最新细胞工程习题(答案)(1)教学内容
细胞培养技术习题（含答案）
第一章动物细胞培养概述
一、名词解释
细胞培养：是指将动物活体体内取出的组织用机械或消化的方法分散成单细胞悬浮液，然后放在类似于体内生存环境中，进行孵育培养，使其生存、生长并维持其结构与功
能的方法。
组织培养：从生物体内取出活的组织在体外进行培养的方法。
器官培养：将活体内的器官（一般是胚胎器官）、器官的一部分或器官原基取出，在体外培养的方法。
二、填空题
1.体外培养（或组织培养）主要包括_细胞培养_，_组织培养_，和_器官培养_ 三种类型。
2._Harrison_的实验开创了动物组织和细胞培养的先河，他建立了_盖玻片悬滴_培养法
3.在卡氏瓶原理的启发下，出现了用试管培养，继而又出现了多种类型的_培养瓶、_培养
皿和_多孔培养板_的培养。从20世纪40年代开始，大多数培养工作都过渡到用_瓶子_培养
4.在动物细胞培养方法的发展过程中，具有历史意义的培养方法有盖玻片悬滴培养法，_
旋转管培养的方法_，_灌注小室培养法_，和目前普遍应用的单层细胞培养法
5.早期细胞培养采用_天然_培养基，现在广泛采用添加___血清_____的_人工合成培养基，
近二十年来，动物细胞培养朝着无血清_培养基的方向发展。
三问答题
1、动物细胞培养技术现已应用到那些领域？请举例说明。
动物细胞培养技术几乎已应用到生物、医学研究的各个领域。这门技术自创立至今，已在多个学科领域乃至生产实践中均发挥了巨大的作用。
一、在生物学领域的基础研究中的应用
离体培养的动物细胞具有培养条件可人为控制且便于观察检测的特点，因而可广泛应用于生物学领域的基础研究中。
1．在细胞生物学上的应用
2．在遗传学上的应用
除了可用培养的动物细胞进行染色体分析外，还可结合细胞融合技术建立细胞遗传学，进行遗传分析和杂交育种。
3．在胚胎学上的应用
通过体外培养卵母细胞，并进行体外受精、技术而应用于家畜的繁殖生产中。
4．在病毒学上的应用胚胎分割和移植己发展成了一种较成熟的
在制备减毒活疫苗和诊断用抗原时，离不开细胞这一病毒增殖的场所。另外，在病毒学研究中，用培养的动物细胞代替试验动物做斑点分析．
5.在药理学领域的应用
二、在临床医学上的应用
1．用于遗传疾病和先天畸型的产前诊断
目前，人们已经能够用羊膜穿刺技术获得脱落于羊水中的胎儿细胞，经培养后进行染色体分析或甲胎蛋白检测即可诊断出胎儿是否患有遗传性疾病或先天畸型。
2．用于癌症的早期诊断和预防
我国的科学工作者通过培养淋巴细胞，病人，以便进行及早的预防和治疗。
3．用于临床治疗并对其染色体进行对比分析检测出易患癌症的
4．用于药物效应的检测
检测治疗肝病的药物可选用肝细胞、检测抗癌药物可选用癌细胞。
三、在动物育种上的应用
四、在生物制品生产上的应用
2、动物细胞培养有哪些要求和那些方法？
动物细胞培养工作的基本要求：
1.培养前准备
2．操作间消毒
3．洗手和着装
4．火焰消毒
5．实验中的操作要求
动物细胞培养工作的工作方法：
细胞培养是一种操作程序比较复杂、需求条件多而严格的实验性工作，工作时必须注意一定的方法，主要有以下几点予以重视。
①将所有操作程序如洗刷、配液、消毒等，制定出统一的规范和要求，并在一定时间内保持相对稳定和要求人人遵守。
③各种用液(培养液、胰蛋白酶、Hanks液、NaHCO2、抗生素液)均应由专人负责配制，并保证做到制备浓度精确、灭菌可靠。所有制备好的溶液和试剂瓶上都要有标签，注上名称、浓度、消毒与否和制备日期。
③一切培养用品都要有固定的存放地点，其中尤为重要的是，培养用品与非培养用品应严格分开，已消毒与末消毒品应严格分开存放。
以上一切措施都是为了避免各种杂质混入细胞生存环境、防止微生物感染和细胞“污染”。所谓细胞污染，是指不同细胞之间因操作不当造成的相互混杂，使细胞群体不纯的现象。近年来世界上不少实验室都出现过这种事故，应引起注意。
第二章动物细胞培养的基本知识
一、名词解释
贴壁依赖性细胞：细胞必须贴附于支持物表面才能生长，因此又称为贴壁型细胞。
非贴壁依赖性细胞：细胞在体外生长时不需要贴附于支持物表面，可以悬浮状态在培养液中生长，这种细胞又称为悬浮型细胞。
接触抑制：是指体外培养的细胞在贴附底物上连接成片、相互接触后失去运动的现象，这是某些贴附生长型细胞的特征之一。
无限细胞系：由于某种因素的影响，细胞可能发生自发转化，即细胞获得持久性增殖能力，这样的细胞群体称为连续细胞系。
脱分化：指的是细胞在体外不可逆地失去它们原有的特性。
二、填空
1. 体外培养的动物细胞其生长方式主要贴壁生长和悬浮生长两种，分别称为贴壁型细胞和悬浮型细胞。体外培养的动物细胞其生长方式以贴附生长为主。
2. 贴壁生长的体外培养动物细胞，按形态来分，大体分为成纤维细胞型、
上皮细胞型、游走细胞型、多形细胞型四种类型，最常见的为前两种。
3. 细胞在体外生长时具有一些特点，其中主要是贴附生长、接触抑制和密度依赖性。
4. 培养细胞生命期可分为原代培养期、传代培养期、衰退期三个阶段。
三、问答题
1. 什么是培养细胞的一代生存期？培养细胞的一代生存期可分为哪几个阶段？各有何特点？
答：a，细胞的一代生存期指从细胞接种到下一次再传代接种的一段时间。
b，培养细胞的一代生存期分为潜伏期、指数生长期、停滞期三个阶段。
C，潜伏期：又分为悬浮期，细胞质回缩，胞体呈球形；贴壁期，细胞开始附着或贴附于底物表面上，并逐渐伸展；潜伏期，细胞可有运动活动，基本无增殖，少见分裂相。
指数生长期：是细胞一代中活动最好的时期，培养物中的细胞数量呈指数生长，在接种适宜的情况下，指数生长期持续一段时间后，随细胞数量不断增多，生长空间渐趋减少，最后细胞相互接触汇合成片。
停滞期：细胞数量达到饱和密度，细胞停止增殖，但仍有细胞代谢活动，接着培养液中营养渐趋耗尽，代谢产物积累，PH降低。
