《生物技术综合实验》
《生物技术综合实验》
一、实验课名称：生物技术综合实验
Experiment of Biotechnology
二、实验课性质：独立设课，专业主干必修课
三、适用专业：生物技术
四、采用教材及参考书
1．贾士儒主编．生物工艺与工程实验技术（第一版）．北京：中国轻工业出版社，2002.9
2．魏群主编．生物工程技术实验指导（第一版），北京：高等教育出版社，2002.9 3．陈坚等主编．发酵工程实验技术（第一版），北京：化学工业出版社，2003.5
五、学时学分：课程总学时：72；课程总学分：2；实验课总学时：72
六、实验项目名称和学时分配
七、实验教学的目的和要求
本门课程的学习目的是让学生能够掌握和综合运用各种生物技术实验技能，并提高学生的综合动手能力和实验素质。要求学生通过实验能够理解实验原理及实验方案，掌握正确操作规程；掌握仪器的使用，了解其性能参数、适应范围及注意事项，各种参数的测定方法；掌握生物技术领域常用参数的测定方法。
八、实验项目的内容和要求
实验一：α-淀粉酶产生菌的分离及验证
内容：（1）土壤采样及材料预处理；（2）培养基的配制、倒平皿、稀释涂布、培养；（3）透明圈的辨认与α-淀粉酶产生菌的分离纯化；（4）摇瓶培养与淀粉酶活性的测定。
要求：本实验为综合性实验，要求学生掌握从土壤中分离微生物的方法，理解
以淀粉为惟一碳源进行分离淀粉酶产生菌的原理，掌握透明圈辨认方法，掌握淀粉酶活性的测定方法。
应配备的主要设备名称和台件数
实验二：呼吸缺陷型菌种的选育与确证
内容：（1）酵母菌种的诱变处理及诱变后菌种的液体培养；（2）CM培养基的配制及稀释涂布；（3）TTC下层培养基的配制及点种；（4）TTC上层培养基的配制与呼吸缺陷型菌落的观察；（5）甘油培养基的配制与呼吸缺陷型酵母的验证。
要求：通过本实验要求学生掌握诱变育种的方法，理解诱变育种的原理，掌握变色圈法分离菌种的方法。
应配备的主要设备名称和台件数
实验三：谷氨酸发酵及提取工艺
内容：（1）谷氨酸菌种的制备；（2）噬菌体的检测（选开）；（3）大肠杆菌（谷氨酸脱羧酶）酶粉的制备（选开）；（4）发酵过程中还原糖的测定；（5）发酵过程中谷氨酸含量的测定；（6）发酵罐的构造及空消；（7）谷氨酸中糖一次发酵及控制；（8）谷氨酸高糖一次发酵及控制（选开）；（9）谷氨酸发酵液黏度的检测及菌体浓度的检测；（10）谷氨酸的离子交换回收（选开）；（11）谷氨酸的等电回收及精制；（12）谷氨酸钠质量控制及分析；（13）离子喷雾干燥使用及发酵液的无害化处理要求：通过本实验使学生对微生物的无菌操作、生化分离技术、发酵工程的原理、生物工程设备的应用及生物工艺学所学的知识进行了全面的回顾，因此可以培养学生的综合技能。
（1）要求学生通过本实验了解发酵工业菌种的制备工艺和质量控制；
（2）掌握发酵罐的空消、实消原理和方法，能正确的操作发酵罐；
（3）掌握生物工程工业中物质的分离、提取、精制工艺；掌握还原糖、噬菌体
等主要指标的检测工艺。
应配备的主要设备
实验四：糖化酶摇瓶实验及糖化酶的提取
内容：（1）糖化酶摇瓶实验；（2）发酵过程中菌丝形态显微镜观察、pH测定；（3）糖化酶活力测定；（4）糖化酶的过滤；（5）糖化酶的浓缩和沉淀；（6）糖化酶的干燥和粉碎；（7）成品酶活的测定。
要求：（1）掌握摇瓶发酵的原理；（2）掌握胞外酶提纯的原理及方法。
应配备的主要设备
实验五：固体发酵生产柠檬酸
内容：（1）黑曲霉菌种的制备；（2）接种与摊盘；（3）柠檬酸固体发酵培养的检测与控制；（4）柠檬酸提取；（5）纸层析鉴定柠檬酸；（6）离子色谱法鉴定柠檬酸（选做）。
要求：掌握固体发酵的方法，理解柠檬酸发酵原理，掌握掌握柠檬酸的测定及提取方法。
应配备的主要设备
实验六：固定化酵母连续生产酒精
内容：（1）固定化酵母的制作；（2）乙醇连续化发酵及控制；（3）乙醇的蒸馏；（4）乙醇浓度的检测；（5）葡萄糖浓度的检测；（6）菌体量的检测。
要求：（1）掌握酵母细胞的固定化技术；（2）掌握连续化酒精发酵的原理；（3）掌握相关参数的测定方法。
应配备的主要设备
实验七：红曲发酵及红曲色素的提取
内容：（1）红曲菌的分离纯化及形态观察；（2）红曲液体菌种的制备；（3）实验室红曲固体发酵；（4）红曲代谢产物的浓缩；（5）红曲色素的分离纯化；（6）红曲色素色价的测定；（7）红曲粗提物的自由基清除活性测定；（8）红曲霉素的制取及其抑菌能力的测定；（9）红曲淀粉酶活力的测定。
要求：（1）掌握红曲的生产工艺；（2）掌握红曲的提取工艺；（3）了解红曲的功能
实验设备
九、实验课考核方式
（1）实验报告：本门课程要求实验报告主要描写实验目的、实验原理、实验方法及步骤及实验结果分析和注意事项等内容。
（2）考核方式：
实验报告占20%，实验过程中个人表现占20%，实验考试成绩占60%。