WesternBlot基本原理过程及注意事项

W e s t e r n B l o t基本原理

过程及注意事项

The latest revision on November 22, 2020

W e s t e r n B l o t基本原理、过程及注意事项

原理

是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

主要有三个过程：蛋白质电泳、转膜、检测。

样品的准备

样品种类主要有培养的细胞、组织（需磨碎）、特殊细胞（切割下来的肿瘤细胞）等。

1、裂解液主要有RIPA和三去污两种，RIPA适用于细胞质中蛋白检测，而三去污适用

于总蛋白。三去污又分为离子型和非离子型。离子型的裂解能力较强如SDS等，非离子

型的包括NP-40、Tritonx-100。

2、裂解液的成分，

3、样品缓冲液samplebuffer

备注：

1、样品应保持低温，且实验过程应低温操作，此举为了抑制酶的活性。裂解完后样品液

会显得粘稠是长结构DNA所致，故需要匀浆，打断DNA。一般不用超声，因为容易引起

蛋白不可逆的变性。

2、用2X样品缓冲液与样品1：1混匀。4度保存。

3、样品混合液加样前需要100℃或沸水浴加热3-5分钟并迅速插入冰中，以充分变性蛋

白。

配胶：

胶的主要成分为丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。)储于棕色瓶，4℃避光保存。

4、分离胶的配方：以20ml的8﹪分离胶为例：

5、浓缩胶配方：6ml为例

备注：

1、制胶是避免产生气泡，空气会影响胶的聚合，在蛋白质表观分子量分析时影响大。

2、因为有SDS，每次混匀时不应剧烈以免产生过多气泡。

3、蛋白容易与SDS脱离而失去负电荷,因此胶中加入SDS为了给蛋白持续的负电荷。

4、垫条清洗干净，与制胶板压紧，避免漏胶。

5、制胶时，加水应缓慢不要破坏胶面，其作用：可以平衡胶面，赶气泡等。胶固定后用

滤纸吸除干净，有水跑胶时条带会歪。

6、先插梳子再灌浓缩胶。溴酚蓝快跑出胶时停止。

转膜

根据杂交方案、被转移蛋白的特性以及分子大小等因素，选择合适材质、孔径和规格的杂交膜。用于Westernblot的膜主要有两种：硝酸纤维素膜(NC)和PVDF膜。NC膜是蛋白印迹实验的

标准固相支持物，在低离子转移缓冲液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起，但在非离子型的去污剂作用下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的NC膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通常用0.45μm和0.2μm两种规格的NC膜。大于20kD的蛋白可用0.45μm 的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了，如用0.45μm的膜就会发生“Blowthrough”的现象。PVDF膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高，非常适合于低分子量蛋白的检测。但PVDF膜在使用之前必需用纯甲醇浸泡湿透。

装配转移根据三明治原则：海绵→层滤纸→胶→膜→层滤纸→海绵。膜应先浸入纯甲醇湿透。每层放好后，加紧夹板。切记：

将转移槽置于冰浴中，放入“三明治”（黑色面对黑色面），加转移缓冲液，插上电极，250mA，2h。注意：应再次检查三明治和电极是否装配正确，电源是否接通。

转膜结束后，切断电源，取出蛋白膜。

备注：

1、整个过程保持膜的湿润不能干掉。干会产生气泡。转膜时气泡处蛋白会跑向旁边。

2、膜入甲醇时斜而慢，避免产生气泡。

3、转膜缓冲液一般不加SDS，但大槽时因导电性差需加少量，加甲醇用于维持膜与水的相亲

性。

4、由于甲醇易挥发，加入15﹪-20﹪甲醇时应带盖混匀。

5、三明治插到槽中时，槽中需要有液体。

6、电流不能过高，高电流易产热，过热会使条带扩散。

封闭

1．用25mlTBS洗膜5min，室温，摇动。

2．置膜于25ml封闭缓冲液中1h,室温，摇动。

备注：

1、封闭缓冲液可用0.5%牛血清白蛋白，但价贵。常用5%脱脂奶粉。

2、封闭的作用是结合膜上其他的活性位点，防止抗体与之结合。

3、一般室温轻摇1-2h，也可以4度过夜，或者37度0.5h（一般背景会高）。

免疫杂交与显色

1．15mlTBS/T洗3次（5min/T）。

2．加入合适稀释度的一抗，室温孵育1-2h或4°C过夜，缓慢摇动。

3．15mlTBS/T洗3次（5min/T）。

4．加入合适稀释度的碱性磷酸酶（AP）或辣根过氧化酶（HRP）标记的二抗，室温孵育1h，缓慢

摇动。

5．15mlTBS/T洗3次（5min/T）。

6．15mlTBS洗1次。

7．蛋白检测(显色法或发光法)。

备注：

1、稀释的抗体可用5%的牛奶增加蛋白浓度。

会议流程及服务安排细节

会议流程及服务安排 一、会前准备 1、办公室人员收到会议通知，首先需问清楚会议服务要求，然后将具体安排转告会务工作人员，由会务工作人员准备会议前工作，了解与会人员的相关资料，并做好会务登记，保持良好的信息沟通，促进会议的顺利进行。 2、确定会议的出席人数，根据与会人员情况及会议规格适时调整会议场地，并对会场的各项设施进行认真检查。 3、草拟会议议程，经上级领导批准后分发所有与会人员。会议议程是会议内容的概略安排，议程中应涵盖主题、时间、地点，参加人员及议题安排等具体事项，开会之前要将会议议程传达给与会人员。 4、合理安排相关会务工作人员，其工作人员要做到以下几点： （一）仪容仪表 （1）着装统一整洁，不穿拖鞋、响钉鞋。 （2）接待人员短发不遮眼，长发后梳成马尾或盘髻。要求化 淡妆，不浓妆艳抹，不佩戴首饰。 （3）坐站姿势规范端庄，不翘腿。 （二）语言 （1）语调温和亲切，音量适中，普通话规范。