2. 培养细胞需要哪些营养？它需要在什么样的环境下生长？这些环境如何获得？
答：A.营养需要：氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素、促生长因子及一些生长必须的钾、钠、铁等元素。
B.生存环境：培养用水充足，培养温度及PH适宜，气体条件及渗透压适宜，还有无毒
无菌无污染的培养环境。
C.环境的获得：
3. 培养细胞需要哪些主要仪器？在使用时需要注意什么？
第三章动物细胞培养的准备工作
一、填空题
1、玻璃器皿的清洗程序主要包括＿浸泡＿、刷洗、＿浸酸、和＿＿冲洗。
2、目前大多数实验室采用的浸酸酸液的主要成分是＿浓硫酸＿＿和重鉻酸钾＿＿。
3、细胞培养用品的包装主要包括＿局部包装＿＿和＿＿＿全包装＿＿两种类型，如前者适宜的器皿有＿烧杯＿＿、＿容量瓶＿＿等，后者适宜的器皿有＿＿注射器、＿胶塞＿＿等。细胞培养中塑料制品中主要采用＿射线消毒＿方法进行灭菌，人工合成培养基和酶液采用＿＿＿过滤消毒＿＿＿方式进行灭菌。
细胞培养实验前实验者的皮肤主要用＿＿75%的酒精＿或＿＿新洁尔灭＿＿＿来消毒灭菌，实验室地面采用＿来苏儿＿＿定期拖洗消毒，培养室空气可以用紫外线＿或＿乳酸蒸汽＿＿消毒。
BSS中文名称为＿＿平衡盐溶液＿，具有维持渗透压、稳定PH等作用，常用作洗涤组织和细胞以及配置各种培养用液的基础溶液。
动物细胞培养基中常用的消化液有＿胰蛋白酶消化液＿、＿胶原酶消化液和＿EDTA—2Na ＿三种，常在＿贴附型细胞原代＿培养或＿传代培养中用来离散细胞。
要想取得好的细胞培养效果，在合成培养基中添加＿天然培养基＿＿构成完全培养基是非常必要的，通常它的灭活处理方法是＿热灭活＿＿。
二、简答题
1、塑料制品的清洗步骤是什么？
答：塑料器皿耐腐蚀能力强，但质地软，大多不耐热。塑料器皿的清洗意识要防止划痕，二是用后要立刻浸入清水中，严防附着物干结。如果残留有附着物，可先用脱脂棉轻轻擦掉，再用流水冲洗干净，接着用2%的NaOH液浸泡过夜，取出后用自来水冲洗8-10次，然后用3% -5%盐酸溶液浸泡15-30分钟，取出后用自来水冲洗多次，在在双蒸水漂洗5-6次，倒净器皿内的双蒸水，置37度恒温箱内晾干即可。
2、用高压蒸汽灭菌锅进行湿热灭菌时应注意什么？
答；湿热灭菌时，消毒品不能装得过满，以保证消毒器内气体的流通，在加热升压之前先要打开排气阀门，排除残留在容器内的冷空气，导气管一定要沿着灭菌锅内胆上的升制的通气孔道到达灌的底部并且不能堵塞。冷空气排尽后，关闭排气阀门；继而开始升压，当达到所需要的压力时，通过调节高压蒸气锅的电源开关，是压力稳定在所需数值后并开始计算时间。在消毒过程中，消毒者不能离开，要经常检查压力是否恒定，如有偏离，应及时调整。
3、谷氨酸胺在培养基中的主要作用是什么？配液时应该注意哪些问题？
答：
1）谷氨酰胺的作用：在细胞的代谢工程中发挥重要作用，是细胞合成核酸和蛋白质的必需的氨基酸；缺少谷氨酰胺时，细胞会因为生长不良而死亡。
培养液在4°C冰箱中储存2周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。一般来说，谷氨酰胺溶液都是单独配制的，以便在需要时加入培养液内。常把其配制成100倍的浓缩母液，浓度为200mmol/L（29.22g/L）。使用时，在每100ml培养液中加入0.5—2ml谷氨酰胺母液，使其终浓度为1—4mg/L即可。
4、人工培养基常用的有哪些（列举1~2种）？采用人工培养基有什么优点？
答：
1）人工培养基常用培养基：
主要有有MEM培养液，DMEM培养液，RPMI—1640培养液，HamF12培养液等等。
2）采用人工培养基优点：因为合成培养基是根据动物体内细胞生长所需成分人工模拟合成的、配方恒定的一种较理想的培养基，其主要成分是氨基酸，维生素，碳水化合物，盐离子和一些其他辅助物质，培养基成分固定，有利于控制实验条件的标准化，合成培养基的应用促进了培养细胞的发展，合成培养基可以用于特殊研究的细胞培养工作，杂交瘤技术细胞培养，肿瘤细胞培养，单细胞培养等等方面。2）配液时应该注意的问题：谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20°C冰箱中保存，在使用前加入培养液中。因为谷氨酰胺在4°C下放置7d就会分解50%，所以已含谷氨酰胺的
5、胎牛血清在细胞培养中起什么作用？如何从外观大致判断血清质量的好坏？
胎牛血清在细胞培养中对许多细胞系均有促生长作用，主要用于细胞株的保藏以及特殊娇贵细胞株的体外培养。
质量好的血清应该是透明清亮的土黄色或棕黄色，无沉淀或是极少量沉淀，比较粘稠。如发现血清浑浊、不透明、含有许多沉淀物，说明血清污染或是血清中的蛋白质变性；若血清呈棕红色，说明血清中的血红蛋白含量太高，取材时有溶血现象；如果摇晃时感觉液体稀薄，说明血清中渗入的生理盐水太多。
6、完全培养基中各成分在细胞培养过程中的作用分别是什么？
答：在基础培养基中添加血清、抗生素等物质后成为完全培养基，也叫（血清）细胞培养基。完全培养基根据添加血清量的多少，可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基两种。
完全培养基中的成分包括氨基酸，碳水化合物，维生素，无机盐类，促生长因子，辅酶，核酸，嘌呤，嘧啶，激素等等，除此之外，还需加入牛血清。各成分作用列举如下：
1）氨基酸：细胞合成蛋白质的原料，保证细胞正常的生理代谢过程；
2）碳水化合物：细胞生长主要的能量来源，有些糖类是合成氨基酸，脂肪，核酸的原料；3）维生素：细胞生长必不可少的有机化合物，帮助细胞维持渗透压平衡和调节细胞膜功能，有些无机盐是维生素，激素，酶形成中的原料；
