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激光共聚焦显微镜操作手册最终版

激光共聚焦显微镜操作手册最终版
激光共聚焦显微镜操作手册最终版

徐珏2011.12.3 17:59 于苏州宝石御景园

目录

标准探测模式(DU4)图像拍摄流程 (1)

一、软件开启 (1)

二、基本设置 (2)

[A1 Setting]界面主要功能区域简介 (2)

[Setting]界面功能简介 (4)

[Filter and Dye]功能区简介 (6)

串色现象解释及Line模式图解 (6)

Line模式图解 (7)

[scan setting]功能区简介 (7)

三、获得图像 (8)

[Acquisition]功能区简介 (10)

放大方式选择按钮简介 (13)

图片扫描参数调用简介 (17)

JP2格式图片转化为JPG/TIFF格式图片的操作 (18)

各通道荧光图像自由叠加的介绍 (18)

数据分析 (21)

一、ROI区域分析 (21)

二、LUTs调节图像荧光亮度 (23)

三、去背景 (25)

四、标尺添加 (26)

六、长度面积等常规测量 (28)

七、细胞计数 (28)

[Binary Toolbar]界面简介 (32)

光谱扫描模式(SD模式) (34)

一、SD模式基本设置 (34)

[Detector]标签页功能简介 (35)

[Binng/Skip]标签页简介 (36)

二、图像获得 (37)

三、数据分析 (39)

[Spectrum Profile]视窗简介 (40)

四、光谱拆分 (40)

虚拟滤光扫描模式(VF模式) (47)

一、VF模式基本设置 (47)

[Detector]设置标签页简介 (48)

[Gating Setting]标签页简介 (48)

二、获得图像 (48)

时间序列拍摄 (49)

[Capture Timelapse]视窗简介 (49)

[ND]界面简介 (51)

[Time Measurement]界面简介 (53)

[Capture Z-series]视窗简介 (55)

拼大图拍摄 (60)

光活化序列拍摄 (61)

[Photo Acquition]功能区简介 (62)

[Sequential Stimulation]界面简介 (63)

常见细胞类型和细胞器形状 (65)

常用荧光染料及应用领域 (68)

标准探测模式(DU4)图像拍摄流程

一、软件开启

1、双击桌面NIS-Element图标。

2、出现对话框后,选择[Nikon A1/C1 Confocal],点击OK按钮。

3、出现NIS启动窗口,软件与硬件通讯开始建立,此过程将持续5-10秒或者更长,请耐

心等待。通讯建立后,自动出现NIS-Element操作主界面。

二、基本设置

4、鼠标右击操作主界面空白处,在[Acquisition Controls]中选择[A1 Settings],出现激光模式设置界面(A1 setting)。

[A1 Setting]界面主要功能区域简介:

5、根据实验情况设置光路,点击[Filter and Dye]功能区中的[Setting]按钮,打开详细的光路设置界面(Setting)。

[Setting]界面功能简介:

6、点击[OK]按钮回到[A1 Setting]界面,由于[Setting]界面中光路设置的调整,[Filter and Dye]和[Acqusition]功能区会做出相应的改变。下图为标准探测模式(DU4)的通道界面。

[Filter and Dye]功能区简介:

串色现象解释及Line模式图解:

串色:目前的光路设置为一个激光激发样品产生的发射光只对应一个接收通道,则当同时有两种及以上激光激发样品时,如一种或多种激光激发的发射光在多个通道均可检测到,将导致测试结果的不正确。

Line模式图解:

一个方格为一个像素点,一行为扫描的一条线。

7、在[A1 Setting]界面的[scan setting]功能区设置扫描参数,扫描参数在扫描过程中也应根据情况进行调整。

[scan setting]功能区简介:

三、获得图像

8、点击[Acquire]功能区[Live]按钮,开始扫描,主界面出现扫描图像[Live]视窗,视窗中功能键介绍见数据分析章节。

鼠标滚轮前后滑动,调整焦距以找到荧光强度最大的焦平面,得到亮度最高的扫描图像。

图像在标准探测模式(DU4)下获得,注意下方通道标签和[Filter and Dye]功能区探测器类型和色彩的一一对应关系。[All]标签页为所有通道图像全部叠加到一起后的图像;色彩标签页为所对应探测器通道的图像。

[TD]标签页为激光明场图像;[Custom]标签为自定义标签,鼠标右击custom标签,点击属性,可选择两个或几个所需要通道进行叠加得到所需要的图像;右击色彩通道标签,选择属性,还可改变通道色彩。

9、扫描图像亮度调节。

荧光亮度应处在一个合适的范围,既不能太低使画面显得模糊,也不能太高使画面曝光过度,同时希望背景干净,随机噪声少;因此需要对图像的荧光亮度进行调整。在Live状态下,[Acquisition]功能区通过调整PMT探测器增益(HV),激光发射功率(Laser)和针孔(pinhole)大小改变扫描图像亮度。[scan setting]功能区也应配合调节,但必须在Frozen 状态下进行,否则会对扫描头造成严重损害!

