地衣红，染 10-20 分钟后即可观察。（三）细胞器的特殊染色