4）促生长因子：对于维持细胞功能，保持细胞的状态具有十分重要的作用；促进细胞增殖；5）牛血清：血清含有各种氨基酸，维生素，无机物，脂类物质，核酸衍生物都是细胞生长所需的基本营养物质；也提供激素，基础培养基中少有的营养成分，低分子营养物等；提供结合蛋白，识别维生素，脂类，金属离子，调变物质能力；与有毒金属和热源物质结合，起解毒作用；是细胞贴壁，铺展所需因子的来源，
第四章动物细胞培养的基本技术和方法
一、名词解释
原代培养
原代培养也叫初代培养，是从供体进行细胞分离之后至第一次传代之前的细胞培养阶段。
组织块培养法
组织块培养是将组织剪切成小块后，接种于培养瓶进行培养。组织块培养法是常用的，简便易行的以及成功率较高的原代培养方法。
消化培养法
消化培养法是采用组织消化分散法将细胞间质包括基质、纤维等妨碍细胞生长的物质去除，使细胞分散，形成悬液，从而易于外界吸收养分和排出代谢产物.
细胞生长曲线
细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。以培养时间为横轴，细胞浓度为纵轴作图，即得生长曲线。
传代
细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶的过程称之为传代。
二、填空
1、组织块的分离方法有机械分散法、剪切分离法、消化分离法。
2、目前，较常用的消化试剂有胰蛋白酶、胶原酶、EDTA消化液。
3、接种培养瓶的细胞数量一般为5×105-1×106/ml 。
4、培养细胞的污染一般包括微生物污染、细胞交叉污染、化学物质的污染。
5、细胞冻存时DMSO常用的浓度为10%的浓度。
三、判断（正确画“√”，错误画“X“）
1、一般来说，成熟个体较胚胎容易培养，正常组织较肿胀净组织容易培养。（X）
2、分离液体性原代细胞悬液时，可采用长时间高速离心。（X）
3、消化过程中使用的液体应不含Ca2+和Mg2+。（√）
4、培养液变黄、常温，一般是由细菌污染引起。（√）
5、消化传代法一般用于悬浮细胞的传代。（X）
6、细胞冻存和复苏的方式应采用快冻慢融法。（X）
四、问答题
1、原代取材培养时有哪些基本要求？P59
答：（1）无菌取材（2）取材器械要锋利（3）及时培养（4）剔除与培养细胞无关的成分（5）营养要丰富（6）采用易培养的组织进行培养（7）注意保存原代培养组织的相关材料及信息。
2、如何分离原代组织材料？P61
答：1.细胞悬液的分离方法：对于细胞悬液，可采用低速离心法分离。一般用500~1000r/min 离心5~10min。
2.组织块的分离方法：（1）机械分散法在对一些纤维成分很少的组织，如脑组织‘部分胚胎组织以及一些肿瘤组织等进行培养时，可以直接用机械方法进行分散。现在较为常用的是用注射器针芯挤压组织块通过不锈钢筛网的方法。
（2）剪切分离法：在进行组织块移植培养时，可以采用剪切法，即将组织剪或切成1mm3左右的小块后分离培养。（3）消化分离法：消化法是结合生化和化学手段把已剪切成糊状的组织进一步的方法。常用的消化方法有：胰蛋白酶消化法和胶原酶消化法。
3、细胞的常规检查包括哪些内容？P65
答：细胞的常规检查包括：（1）培养液重点观察培养液的颜色和透明度的变化。（2）细胞生长情况：用倒置显微镜观察。（3）细胞形态变化：对生长状态不良的细胞首先要查明原因，采取相应措施进行处理，如换液、排除污染、废弃等。（4）微生物污染：主要包括细菌、霉菌、酵母菌、支原体等的污染。
4、你如何认定培养细胞被微生物污染了？怎样排除微生物对培养细胞的污染？
微生物污染主要包括细菌、霉菌、酵母菌、支原体等的污染。细菌、霉菌、酵母菌污染最典型的表现为培养液浑浊，液体内漂浮菌丝或细菌。支原体污染时则不同，对于传代稳定、生长规律的细胞系，往往表现为培养条件没有改变而细胞生长却明显变缓、胞质内颗粒增多、有中毒表现，但培养液多不发生浑浊，即可考虑为支原体污染。细菌和霉菌的污染多发生在传代、换液和加药等操作之后，霉菌和细菌繁殖迅速，能在很短时间内抑制细胞生长或产生有毒物质导致细胞死亡。
真菌污染及排除: 污染培养细胞的真菌种类很多，常见的有烟曲霉、黑曲霉等，霉菌污染一般肉眼可见，交易被发现，短期内培养液多不浑浊，在培养液中形成白色或浅黄色漂浮物。瓶外的污染物需及时用酒精棉球擦洗清涂，以防其通过瓶口传入瓶内；如被污染可考虑采用制霉菌素25ug/ml或酮康唑10ug/ml对细胞进行处理。细菌污染及排除：常见的污染菌有大肠杆菌、白色葡萄球菌等。抗生素对预防和杀灭细菌有一定效果。抗生素联合使用比单独使用效果好，预防性应用比污染后使用效果好。如已发生细菌污染，在使用抗生素，常难以根除。有价值的细胞被污染后，可使用5~10倍常用抗生素剂量的冲击方法，加药作用24~28h，在换入常规培养液中，有时可排除污染。支原体污染的排除：a抗生素处理，如使用四环素类、大环内酯类、泰乐菌素及一些氟喹诺酮等；b高热处理，将受污染的细胞置41℃作用5~10h，最长达18h，可以破坏支原体。;c巨噬细胞和抗生素联合处理；d鼠的传代处理；e 血清处理。
5、如何进行培养细胞的运输？P74
应根据运输时间长短或距离远近来进行不同的细胞装运。
1.长距离运输（几天）
①选择生长良好的单层细胞，去掉陈旧培养液，补充新培养液至瓶颈部，保留微量空气，拧紧瓶盖。这样可避免由于液体晃动导致的细胞损伤。
②瓶口用胶带缠紧密封，并用棉花包裹（做防震防压处理）。
③到达目的地后，吸出多余的培养液（此液可继续使用），保留细胞生长所需液量，常规培养数小时或过夜，次日传代。
2.短距离运输（几小时）
去掉大部分生长液，仅留少量液体覆盖单层细胞，防止细胞干燥，细胞面朝上。
3.细胞悬液空运
①将浓度为6×105 个/ml的细胞悬液于0―4℃放置24h.