[Acquisition]功能区简介:

10、Frozen 状态

在[Live]视窗状态下,再次点击[Acquire]功能区[Live]按钮,图像的[Live]视窗变为[Frozen]视窗,即结束扫描,画面定格。在Frozen 状态下,可实现多种程序操作,如拍摄,设置[Scan Setting]功能区参数,光路设置,图像放大框确定等,这些操作不可在[Live]状态下进行,会对扫描头造成损害。

11、图像数码放大功能的实现

在物镜不变的情况下,通过软件设置也能得到当前扫描图像的放大图像。

(1)点击[Live]界面的放大按钮,得到图像放大框。

点击[Live]界面右击[Scan Area]按钮,或在主界面空白处,在[Acquisition Control]中选择[Scan Area],得到扫描区域视窗(Scan Area),也可实现相同功能,在[Scan Area]视窗中还可实现放大倍数的设置。。

放大方式选择按钮简介:

方形放大

长方形放大

线扫描

剪切

Scan Area

消除放大区域

(2)在Frozen状态下,确定放大或剪切区域,右击该区域使画框变为绿色;点击[Live]按钮,得到放大了的扫描图像或剪切后的扫描图像。

A.正方区域旋转后得到的的放大图像。

B.方形区域得到的放大图像

C .点击[Frozen]视窗上的[Edit]按钮,出现ROI 绘图选择框。在图像上选择需要的区域后,[Finish]确定,点击[Live]扫描得到选中区域的剪切图像。

12、[Ti Pad]界面的功能

激光共聚焦显微镜的原理与应用范围

激光共聚焦显微镜的原理与应用范围 激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代的研究工具。 1激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的原理 从基本原理上讲,共聚焦显微镜是一种现代化的光学显微镜,它对普通光镜从技术上作了以下几点改进: 1.1用激光做光源因为激光的单色性非常好,光源波束的波长相同,从根本上消除了色差。1.2采用共聚焦技术在物镜的焦平面上放置了一个当中带有小孔的挡板,将焦平面以外的杂散光挡住,消除了球差;并进一步消除了色差 1.3采用点扫描技术将样品分解成二维或三维空间上的无数点,用十分细小的激光束(点光源)逐点逐行扫描成像,再通过微机组合成一个整体平面的或立体的像。而传统的光镜是在场光源下一次成像的,标本上每一点的图像都会受到相邻点的衍射光和散射光的干扰。这两种图像的清晰度和精密度是无法相比的。 1.4用计算机采集和处理光信号,并利用光电倍增管放大信号图 在共聚焦显微镜中,计算机代替了人眼或照相机进行观察、摄像,得到的图像是数字化的,可以在电脑中进行处理,再一次提高图像的清晰度。而且利用了光电倍增管,可以将很微弱的信号放大,灵敏度大大提高。由于综合利用了以上技术。可以说LSCM是显微镜制作技术、光电技术、计算机技术的完美结合,是现代技术发展的必然产物。 2LSCM在生物医学研究中的应用 目前,一台配置完备的LSCM在功能上已经完全能够取代以往的任何一种光学显微镜,它相当于多种制作精良的常用光学显微镜的有机组合,如倒置光学显微镜、紫外线显微镜、荧光显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜(PH)、微分干涉差显微镜(DIC)等,因此被称为万能显微镜,通过它所得到的精细图像可使其他的显微镜图像无比逊色。

Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明

Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明 操作步骤: 本显微镜的荧光光路与明视场(相差、DIC也属明视场)光路相对独立。当使用明视场时,无需打开荧光光源,进打开总电源即可。当使用荧光观察时,可同时打开总电源和荧光电源。 明视场观察: 1.开机:按动总电源开关“1”处接通电源,此时开关和指示灯点亮,打开显微镜底座左侧的透射照明器开关,从小到大调节照明器开关下方的亮度调节旋钮,使照明亮度适当。 2.首先将聚光器模板A放入光路,用10×物镜对样品进行对焦,调节目镜的屈光度调节环,然后换用40×物镜观察样品。 3.关机:将亮度调节旋钮旋至亮度最暗位置,关掉显微镜底座左侧的透射照明器开关,然后按动总电源开关“0”处关闭电源。 DIC微分干涉观察: 开机、关机等与明视场观察相同,区别是要使用聚光器相对应的DIC模板N1及起偏器、检偏器,将其放入光路后,再使用专用的银白色DIC物镜对焦观察。在观察过程中可旋转起偏器,达到最佳的观察效果。 相差观察: 开机、关机等与明视场观察相同,区别是要使用聚光器相对应的相差模板PH1。 荧光观察: 1.开机:先打开荧光灯电源开关,然后按住电源开关上方的荧光灯激发按钮3秒钟后松开,即可见荧光灯点亮。 2.打开荧光转盘上的荧光拨杆至“0”位置,此时荧光光路打开。旋转荧光转盘,转入所对应的滤光片位置即可进行荧光观察;在观察过程中可插入位于荧光灯源前方的减光片,以改变荧光强度,减弱对活细胞样品的损伤。 3.关机:直接关掉荧光灯电源开关即可。 注意事项: 1.短时间内频繁开关荧光灯电源,将极大的缩短荧光灯寿命。 2.荧光光源打开后即可使用,但必须使用20分钟才可以关闭;关闭30分钟以后才可以再次打开,否则会导致荧光灯损坏。 3.不要同时反方向转动显微镜左右两侧的调焦钮,否则会导致显微镜损坏。 4.粗动调焦钮达到限定位置后,如果继续向同一方向旋转会引起显微镜故障。请不要旋转过度。 5.显微镜光源在工作时会产生高温,因此小心不要接触光源以防烫伤,也不要将易燃品如纸张、布、塑料和酒精等放置于光源附近。

显微镜的使用方法

显微镜的使用方法: 1、实验时要把显微镜放在座前桌面上稍偏左的位置,镜座应距桌沿 6~7 cm左右。 2、打开光源开关,调节光强到合适大小。 3、转动物镜转换器,使低倍镜头正对载物台上的通光孔。先把镜头调节至距载物台1~2cm左右处,然后用左眼注视目镜内,接着调节聚光器的高度,把孔径光阑调至最大,使光线通过聚光器入射到镜筒内,这时视野内呈明亮的状态。 4、将所要观察的玻片放在载物台上,使玻片中被观察的部分位于通光孔的正中央,然后用标本夹夹好载玻片。 5、先用低倍镜观察(物镜10X、目镜10X)。观察之前,先转动粗动调焦手轮,使载物台上升,物镜逐渐接近玻片。需要注意,不能使物镜触及玻片,以防镜头将玻片压碎。然后,左眼注视目镜内,同时右眼不要闭合(要养成睁开双眼用显微镜进行观察的习惯,以便在观察的同时能用右眼看着绘图),并转动粗动调焦手轮,使载物台慢慢下降,不久即可看到玻片中材料的放大物像。 6、如果在视野内看到的物像不符合实验要求(物像偏离视野),可慢慢调节载物台移动手柄。调节时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物像移动的方向正好相反。如果物像不甚清晰,可以调节微动调焦手轮,直至物像清晰为止。 7、如果进一步使用高倍物镜观察,应在转换高倍物镜之前,把物像中需要放大观察的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察时,视野中的物像范围缩小了很多)。一般具有正常功能的显微镜,低倍物镜和高倍物镜基本齐焦,在用低倍物镜观察清晰时,换高倍物镜应可以见到物像,但物像不一定很清晰,可以转动微动调焦手轮进行调节。 8、在转换高倍物镜并且看清物像之后,可以根据需要调节孔径光阑的大小或聚光器的高低,使光线符合要求(一般将低倍物镜换成高倍物镜观察时,视野要稍变暗一些,所以需要调节光线强弱)。 9、观察完毕应先将物镜镜头从通光孔处移开,然后将孔径光阑调至最大,再将载物台缓缓落下,并检查零件有无损伤,特别要注意检查物镜是否沾水沾油,如沾了水或油要用镜头纸擦净,检查处理完毕后即可铺上防尘布。 购买显微镜之前,首先先了解自己所要做的实验目的,针对选择合适的显微镜,因显微镜种类多。 普通光学显微镜的使用方法 使用方法:(一)显微镜的主要构造 普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。 1.机械部分 (1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。 (2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。 (3)镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。 (4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。 (5)物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3-4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。 (6)镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,

显微镜测量使用说明

WT-1000GM操作手册 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司

相机及操作软件介绍 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司专业开发显微镜数字相机CMOS系列(TCA-1.3C,TCA-1.3B/W,TCA-3.0C,TCA-5.0)及CCD 系列(TCC3.3MP、TCC-1.4HICE)广泛应用于显微镜成像、凝胶成像、化学发光成像等众多科研质检生产领域。 WT-1000GM 为通用相机操作、图像处理、图像测量软件,该软件操作方便,功能专业,性能稳定,界面友好,是您工作科研的得力助手。

相机安装及软件操作介绍 1.1 操作系统要求 本公司相机及软件支持windows XP, vista, 2000, 操作系统,但要求系统安装Directshow 9.0 components. 1.2Hardware requirement 1.2.1电脑要求配置 CPU: Intel Pentium 4-2.6G; 内存RAM: 512 MB 硬盘HDD: 10GB USB: USB2.0 interface 安装相机驱动 2.1安装相机 2.1.1. 自动安装 1.打开光盘内TCA-1.3驱动Driver文件夹,运行安装程序 。 2.出现下面窗口,选择下一步。

3.出现该窗口选择,仍然继续4.TCA-1.3已经成功安装到计算机内

5. 安装完毕右下角任务栏会提示硬件安装完成,选择设备管理器可以看到如下 位置有该相机的属性显示。 2.1. 3. 安装软件 直接运行WT-1000GM文件夹里的Sutup.exe文件就可以将软件安装到指定的位置了 1. 双击“setup.exe”

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)采用点光源照射样本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜搜集,并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面,避免了非焦平面上杂散光线的干扰,克服了普通显微镜图像模糊的缺点,因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图 二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统,激光光源,扫描装置和检测系统构成,整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地

进行。显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式,前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 (一)细胞的三维重建 普通荧光显微镜分辨率低,显示的图像结构为多层面的图像叠加,结构不够清晰。LSCM能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描,得到一组光学切片,经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法,可作单色或双色图像处理,组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态,也可从不同的断面观察细胞内部结构,测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法,可以产生在不同照明角度形成的阴影效果,突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。(二)静态结构检测 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡 检测细胞凋亡不同时期细胞形态、细胞凋亡相关蛋白

Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 操作手册

Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜操作手册 目录: 1 系统得组成 系统组成及光路示意图 实物照片说明 2 系统得使用 2、1 开机顺序 2、2 软件得快速使用说明 2、3 显微镜得触摸屏控制 2、4 关机顺序 3 系统得维护 1 系统得组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。 系统组成及光路示意图: 电脑工作站 激光器 电动荧光显微镜扫描检测单元 实物照片说明: 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO2 培养系统控制器 激光器 电脑工作站 2 系统得使用 2、1 开机顺序 (1)打开稳压电源(绿色按钮) 等待2 分钟(电压稳定)后,再开其它开关 (2)主开关[ MAIN SWITCH ]“ON” 电脑系统[ SYSTEMS/PC ]“ON” 扫描硬件系统[ PONENTS ]“ON” (3)打开[ 电动显微镜开关] 打开[ 荧光灯开关] (注:具有5 档光强调节旋钮) (4)Ar 离子激光器主开关“ON” 顺时针旋转钥匙至“—” 预热等待约15分钟, 将激光器[ 扳钮] 由“Standby”扳至 “Laser run”状态,即可正常使用 (5)打开[ 电脑开关],进入操作系统