②将细胞悬液混匀后，200r/min离心30min，弃去含酶的上清液，加4℃新鲜培养液，是细胞终浓度为2.4×106个/ml。
③将细胞装于4℃的冰盒内空运，到达目的地后以200r/min离心30min，弃去上清液，加新鲜培养液，调节细胞数为6×105个/ml，然后接种于培养瓶。
4.液氮咚存运输
利用1L液氮罐或大号暖瓶装液氮，将冻存细胞管移入液氮中，这样可将细胞转送到其他场所。
第五章动物细胞的大规模培养
一、名词解释
动物细胞大规模培养技术：是指在人式条件（除满足培养过程必需的营养要求外，还要进行pH和溶解氧的最佳控制）下，在细胞生物工程反应器中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。
微载体：是指直径在60~250μm，能适用于巾壁细胞生长的微珠，一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。
微载体细胞培养：是在培养液内加入培养液及对细胞无害的颗粒—微载体，作为载体，使细胞在微载体表面附着并呈单层生长繁殖，通过持续搅动（为避免剪切力对细胞质的影响，搅拌速度一定要慢）使微载体始终保持悬浮状态的培养方法。
微囊化细胞培养方法：是指在无菌条件下将拟培养的细胞、生物活性物质以及生长介质共同包裹在薄的半透膜中形成微囊，再将微囊放入培养系统内进行培养的方法。
中空纤维细胞培养：是模拟细胞在体内生长的三维状态，利用一种人工的“毛细血管”即中空纤维来为培养的细胞提供物质代谢条件而建立的事种大规模培养方法。
二、填空题
1、根据动物细胞的培养特性不同，可采用悬浮培养、贴壁培养和固定化培养等三种培养方
法进行动物细胞大规模培养。
2、在动物细胞大规模培养中，能为细胞提供贴附表面的培养目前主要有旋转瓶、中空纤维、
细胞工厂和微载体等。
3、制备固定化细胞的方法很多，在动物细胞培养中要考虑使用较温和的固定化方法，如吸
附法、包埋法和微囊化法。
4、无论培养何种细胞，就操作方式而言，深层培养可分为分批式、流加式、半连续式、连
续式和灌注式五种发酵工艺。
5、针对动物细胞培养特性开发的搅拌式生物反应器，主要有笼式通气搅拌反应器、双层笼
式通气搅拌反应器等。
6、用气流代替不锈钢叶片进行搅拌，因而产生的剪切力相对温和，对细胞损伤较小的生物
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上海交大细胞工程期末试题2008b
一、选择题（每题1分，共计12分） 1、体外培养in vitro包括那三个层次（ABD）。 A细胞培养B组织培养 C大规模培养D器官培养 2、现在一般皆公认（B）为“组织培养之父”动物细胞培养的奠基人，因为他的实 验表明，为细菌学家早已应用的凹玻片悬滴制备细胞培养技术，不仅可以维持组织上体外生长数周，而且是一种能对生物学知识做出十分重要贡献的研究方法。 A Wilhelm Roux B Ross Granville Harrison C M.T.Burrows D Alexis Carrel E W.H.Lewis 3、培养的哺乳动物细胞一定要防止污染，特别是生物学污染，常见的生物学污染主要 是（ABC）。 A真菌B细菌C支原体 D炭疽菌E放线菌F病毒 4、在每一次传代培养过程中，培养物将首先被蛋白酶消化而被制备成细胞悬液，再用 于种植。种植后的细胞都要经历相似的恢复和生长过程。根据每一次传代培养的细胞生长变化的过程，习惯上把每一代细胞的生长过程分为（ABC）三个阶段。 A潜伏期B指数生长期C停滞期 D衰退期E贴壁黏附期F铺展期 5、“生物导弹”是指（D）。 A单克隆抗体 B杂交瘤细胞 C产生特定抗体的B淋巴细胞 D在单抗上连接抗癌药物
6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（D）。 A容易产生各种变异B具有更强的全能性 C取材十分方便D分裂增殖的能力强 7、对细胞全能性的表述正确的是（D）。 A非离体植物细胞能够表现全能性 B动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性 D花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现 E受精卵发育到囊胚阶段的内细胞团具有完全的细胞全能性 8、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（A）。 A经过免疫的B淋巴细胞 B没经过免疫的T淋巴细胞 C经过免疫的T淋巴细胞 D没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 9、引起大规模细胞培养过程中的细胞凋亡的主要直接因素有哪些？（ABC） A有毒物质或抑制因子产生B营养成分耗尽 C其他物理因素D细胞遗传物质突变 10、大规模细胞培养方法比较多，大致可分为（ABC）。 A悬浮培养 B固定化培养 C载体培养法 D培养瓶培养 E96孔板培养
基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
动物细胞工程试题及详解
动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
2014--2016全国各省市高考真题细胞工程(附答案讲解)
细胞工程 一、选择题 1．下列关于细胞工程的叙述，正确的是() A．植物细胞必须先用胰蛋白酶处理获得原生质体 B．试管婴儿技术包括细胞核移植和胚胎移植两方面 C．经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状 D．用于培养的植物器官属于外植体 答案：D解析：植物细胞必须先用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，A错误；试管婴儿技术包括体外受精和胚胎移植两方面，B错误；经细胞核移植培育出的新个体具有两个亲本的遗传性状(细胞核和细胞质中的遗传物质来自不同亲本)，C错误；外植体是指由活植物体上切取下来用于进行培养的那部分组织或器官，D正确。 2．(2015·江苏苏州质检)下图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养成植株的过程： 四倍体兰花叶片――→ ① 愈伤组织――→ ② 胚状体――→ ③ 植株 下列相关叙述中，正确的是() A．②和③阶段发生减数分裂 B．①阶段需要生长素而③阶段仅需要细胞分裂素 C．①阶段不仅有细胞增殖且细胞分化速度很快 D．此兰花的花药离体培养所得的植株体细胞中有两个染色体组 答案：D解析：图中①是脱分化，②是再分化，③是分化过程。②再分化和③分化过程都是进行的有丝分裂，不是减数分裂，A错误。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，B错误。离体的植物组织或细胞，在培养一段时间以后，会通过分裂形成愈伤组织，细胞没有出现分化，C错误。四倍体兰花的配子中有两个染色体组，花药离体培养所得的植株体细胞中有两个染色体组，D正确。
3．(2013·重庆卷)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是 A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 答案：D解析：①应是效应B淋巴细胞，A项错误；②应使用诱导剂促进细胞的融合，动物细胞常用灭活的病毒，也可以用PEG(聚乙二醇)，B项错误；③是杂交瘤细胞，其既具有浆细胞分泌抗体的功能，又具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点，C项错误。 4．如图为烟草在不同生长素、细胞分裂素浓度下的生长发育状况。据图判断下列分析合理的是()
细胞工程复习题 (2)
《细胞工程》复习题 一、选择题： 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在 这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．②④ B．①③⑤ C．①②③④ D．②③ 3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）