注:键盘上也具有[ 电脑开关] 2、2 软件得快速使用说明 (1)电脑开机进入操作系统界面后,双击桌面共聚焦软件ZEN 图标 (2)进入ZEN 界面,弹出对话框: “Start System”——初始化整个系统,用于激光扫描取图、 分析等。 “Image Processing”——不启动共聚焦扫描硬件,用于已 存图像数据得处理、分析。 (3)软件界面: 1 功能界面切换:扫描取图(Acquisition)、图像处理(Processing)、维护(Maintain) (注:Maintain仅供Zeiss专业工程师使用) 2 动作按钮; 3 工具组(多维扫描控制); 4 工具详细界面; 5 状态栏; 6 视窗切换按钮; 7 图像切换按钮;8 图像浏览/预扫描窗口;9 文档浏览/处理区域;10 视窗中图像处理模块 动作按钮: Single ——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。 Start ——开始扫描单张图片或一个实验流程(1组图片,如XYZ、XYT 等)。 Stop ——暂停/结束扫描。 New ——建立一个新图像扫描窗口/文档。 激光连接状况检查 眼睛观察/相机/共聚焦LSM 光路切换(ZEN软件界面右上角): Ocular ——通过观察筒用眼睛观察。(激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。) Camera ——光路切换至相机。 LSM ——共聚焦扫描成像光路。 显微镜设置: “Ocular”——> “Light Path”——> 点击物镜图标,选择物镜——> 样品聚焦。 透射光控制(Transmitted Light Control) 反射光光闸控制(Reflected Light Shutter) 荧光激发块选择(Reflector) 共聚焦LSM 扫描设置 点击“LSM”(ZEN软件界面右上角),系统切换至共聚焦扫描光路: 光路设置: Smart Setup ——自动预设光路 选取“荧光探针”、“颜色”、扫描方法, 应用“Apply”。 (注:Fastest 为最快速扫描,多条激光谱线同时扫 描。Best signal 为最佳信号扫描,多条激光谱线顺 序扫描。Best promise 为兼顾速度与信号得折

显微镜的使用方法与步骤

WORD格式 附:显微镜的使用方法与步骤 一、取镜和安放 1.右手握住镜臂,左手托住镜座。 2.把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘 7 厘米左右处)。安装 好目镜和物镜。 二、对光 3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔( 物镜的前端与载物台要保持 2 厘米的距离 ) 。 4.把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内( 右眼睁开,便于以后同时画图) 。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜,可以看到白亮的视野。 三、观察 5.把所要观察的玻片标本(也可以用印有“ 6”字的薄纸片制成)放在载物台上, 用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。 6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以 免物镜碰到玻片标本)。 7.左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清 物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。 8.高倍物镜的使用:使用高倍物镜之前,必须先用低倍物镜找到观察的物象, 并调到视野的正中央,然后转动转换器再换高倍镜。换用高倍镜后,视野内亮度变暗, 因此一般 选用较大的光圈并使用反光镜的凹面,然后调节细准焦螺旋。观看的物体数目变少, 但是体积变大。 四、整理 8.实验完毕,把显微镜的外表擦拭干净。转动转换器,把两个物镜偏到两旁, 并将镜筒缓缓下降到最低处,反光镜竖直放置。最后把显微镜放进镜箱里,送回原处。 《注意事项》: 1、严忌单手提取显微镜。 2、若须移动显微镜,务必将显微镜提起再放至适当位置,严忌推动显微镜(推动时造 成的震动可能会导致显微镜内部零件的松动,切记!! ),使用显微镜请务必小心轻放。 3、使用显微镜时坐椅的高度应适当,观察时更应习惯两眼同时观察,且光圈及 光源亮度皆应适当,否则长时间观察时极易感觉疲劳。 4、转动旋转盘时务必将载物台降至最低点,以免因操作不当而刮伤接目镜之镜头。 5、标本染色或其它任何操作皆应将玻片取下,操作完成后再放回载物台观察, 切勿在载物台上操作,以免染剂或其它液体流入显微镜内部或伤及镜头。 6、观察完一种材料,欲更换另一种材料时,务必将载物台下降至最低点,换好 玻片后再依标准程序重新对焦,切勿直接抽换标本,以免刮伤镜头或玻片标本。 7、用毕显微镜应将载物台下降至最低点,并将低倍镜对准载物台中央圆孔处, 将电源线卷好,盖上防尘罩,并收入存放柜中。 专业资料整理

Nikon 80i荧光显微镜使用说明

Nikon 80i荧光显微镜使用说明 △荧光显微镜属贵重仪器,未经保管人员同意请勿擅自使用。 △严格按照操作步骤进行,在使用过程中如发现问题应及时向保管人员反映。 △因违反操作规程,而导致仪器损坏,根据本中心《损坏仪器赔偿制度》进行赔偿。 △使用者在使用完毕后应进行登记. 维护和保养 本仪器应定期进行维护和保养。 ●防止镜头霉变,定期除湿。 ●为防止损坏荧光灯泡,荧光光源关闭后,15分钟内不得再重新开启。 ●荧光灯泡的最佳使用期限是200小时,如发现荧光强度明显降低应更换荧光灯泡。 荧光显微镜操作步骤 △显微镜系精密仪器,务请不要碰击,要仔细耐心使用。 △荧光光源关闭后,15分钟内不得再开启。 △荧光灯泡的最佳使用期限是200小时,因此每次使用时请尽量缩短时间。 1.插上电源插座,打开主机电源开关。 2. 将待检标本置于载物台上。 3. 用10×物镜对焦点,根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。 4. 调节光圈及灯光强度至合适位置。 5. 调节粗调和微调使标本至最清晰。 6. 拔出活动杆,使光路通过CCD至显示器。 7.保存图象至电脑中。 8. 使用完毕后关掉电源,如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。 ●荧光光源操作 1.插上荧光光源电源插座,打开荧光光源电源开关。 2. 打开光栅。 3. 根据使用荧光素的不同选择不同的荧光滤光片。 4. 将待检标本置于载物台上。 5. 用10×物镜对焦点,根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。 6. 调节粗调和微调使标本至最清晰。 7. 拔出活动杆,使光路通过CCD至显示器。 8. 保存图象至电脑中。 9. 使用完毕后关掉电源,如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。 10. 登记使用情况。 Nikon 80i主要技术参数:放大倍数40-1000,CFI60无限远光学系统,内置滤色镜,数字成像头。明场、暗场、简单偏光、荧光/明场、荧光/暗场。波长:330-380,450-490,510-560。主电压90~250V。频率:50~60HZ。功率消耗:最大160W。周围环境温度:10~36℃。相对湿度:0~80%。污染级别:2。 应用范围:正置明场、相差及荧光,主要用于细胞及细菌等的观察及荧光摄影。

显微镜成像系统操作指南

显微镜成像系统操作指南 1开机遵循先开硬件再开软件原则。依次开启CBH显微镜电动部件控制器、液晶屏操作器、LED光源、CCD成像系统(MYO和HQ2)。 2等待显微镜电动部件以及LED光源自检完毕后点击桌面“MetaMorph”图标打开软件。 3点击软件左上角“Illum”图标,选择实验需要的观察方式(荧光或者DIC)。4从屏幕右侧的快捷菜单点击“Eyepiece MYO”或者“Camera”选择光路。5点击快捷菜单中“HQ2”或者“MYO”选择相机。 6点击“Illum”图标右边光圈标志,打开所设观察方式的光闸,获取光源,并通过显微镜电动控制部件相应按钮调节至合适光强。 7更换观察方式之前,先点击“Illum”图标右边光圈标志关闭光源,再从“Illum” 下拉菜单中选择需要的观察方式,重复步骤4。 8点击软件“Acquire”打开下拉菜单,点击“Acquire”打开拍照界面。 9点击“Show Live”打开相机显示界面。 10选择合适的物镜后调节显微镜调焦旋钮聚焦后,先通过自动曝光选最合适的曝光时间,然后通过调节光强或曝光时间以获得最佳成像效果。 11点击“Acquire”拍摄图像并保存成适当格式。 12关机遵循先关软件再关硬件原则。关闭“MetaMorph”软件后依次关闭各硬件。 13图片处理: (1)打开MetaMorph-file中的open选中需要处理的照片并打开,选择Overlay Images,在出现的窗口中选择所需模块,点击NONE选择对应颜色的图片,点击apply,即可得到merge后的图片。 将merge图片放大至100%,选择file-save as,命名并保存。 选择Edit-duplicate---as displayed,然后关闭图片,按照提示进行保存。 (2)如若不需要merge,则将图片放大至100%,选择Edit-duplicate---as displayed,然后关闭图片,按照提示进行保存,此时保存的图片可以直接看到,(若此时选择save as,打开的图片则必须在MetaMorph才能看到)。 Notice:桌面上的offline图标为离线图片处理软件,若只需图片处理,只开电脑,不开硬件,双击此图标即可应用。

显微镜简易使用手册.

显微镜使用说明 1,显微镜开关时卤素灯电压一般应调至最低。 2,转换物镜时,应旋转物镜架,不要用手直接转物镜。 3,荧光光源汞灯由于使用寿命短,为保证尽可能的延长使用时间和安全,汞灯电源开/关间隔时间必须大于三十分钟。 4,显微镜的各光学部件应调节到位(如,DIC 插件,荧光滤片,物镜等),以免影响显微镜的正常工作。如果不到位,那么观察时 通常会看到月牙形阴影. 5,使用油镜时应使用专业用油,不要用其它介质(如香柏油),以免损伤镜头。每次使用完油镜后,需将油镜擦拭干净(物镜及 玻片)。(正置显微镜,油滴在样品上。倒置显微镜,油直接滴 在物镜上。) 6,不要用手直接触摸光学部件的表面(如物镜,荧光模块,目镜等),以免留下手指印在上面,影响观察效果。 7,在拆卸全自动显微镜的聚光镜,荧光滤片盒(倒置显微镜)等部件时,应在断电的情况下进行操作。 8,因为各款显微镜的有效工作距离/特性等各有不同,使用前应充分了解所用仪器的特性及观测范围,以免因不恰当的操作,对 显微镜及其配件造成损害。 提示:1,观测样品时(特别是金相样品),切不可将物镜撞及样品,以免将物镜镜头压碎。 2,移动显微镜时,应做到小心轻放,以免因震动而对光学部件及光路造成损害,影响显微镜的使用。(建议移动显微镜时,先将各光学部件拆 除,移位后,再重新安装。) 二一般观察方式的调节 为了观察和拍摄好图像,需要对显微镜和CCD以及CCD软件都要求进行调节。 在进行显微观察和摄影前,首先要做的就是对显微镜进行调节。调节项目包括柯勒照明、相差环调节、荧光中心调节等。其中后两项一般在安装是已经调节好,以后一般情况下就不需要再调节了。 柯勒照明调节方法如下:

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用-17954讲解

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 Tina(2007-10-23 09:40:17 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM采用点光源照射样本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜搜集,并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面,避免了非焦平面上杂散光线的干扰,克服了普通显微镜图像模糊的缺点,因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图