A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指（ C ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （AC ） A．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ D ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
. D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 7.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ） A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 8. 以下不属于生长素的是(D) A IAA B NAA C 2,4- D D 6-BA 9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D) A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体 10.拥有接触抑制的是(B) A原核细胞 B动物细胞 C植物细胞 D真核细胞 11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A) A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋 巴细胞 D G淋巴细胞
大学 细胞工程试题及答案
细胞模拟试题及答案 一、填空(每空一分,共25分) 1.实验室得物理防护就是由隔离得设备、实验室得设计、实验实施等三个方面组成,根据其密 封程度得不同,分为P1、P2、P３、P4四个生物安全等级、典型得P４实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2、细胞系就是原代培养经初步纯化获得得以一种细胞为主得、能在体外长期生存得不均一细 胞群体。 ３.细胞株就是指从一个经过生物学鉴定得细胞系用单细胞分离培养或通过筛选得方法,由单细胞增殖形成得细胞群。 ４。干细胞就是一类具有自我更新与分化潜能得细胞。干细胞得增殖特性为缓慢性与自稳性。 5.培养细胞得生长特点为贴附、接触抑制与密度抑制。 6、植物细胞培养得原理就是基于动物细胞得全能性。 7、植物细胞悬浮培养得方法为分批培养法、连续培养法与半连续培养。 8。植物组织培养中培养材料得消毒过程中,消毒得基本原则就是既要杀死附着其上得微生物又不损伤材料、 9.细胞生长测定得一般方法为:细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10、体外培养得细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞与非贴附型细胞。 1１.人工种子得组分包括胚状体、人工胚乳与人工种皮、 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成就是最关键得一步、 13。花粉单倍体植株得鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14。胚胎工程主要就是对哺乳类动物得胚胎进行某种人为得工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要得成体动物。 １５.人工诱导单倍体形成得方法包括:远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等、二、单项选择题(每题1分,共10分) 1。人参皂甙粉就是人参中重要得药用成分,以前只能从人参中提取产量极低,因而价格昂贵、目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取(B) A.基因工程 B.植物组织培养
高中生物细胞工程试题
阶段质量检测(二) 细胞工程 (时间:45分钟,满分:100分) 一、选择题(每小题3分,共45分) 1.下列生物工程技术中,不属于细胞工程得就是( ) A.通过试管动物大量繁殖优良动物 B.利用含有人胰岛素基因得大肠杆菌生产胰岛素 C.通过体细胞克隆技术培养出克隆羊 D.将某人得肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系 2.下列关于植物体细胞杂交技术得叙述,错误得就是( ) A.获得原生质体得过程需要用到纤维素酶与果胶酶 B.利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株 C.植物体细胞杂交过程就就是原生质体融合得过程 D.可根据细胞中染色体数目与形态得差异来鉴定杂种细胞 3.植物体细胞杂交制备原生质体与动物细胞培养配制一定浓度得细胞悬浮液,所需要得酶依次就是( ) A.淀粉酶与磷脂酶 B.纤维素酶与胰蛋白酶 C.脂肪酶与二肽酶 D.过氧化氢酶与半乳糖苷酶 4.下列有关单克隆抗体制备得叙述,正确得就是( ) A.先利用特定得抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞 B.为避免病毒感染,只能用聚乙二醇、电激等处理来诱导骨髓瘤细胞与已免疫得B淋巴细胞融合 C.体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清与抗生素 D.经过选择培养基初次筛选得杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养 5.(全国高考)关于动物细胞培养与植物组织培养得叙述,错误得就是( ) A.动物细胞培养与植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养与植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒 6.细胞工程中,选择合适得生物材料就是成功得关键。下列选择不合理得就是( ) A.选择高度分化得动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞 B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物得成功率 C.选择一定大小得植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
细胞工程期末试题库
一、名词解释 1.细胞工程：应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究、改造生物遗传特性和生物学特性，获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的科学。 2.动物组织工程：将干细胞与材料科学相结合，将自体或异体的干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上，在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化，最终发育成具有特定形态及功能的工程组织。 3.细胞全能性：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。 4.干细胞：动物体内具有分化潜能，并能自我更新的细胞，分为胚胎干细胞和组织干细胞。 5.全能干细胞：从早期胚胎的内细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系，可以无限增殖，可分化成为多种细胞类型，从而可形成任何组织、器官，具有形成完整个体的潜能。 6.多能干细胞：具有分化成多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定限制。 7.植物细胞培养：指在离体条件下，对植物的单个细胞或小的细胞团进行培养使其增值的技术。 8.植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 9.