二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统,激光光源,扫描装置和检测系统构成,整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地进行。显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式,前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 一)细胞的三维重建

普通荧光显微镜分辨率低,显示的图像结构为多层面的图像叠加,结构不够清晰。LSCM 能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描,得到一组光学切片,经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法,可作单色或双色图像处理,组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态,也可从不同的断面观察细胞内部结构,测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法,可以产生在不同照明角度形成的阴影效果,突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM 的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。 二)静态结构检测:原位鉴定细胞或组织内生物大分子、观察细胞及亚细胞形态结构 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡

荧光显微镜操作手册簿

荧光显微镜操作手册 Olympus BX51 物镜: 4 ×0.16 (无DIC) 10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil 荧光滤色块转盘: 1. WU 蓝 2. WIB 绿(长通) 3. WIBA 绿(带通) 4. WIG 红 5. CFP 青 6. YFP 黄 操作步骤:(注意:样品须在低倍镜下放置和取下) DIC观察:

1.打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关) 2.将样品置于载物台上,用样品夹夹好 3.将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC棱镜应 与相应的物镜倍数相匹配 4.先选用低倍物镜(“10×”) 5.调节透射光的强度,调节焦距,找到视野 6.换到高倍镜头,观察样品 7.DIC观察时,光路选择拉杆拉到中间位置,既可观察,也可拍照 荧光观察: 1.打开明场电源开关 2.打开汞灯电源开关 3.将样品置于载物台上,用样品夹夹好 4.检偏器、DIC棱镜在光路外 5.将荧光光路shutter打开(“○”为开,“●”为关),需保护样品时关闭shutter 6.光路选择拉杆推至最里边 7.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置 8.通过两组减光滤片调节激发光强度 9.从低倍镜开始观察,调焦,找到预观察视野, 10.依次换到高倍镜头,观察样品 11.拍照时光路选择拉杆完全拉出 普通明场观察: 1.打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关) 2.将样品置于载物台上,用样品夹夹好 3.起偏器、检偏器、DIC棱镜在光路外,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC棱镜拨到 明场(BF)位置 4.先选用低倍物镜(“4×”) 5.调节透射光的强度,调节焦距,找到视野 6.依次换到高倍镜头,观察样品 7.光路选择拉杆拉到中间位置既可观察,也可拍照 关机: 1.关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次 开启) 2.将透射光调到最小,关闭明场电源开关 3.将镜头转到低倍镜,取出样品,若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头 4.确认数据已经保存,关闭软件 5.使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据) 6.关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况

激光共聚焦显微镜技术1讲解

激光共聚焦显微镜技术 The techniques and applications of Confocal Laser Scanning Microscopy 激光共聚焦显微镜(LSCM)的发展简史 1957年,Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜技术的某些基本原理,获得了美国的专利。1978年,阿姆斯特丹大学的G.J.Brakenhoff首次展示了改善了分辨率的共焦显微镜。 1985年,Wijnaendtsvan Resandt推出了第一台对荧光标记的材料进行光切的共焦显微镜 激光共聚焦显微镜(LSCM)的发展简史 ?80年代末,各家公司都推出了商品化的共焦显微镜,英国的Bio-Rad公司的MRC系列,德国Leica公司的TCS系列,Zeiss公司的LSM系列等。 ?近二十年来,从滤片型到光谱型,人们对共焦高分辨率,采集图像快速,技术的改进及应用开发不断进行,出现了很多新的技术。如双光子,FCS,FLIM ,STED等。 共焦显微镜的优点 人眼分辨率:0.2mm 光学显微镜分辨率:0.25μm 电子显微镜分辨率:0.2nm 共焦显微镜分辨率:μm 共焦显微镜的优点 ?电子显微镜的缺陷: 1.只能观察固定样品 2.样品制备过程(固定、包埋、切片)造成的假象 ?荧光显微镜的缺陷: 1.可以观察活细胞或组织,但细胞或组织内结构高度重叠。 2.荧光具有强散射性,造成图像实际清晰度的大大下降。 3.荧光漂白很快,使荧光图像的拍照有困难。 4.如果荧光滤片选配不当,多荧光标记样品图像的采集很困难,且很难抑制光谱交叉。 共焦显微镜的优点 ?共焦显微镜与传统显微镜的区别 1.抑制图像的模糊,获得清晰的图像 激光扫描共焦显微镜技术 ?共焦显微镜与传统显微镜的区别

激光共聚焦显微镜

激光共聚焦显微镜 1.激光器: 1.1系统激光器覆盖可见光及紫外光: 1.1.1蓝光固体激光器488nm20mW; 1.1.2绿光固体激光器552nm20mW; 1.1.3红光固体激光器638nm,20mW 1.1.4紫外固体激光器405nm50mW; 1.2激光器的开闭和电压调节完全由软件控制,无需另设单根激光器的开关。并具有激光寿命保护装置。 1.3具有激光强度回馈稳定电路设计,在动态记录中激光强度不会受环境的影响而改变。 2.共聚焦扫描系统: 2.1激光扫描系统直接与共聚焦机身连接 2.2检测器数量 ①三个荧光扫描检测器+一个透射光DIC(明场/相差/微分干涉)扫描检测器; ②扫描检测器包括2个光电倍增管(PMT)和一个磷砷化镓混合型检测器HyD。*③可以升级为五个以上独立连续光谱荧光检测器。 2.3连续分光设计系统(或其它光谱分离系统) *①三个通道,一个透射光DIC通道;二个荧光通道均为可做连续全光谱检测的荧光通道; ②光谱型荧光通道可自由更换荧光通道检测的波长范围,二个荧光通道和一个透射光DIC通道可同时进行快速扫描; ③多通道荧光图像即时叠加、荧光图像与透射光DIC图像即时叠加,精确对光谱进行分析; ④荧光通道具有高精度的共聚焦针孔,具有宽波谱范围内的色差校正功能,保证在多重荧光标记的同时检测过程中每个通道扫描光切平面和厚度的一致性和荧光精确定位。 2.4光谱扫描功能 ①高速多通道光谱分析和扫描,可获得透射光谱图像; ②光谱分辨率2nm,可连续以1nm波长调节; ③光谱扫描范围:400-800nm;光谱扫描步进:1nm; ④高速棱镜分光,线性光谱拆分,可区分光谱大量重叠的染料; ⑤光谱数据来源:用户指定/用户自建/厂家预设(可调节)。 2.5扫描速度及速度调节 *①扫描视野22mm下扫描速度7幅/秒(512×512pixels);70幅/秒(512×16pixels); ②双向扫描速度3600线/秒;扫描速度可精确调节。 2.6共聚焦针孔1个,全自动调节型,孔径50-300微米,调节步进0.5微米。