细胞脱分化：一个已分化的细胞回复到未分化的状态或分生细胞的过程。 10.细胞再分化：指在离体的培养条件下，当细胞脱分化以后形成的无序生长的细胞或愈伤组织重新进入有序生长的过程。只有再分化才能再生个体。 11.体细胞杂交（融合）：指两个离体细胞通过一定的诱导技术使质膜接触而融合在一起，随后导致两个细胞核物质融合的技术。 12.细胞核移植：利用显微操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的核与质重组，形成杂种细胞。 13.接触抑制：当两个细胞由于生长而相互靠近发生接触时，细胞不再移动，在接触区域的细胞膜褶皱样活动停止，这种由细胞接触而抑制细胞运动的现象称为接触抑制。 14.密度抑制：细胞接触汇合成片后，仍能进行增值分裂，但当细胞密度进一步增大，培养液营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，而发生密度抑制，导致细胞分裂停止的现象。 15.抗原：进入动物体内并对机体的免疫系统产生刺激作用的外源物质。 16.抗体：由抗原刺激B淋巴细胞转化为浆细胞后产生的，并能与相应的抗原特异性结合、具有免疫功能的球蛋白。 17.单克隆抗体：通过小鼠B细胞杂交瘤技术制备的高度均一、单一特异性，仅针对抗原上的某一个抗原决定簇产生的抗体。 18.多克隆抗体：用天然的抗原物质免疫动物，刺激多个B细胞克隆所获得的免疫血清，含有多种特异性抗体。 19.二倍体细胞培养法：始终维持培养细胞染色体倍数恒定为二倍体的细胞培养方法。 20.克隆培养法：又叫单细胞分离培养法，把从细胞悬液中获得的单个细胞用于培养，使之分裂增殖而产生一个细胞群的方法。 二、填空 1.广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官培养及细胞离体操作和培养技术。 2.狭义的细胞工程是指细胞融合和细胞培 养技术。
细胞生物学试题整理(含答案)
细胞生物学与细胞工程试题 一：填空题（共40小题，每小题0.5分，共20分） 1：现在生物学“三大基石”是：＿，＿＿。 2：细胞的物质组成中，＿，＿，＿，＿四种。 3：膜脂主要包括：＿，＿，＿三种类型。 4：膜蛋白的分子流动主要有＿扩散和＿扩散两种运动方式。 5：细菌视紫红质蛋白结构的中部有几个能够吸光的＿基因，又称发色基因。6：受体是位于膜上的能够石碑和选择性结合某种配体的＿。 7：信号肽一般位于新合成肽链的＿端，有的可位于中部。 8：次级溶酶体是正在进行或完成消化作用的溶酶体，可分为＿，＿，及＿。 9狭义的细胞骨架（指细胞质骨架）包括＿，＿，＿，＿及＿。 10：高等动物中，根据等电点分为3类：α肌动蛋白分布于＿；β和γ肌动蛋白分布于所有的＿和＿。 11：染色质的化学组成＿，＿，＿，少量＿。 12：随体是指位于染色体末端的球形染色体节段，通过＿与＿相连。 13：弹性蛋白的结构肽链可分为两个区域：富含＿，＿，＿区段。 14：细胞周期可分为G1期，S期，G2期，G2期主要合成＿，＿，＿等。 二：名词解释（每个1分，共20小题） 1：支原体 2：组成型胞吐作用 3：多肽核糖体 4：信号斑 5：溶酶体 6：微管 7：染色单体 8：细胞表面 9：锚定连接 10：信号分子 11：荧光漂白技术
12：离子载体 13：受体 14：细胞凋亡 15：全能性 16：常染色质 17：联会复合体 18组织干细胞 19：分子伴侣 20：E位点 三：选择题（每题一分，共20小题） 1：细胞中含有DNA的细胞器有（） A：线粒体B叶绿体C细胞核D质粒 2：细细胞核主要由（）组成 A：核纤层与核骨架B：核小体C：染色质和核仁 3：在内质网上合成的蛋白质主要有（） A：需要与其他细胞组分严格分开的蛋白B：膜蛋白C：分泌性蛋白 D：需要进行修饰的pro 4:细胞内进行蛋白修饰和分选的细胞器有（） A：线粒体 B：叶绿体 C：内质网 D：高尔基体5微体中含有（） A：氧化酶 B：酸性磷酸酶 C：琥珀酸脱氢酶 D：过氧化氢酶6：各种水解酶之所以能够选择性的进入溶酶体是因为它们具有（）A：M6P标志 B：导肽 C：信号肽 D：特殊氨基序列7：溶酶体的功能有（） A：细胞内消化 B：细胞自溶 C：细胞防御 D：自体吞噬8：线粒体内膜的标志酶是（） A：苹果酸脱氢酶 B：细胞色素 C：氧化酶 D：单胺氧化酶9：染色质由以下成分构成（） A：组蛋白 B：非组蛋白 C：DNA D：少量RNA
植物细胞工程试题及详细解答
植物细胞工程试题及详细解答 1 植物组织培养的过程可以归纳为：①脱分化②再分化③→④，对 ）D 此叙述有错误的是（A．②→③的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂 B．植物组织培养依据的原理是细胞的全能性 C．③→④过程指植物的营养生长和生殖生长阶段 D．将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮可获得人工种子E．从理论上讲①可以是植物体的每一个细胞 F．①→③的培养过程中，应在培养基中加入水，无机盐，蔗糖，氨基酸，植物激素等 解析：A、愈伤组织再分化形成胚状体，细胞增殖的方式为有丝分裂，A正确； B、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，B正确； C、植物的个体发育包括营养生长和生殖生长，C正确； D、只有将离体植物细胞或组织培养成具有生根发芽能力的胚状体结构③，包裹上人造种皮可获得人工种子，D错误．E.从理论上讲正确，但一般选择分化程度低全能性大的细胞。 ）D将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（2A. 具有完整细胞核的细胞
B. 一定的营养物质和植物激素 12 / 1 C. 离体状态 D. 导入特定基因 解析：植物细胞具有全能性的原因是每个细胞体细胞中都含有本物种体细胞的全套遗传物质。故A真确。在进行组织培养时需要立体的组织或细胞（具有完整的细胞核），若不离体只能选择性表达为不同的组织器官。故C正确。培养时还需要一定的遗传物质和植物激素（细胞分裂素生长素）B正确。而导入特定的基因是基因工程中的。）在下列各育种方式中，与组织培养技术无关的是（B3A．利用花药离体培养得到单倍体植株 B．秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株 C．通过组织培养培育人工种子 D．通过体细胞杂交培养“番茄一马铃薯”杂种植株 解析：花药离体培养时将花粉培育为新个体。A正确。秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株是利用染色体变异的原理。B错误。人工种子是将植物细胞经过组织培养形成胚状体再包装成人造种子C 正确。通过体细胞杂交培养“番茄一马铃薯”杂种植株采用了植物组织培养技术。D正确。 ）A4下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是（A. 花药、胚不能作为组织培养的材料 B. 植物细胞具有全能性
专题2-细胞工程练习题(含答案解析)
第I卷（选择题） 1．利用植物组织培养技术将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，培育的过程中不需要 A. 导入外源基因 B.离体状态 C. 具有完整细胞核的细胞 D.一定的营养物质和激素 2．通过植物体细胞杂交可以获得“烟草—菠菜”——一种新型的烟草品种。下图为培育杂种植株过程的示意图,下列操作不是必需的是( ) A.在融合之前除去两种细胞的细胞壁 B.原生质体先进行脱分化处理再融合 C.原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养 D.诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株 3．能克服远缘杂交不亲和技术的是( ) A．组织培养 B．细胞融合 C．动物胚胎移植 D．单倍体育种 4．下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是（） A．植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍 B．动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径 C．利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品 D．胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 5．关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.给予适宜的条件，有的植物可在愈伤组织的基础上直接发育出花器官 D.细胞培养产生出变异的新植株，为选择有益性状的新作物创造了条件 6．利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖，以下哪项技术不具备此优点？ A．基因工程技术 B．细胞核移植技术 C．胚胎分割技术 D．试管动物技术 7．在细胞工程——植物体细胞杂交中，需要将营养细胞的细胞壁除去，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将（） A．皱缩 B．胀破 C．呈球形 D．保持原状 8．在生物体内，细胞没有表现出全能性而是分化为不同的器官，其原因是 A. 细胞丧失了全能性 B. 不同细胞中遗传信息的执行情况不同 C. 不同的细胞中遗传信息不完全相同 D. 在个体发育的不同时期，细胞内的遗传物质发生了变化 9．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（） A．植物组织培养没有体现植物细胞的全能性 B．二倍体植株的花药经植物组织培养后得到稳定遗传的植株 C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得
(完整版)细胞工程测试题(1)
绝密★启用前 2015-2016学年度???学校3月月考卷 试卷副标题 xxx 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I 卷（选择题） 请点击修改第I 卷的文字说明 一、选择题（题型注释） 1．下列关于植物组织培养的叙述，正确的是 A 、愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B 、二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C. 用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D. 植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得 2．动物细胞融合技术最重要的应用是（ ） A ．制备单克隆抗体 B ．制备大量的动物细胞 C ．制备胚胎 D ．进行细胞核移植 3．运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种，操作过程中能形成愈伤组织的是（ ）。 ①植物组织培养 ②植物体细胞杂交 ③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A ．①②③ B ．①②④ C ．①③④ D ．①②③④ 4．在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是（ ）。 A ．对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种 B ．将鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B 淋巴细胞融合，制备单克隆抗体 C ．利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝” D ．将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株 5．关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ） A ．可以制成诊断盒，用于疾病的诊断 B ．可以在生物体内生产，不能体外生产 C ．制备过程中一个重要的环节是细胞融合。 D ．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 6．植物组培与动物细胞培养的相同点是 A.都需要一定的气体环境 B.都存在脱分化现象 C.都存在细胞的接触抑制现象 D.都需要对培养材料进行细胞分散处理 7．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
(完整版)专题2细胞工程练习题(含答案解析)
○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○………… 学校:_ _____ _ _ ___姓名：___ _ _____ __班级：______ ___ _ _考 号：_ _ ____ __ ___ ○ … … … … 内 … … … … ○ … … … …装 … … …… ○ … … … … 订… … … … ○ … ………线…………○………… 第I 卷（选择题） 1． 利用植物组织培养技术将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，培育的过程中不需要．．． A. 导入外源基因 B.离体状态 C. 具有完整细胞核的细胞 D.一定的营养物质和激素 2．通过植物体细胞杂交可以获得“烟草—菠菜” —— 一种新型的烟草品种。下图为培育杂种植株过程的示意图,下列操作不是必需的是( ) A.在融合之前除去两种细胞的细胞壁 B.原生质体先进行脱分化处理再融合 C.原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养 D.诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株 3．能克服远缘杂交不亲和技术的是( ) A ．组织培养 B ．细胞融合 C ．动物胚胎移植 D ．单倍体育种 4．下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是（ ） A ．植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍 B ．动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径 C ．利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品 D ．胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 5．关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.给予适宜的条件，有的植物可在愈伤组织的基础上直接发育出花器官 D.细胞培养产生出变异的新植株，为选择有益性状的新作物创造了条件 6．利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖，以下哪项技术不具备此优点？ A ．基因工程技术 B ．细胞核移植技术 C ．胚胎分割技术 D ．试管动物技术 7．在细胞工程——植物体细胞杂交中，需要将营养细胞的细胞壁除去，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将（ ） A ．皱缩 B ．胀破 C ．呈球形 D ．保持原状 8．在生物体内，细胞没有表现出全能性而是分化为不同的器官，其原因是 A. 细胞丧失了全能性 B. 不同细胞中遗传信息的执行情况不同 C. 不同的细胞中遗传信息不完全相同 D. 在个体发育的不同时期，细胞内的遗传物质发生了变化 9．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（ ） A ．植物组织培养没有体现植物细胞的全能性 B ．二倍体植株的花药经植物组织培养后得到稳定遗传的植株 C ．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D ．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得