德国Zeiss激光扫描共聚焦显微镜快速操作手册

德国Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 快速操作手册 制作制作::Zeiss 光学仪器光学仪器((上海上海))国际贸易有限公司 孙 凯 2009年6月

目录目录:: 1 系统的组成 系统组成及光路示意图 实物照片实物照片说明说明 2 系统的使用 2.1 开机顺序 2.2 软件的软件的快速快速快速使用使用使用说明说明 2.3 显微镜显微镜的的触摸屏控制 2.4 关机顺序 3 系统的维护

1 系统的组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由激光扫描共聚焦显微镜系统主要由::电动荧光显微镜电动荧光显微镜、、扫描检测单元扫描检测单元、、激光器激光器、、电脑工作站及各相关附件组成电脑工作站及各相关附件组成。。 系统系统组成及光路组成及光路组成及光路示意图示意图示意图:: 电脑工作站 激光器 扫描检测单元 电动荧光显微镜

实物照片说明实物照片说明:: 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO 2培养系统控制器 激光器 电脑工作站

2 系统的使用 2.1 开机顺序 (1)打开稳压电源打开稳压电源((绿色按钮绿色按钮)) 等待2分钟(电压稳定)后,再开其它开关 (2)主开关 [ MAIN SWITCH ]“ON ” 电脑系统 [ SYSTEMS/PC ]“ON ” 扫描硬件系统 [ COMPONENTS ]“ON ” (3)打开 [ 电动显微镜开关 ] 打开 [ 荧光灯开关 ] (注:具有5档光强调节旋钮) (4)Ar 离子激光器离子激光器主开关主开关 “ON ” 顺时针旋转钥匙 至 “—” 预热预热等待约等待约15分钟分钟,, 将激光器 [ 扳钮 ] 由“Standby ”扳至 “Laser run ”状态状态,,即可正常使用 (5)打开 [ 电脑开关 ],进入操作系统 注:键盘上也具有 [ 电脑开关 ]

倒置荧光显微镜操作说明

显微镜及数码成像系统操作简要 第一部分观察方法步骤 1、明场观察方法步骤 2、相差观察方法步骤 3、荧光观察方法步骤 第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)

1、明场观察方法步骤 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” 准备工作:柯勒照明光轴中心调节 第一次观察须完成此调试,完成后不需要再调节,直至装卸过部件后,使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。 ① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰 ③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜,使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮,使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑,使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑,使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑

步骤 涉及部件 I ” 载物台、标本夹 3、荧光观察方法步骤 准备工作:高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” CD+或CD-钮

主开关拨到“I ” ND 片插槽 /孔径光阑 准备工作: 高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 调整完成后,请不要触动对中部件,如汞灯对中旋钮,视场光阑对中钮等。 ,待弧 载物台

观察筒 视场光阑中心调节钮 第二部分使用IPP 拍摄图像流程 1. 在桌面点击以下图标打开IPP。 2. 在菜单栏中,(采集)Acquire 菜单下点击(视频/数字图像采集)Video/Digital Capture,或点击工具栏中,即出现控制CCD 拍照的对话框。

2020年生物中考考点复习巩固训练(03) 显微镜的构造与使用

课时训练(三)显微镜的构造与使用 (限时:40分钟) |基础达标| 1.[2018·湘潭]在“观察洋葱鳞片叶内表皮细胞”的实验操作考试中,小明在显微镜视野内只能看清细胞壁和细胞核,看不清液泡。为了能让细胞质与液泡的界面更明显,此时可() A.改用凹面镜反光,放大光圈 B.改用平面镜反光,缩小光圈 C.改用凹面镜反光,缩小光圈 D.改用平面镜反光,放大光圈 2.[2018·娄底]小敏同学在使用显微镜的过程中出现的问题与对应的解决方法,正确的是() A.物像不清晰——调节光圈 B.物像偏右下方——向左下方移动玻片 C.视野较暗——用平面镜反光 D.物像太小——换高倍目镜或高倍物镜 3.[2019·绵阳]在练习使用显微镜的实验课上,某些同学对调节镜筒进行了下列操作,正确的是() A.先转动细准焦螺旋,再转动粗准焦螺旋 B.转动细准焦螺旋时,会使镜筒快速升降 C.逆时针转动粗准焦螺旋,会使镜筒缓缓下降 D.镜筒下降时,要从侧面看物镜和玻片的距离 4.[2019·衢州]在用显微镜观察洋葱表皮细胞时,下列镜头组合中观察到细胞最大的是() A.目镜5×、物镜4× B.目镜10×、物镜4× C.目镜5×、物镜10× D.目镜10×、物镜10× 5.[2019·衡阳]图K3-1是某同学在显微镜下观察到的人体细胞图像,若要把该物像移到视野中央,载玻片应向移动() 图K3-1 A.左下方 B.右下方 C.左上方 D.右上方