大学细胞工程试题及答案
大学细胞工程试题及答 案 TTA standardization office【TTA 5AB- TTAK 08- TTA 2C】
细胞模拟试题及答案 一、填空（每空一分，共25分） 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成， 根据其密封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不 均一细胞群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方 法，由单细胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自 稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的 微生物又不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核 融合几个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。
13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续 发育，获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药 培养等。 二、单项选择题（每题1分，共10分） 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价 格昂贵。目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程 2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是（C） A．通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理，以使细胞分散 C．细胞癌变都发生于原代培养过程中 D．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，以保持其正常核型3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用 合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的(C) A．平衡盐溶液B. 琼脂糖 C. 动物血清 D. 甘露醇 4.制备人工种子的关键是控制(A) A.胚状体的同步发育 B.人工种皮的同步发育 C.胚状体的单独发育 D.人工种皮的单独发育
细胞工程精品试题含答案
2015届高考生物细胞工程精品试题（含2014试题） 1. （江西红色六校2014级高三第二次联考）（15分）【生物——现代生物科技专题】(第4小题1分，其他每空2分，共15分) 根据所学生物学知识回答： ⑴如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的上。 ⑵目前临床上使用的红细胞生成素(一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血) 主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO) 。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。 ⑶在“试管牛” 的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是。从良种公牛采集的精子需后才能进行受精作用。在胚胎移植前，通过技术可获得较多胚胎。 ⑷生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理 (1分) A. 协调与平衡原理 B. 物种多样性原理 C. 物质循环再生原理 D. 整体性原理 [解析] 1.（1）运用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，需要用Ti质粒构建表达载体，将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA，用含有构建好的表达载体的农杆菌感染植物细胞，最后使目的基因插入植物细胞的染色体DNA上。 （2）单克隆抗体是通过动物细胞工程的细胞融合技术，筛选培养产生的杂交瘤细胞分泌的，该细胞的杂交瘤细胞由rhEPO免疫过的小鼠淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。 （3）使母牛超数排卵常用促性腺激素；从良种公牛采集的精子须获能后才能进行受精作用，即模仿阴道环境中的物质，使精子获得与卵细胞结合的能力；欲获得较多的胚胎。可通过胚胎分割技术，将早期胚胎分割成合适的份数。 ⑷生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其它物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡，这体现了生态工程的物种多样性原理，因为生态系统的稳定性取决于自我调节能力，自我调节能力的大小又于物种丰富度成正相关。 2. （南通2014届高三第一次调研）下列有关利用动物细胞工程生产单克隆抗体的叙述，错误的是（） A. 单克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞 B. 单克隆抗体制备的原理之一是一个浆细胞可以产生多种特异性抗体
细胞工程试题集.doc
细胞工程试题集 基本原理部分 1. 细胞全能性学说的基本内容是什么？ 2. 植物材料与细胞全能性表达有何关系？对培养中的选材有何指导意义？ 3. 细胞脱分化在细胞结构上有何变化？ 4. 细胞周期的调控在细胞脱分化中有何作用？ 5. 细胞分化有什么基本特征？ 6. 何谓体形态发生？离体培养条件下有哪些途径？ 7. 培养条件下的器官发生有哪些方式？提出以何种方式为宜？ 8. 分析经过愈伤组织的器官发生过程。 9. 从叶肉细胞向TE细胞转分化的过程全面理解细胞的脱分化与在分化。 10. 蔗糖在组织培养过程中的功能是什么？ 11. 为什么培养物在长期继代过程中形态发生能力会丧失？ 12. 体细胞胚与合子胚有何异同？ 13. 与器官发生形成个体相比体细胞胚形成个体有哪些特点？ 14. 如何理解体细胞胚的遗传稳定性和变异性？ 15. 为什么离体培养中IAA，NAA和2,4-D地效用不同？ 16. 离体培养物的遗传变异有何特点？ 17. 离体培养物的遗传变异机理是什么？ 18. 哪些因素会影响培养物的遗传变异？ 19. 从体细胞变异的分子基础分析体细胞变异的外遗传变异，实践中如何应用这些外遗传变异？ 20. 总体上讲离体培养的条件主要有哪些？ 21. 为什么茎尖分生组织培养能够除去植物病毒？ 22. 哪些因素会影响茎尖培养的脱毒效果？ 23. 微繁殖中芽的增殖方式有哪些？各有何特点？ 24. 为什么用于繁殖的组培技术要尽量避免使用外源激素？ 25. 花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？ 26. 花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度激素？ 27. 花药培养中再生植株的形成途径与再生植株倍性有何关系？ 28. 幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有何特点？ 29. 未授粉胚珠子房培养与授粉后胚珠子房培养有何不同？ 30. 植物胚乳有哪些类型？ 31. 用于建立悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？ 32. 一个好的悬浮细胞系有哪些特征？ 33. 悬浮细胞系在继代培养中其群体生长有何规律？ 34. 为什么原生质体要培养在等渗培养基中？ 35. 哪些因素会影响原生质体培养？ 36. PEG融合与电融合各有何特点？ 37. 电融合的原理是什么？ 38. 原生质体融合要经过哪些过程？