6.人类对细胞的认识得益于显微镜的发明。如果在显微镜视野中的图像是“b”,请问玻片上应为() A.q B.b C.p D.d 7.[2018·广东]使用显微镜时,可用图K3-2快速判断“污物”的位置,图中①②分别为() 图K3-2 A.装片、目镜 B.装片、装片 C.目镜、目镜 D.目镜、装片 8.[2019·临沂]图K3-3中甲是不同放大倍数的目镜(5×、16×)和物镜(10×、40×),乙是在甲中选用的一组能放大160倍的镜头组合所观察到的物像。欲将乙视野中的物像移至视野中央并放大到640倍进一步清楚地观察。下列操作中错误的是() 图K3-3 A.将装片向左上方移动,使细胞位于视野正中央 B.目镜不需要换,转动转换器将物镜换成镜头③ C.将显微镜的光圈调小,反光镜调成平面镜 D.物镜换成高倍镜后,如果视野模糊,应调节细准焦螺旋 9.[2019·绵阳]小张在制作人的口腔上皮细胞临时装片时,需要用碘液对细胞染色,为了让碘液浸润标本全部,图K3-4所示操作正确的是() 图K3-4

荧光显微镜 倒置荧光显微镜

致测维产品用户: 感谢您明智地选择了测维-里万光电的产品。 从您开始使用测维产品的那一刻起,测维便与您结下了不解之缘,无论何时,无论何地,您将享受测维切实和认真的服务。 测维更希望把您的要求作为我们的追求,以使测维产品的质量、性能、服务日臻完善。因此,您的任何建议和意见,我们都将予以充分的重视。 测维的信箱是:cwsh@https://www.sodocs.net/doc/62313403.html, 如果您想更多地了解测维的产品,欢迎登陆测维的网站:https://www.sodocs.net/doc/62313403.html,/或拨打我们的全国客服热线:400-711-6930。 手册导读 请您在使用仪器前务必仔细阅读本手册。 特别提示: 在操作前,务必把仪器左侧粗微动内侧的限位圈松开。 用途: LWD300-38LFT型倒置荧光显微镜是由倒置显微镜和落射荧光显微镜组成。倒置显微镜具有在培养瓶或培养皿内进行显微观察的特点;落射荧光显微适用于荧光显微术。仪器配有长工作距离平场消色差物镜、大视野目镜、双目观察,还配有特长或长工作距离聚光镜、同时配有相衬装置及相衬物镜,可以观察不经染色的透明活体;落射荧光显微镜采用落射光激发,荧光图象清晰。该仪器特别适用于对活体细胞和组织、流质、沉淀物等进行显微研究,是生物学,细胞学,肿瘤学,遗传学,免疫学等研究工作的理想仪器。可供科研、高校、医疗、防疫和农牧等部门使用一、规格1.目镜 2.物镜

3.总放大倍数 4.聚光镜:特长工作距离聚光镜(带相衬装置):工作距离75mm; 5.大台面载物台:移动范围: 75mm×50mm; 6.带限位和调节松紧装置的同轴粗微动调焦系统;微动手轮格值为: 0.002mm; 7.瞳距调节范围:53mm~75mm; 8.照明系统: A.透射照明光源12V30W卤素灯(亮度可调); B.落射荧光光源100W超高压直流汞灯; 9. 电源电压:110V(60Hz)或230V(50Hz) 10.激发滤色片组: 紫外光(UV):激发光谱区域:330-400nm;可见荧光起始光谱:425nm. 紫光(V):激发光谱区域:395-415nm;可见荧光起始光谱:455nm. 蓝光(B):激发光谱区域:420-485nm;可见荧光起始光谱:515nm. 绿光(G):激发光谱区域:460-550nm;可见荧光起始光谱:590nm. 11.防霉。

显微镜的使用方法与步骤

显微镜的使用方法与步骤 实验目的 1练习使用显微镜,学会规范的操作方法。 2能够独立操作显微镜 3能够将标本移到视野的中央。并看到清晰的图像 一、取镜和安放 1.右手握住镜臂,左手托住镜座。 2.把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘7厘米左右处)。安装好目镜和物镜。 二、对光 3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。 4.把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后同时画图)。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜,可以看到白亮的视野。 三、观察 5.把所要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。 6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。 7.左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。 四、整理 1实验完毕,用纱布把显微镜的外表擦拭干净。 2转动转换器,把两个物镜偏到两旁,并将镜筒缓缓下降到最低处,反光镜竖直放置。 3最后把显微镜放进镜箱里,送回原处。 《注意事项》: 1、严忌单手提取显微镜。 2、若须移动显微镜,务必将显微镜提起再放至适当位置,严忌推动显微镜,使用显微镜请务必小心轻放。 3、使用显微镜时坐椅的高度应适当,观察时更应习惯两眼同时观察,且光圈及光源亮度皆应适当,否则长时间观察时极易感觉疲劳。 4、转动旋转盘时务必将载物台降至最低点,以免因操作不当而刮伤接目镜之镜头。 5、标本染色或其它任何操作皆应将玻片取下,操作完成后再放回载物台观察,切勿在载物台上操作,以免染剂或其它液体流入显微镜内部或伤及镜头。 6、用毕显微镜应将载物台下降至最低点,并将低倍镜对准载物台中央圆孔处,收入存放柜中。

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