（2）语言文明礼貌，适时运用“您好”、“您请用”、“请”、 “谢谢”、“对不起”、“没关系”等礼貌用语。 （3）对服务对象主动打招呼，不漫不经心，不粗言粗语，不 大声喧哗。 （三）态度 （1）敬业、勤业、乐业，精神饱满，彬彬有礼。 （2）微笑服务，态度诚恳、热情、周到。 （3）工作差错失误及时纠正并当面赔礼道歉。 （4）解释问题有礼有节。 （四）纪律 （1）会议服务前不吃异味食品。 （2）不在会议期间使用电话。 （3）服务过程中不打哈欠、喷嚏、挖耳鼻。 （4）严格遵守职业道德。 5、办公室应在会议召开前一天，以文件、邮件、电话等形式通知与会人员会议的时间、地点及其他具体注意事项。 6、重要会议的召开，应提前做好必要的彩排工作，会议期间的演讲稿件和电子演示文档需要统一规范，并测试投影仪等电子设备是否能正常使用。

服务中注意事项

杜鹃商务山庄 工作注意事项 1、在山庄中不准大声讲话，不准有不雅之举，如用手触 摸头、脸或手置于口袋中等； 2、在服务中不准背对客人，不准斜触靠墙或服务台，不准跑步或行动迟缓，不准突然转身或停顿； 3、要预先了解客人的需要，避免聆听客人的闲聊，在不 影响服务的状况下才能与客人聊天，联络感情； 4、搞好工作场所的清洁，避免在客人面前做清洁工作， 勿将制服当抹布；勿置任何东西在干净的桌面上，以避免造成污损。溢泼出来的食物，饮料应马上清理；不可用手接触任何食物； 5、不准堆积过多的盘碟在茶水柜上，不准空手离开餐厅 到厨房，不准拿超负荷的餐具； 6、客人进入餐厅就餐时，以微笑迎接客人，根据年龄及 阶层，先服务女士，在服务时避免靠在客人身上； 8、在最后一位客人用完餐之后，不要马上清理杯盘，除 非是客人要求才进行清理； 9、所有掉在地上的餐具均需要更换，但需先送上干净的 餐具，然后在拿走弄脏的餐具； 10、客人入座时，主动上前协助拉开椅子，保持良好仪容、 仪表，有礼貌地接待客人，尽量记住常客的习惯与喜

好的菜式；熟悉菜单并仔细研究。 11、工作时，不得双手交叉抱胸或搔痒，不得在客人面 前打呵欠，忍不住打喷嚏或咳嗽时要使用手帕或面巾 纸，并事后马上洗手，不得在客人面前看手表； 12、不准与客人争吵，不准批评客人，对待小孩必须有耐 心，不得抱怨或不理睬，如小孩影响到别桌的客人， 应请他的父母加以劝导； 13、壶嘴不可对着客人，因为壶嘴对着客人是一种不礼 貌的行为； 14、转盘不可反转，每道菜都应从上菜口上，须顺时转 动转盘到主位并报菜名；面对门口的位置就是主位； 15、倒酒：不可反手倒酒，商标必须面对客人。白酒8分满，红酒3分满，啤酒8分满 16、服务站位，站在客人右侧为客人服务。 17、要手勤、脚勤、眼勤、口亲，及时为顾客提供服务； 18、上班时要精神集中，不准几个人凑在一起闲谈，不准做与工作无关的事； 19、保持良好的心态；遇到客人投诉应立即报告上级领导解决，尽量满足客人的合理要求； 20、善于运用礼貌语言，为客人提供最佳服务，做到文明有礼，掌握原则，有问必答。

浇注过程安全注意事项正式样本

文件编号：TP-AR-L2038 There Are Certain Management Mechanisms And Methods In The Management Of Organizations, And The Provisions Are Binding On The Personnel Within The Jurisdiction, Which Should Be Observed By Each Party. （示范文本） 编制：_______________ 审核：_______________ 单位：_______________ 浇注过程安全注意事项 正式样本

浇注过程安全注意事项正式样本 使用注意：该管理制度资料可用在组织/机构/单位管理上，形成一定的管理机制和管理原则、管理方法以及管理机构设置的规范，条款对管辖范围内人员具有约束力需各自遵守。材料内容可根据实际情况作相应修改，请在使用时认真阅读。 浇注铁水是将由冲天炉熔化出的铁水浇注到砂型中，冷却后形成铸件。浇注铁水极易发生烫伤或烧伤事故。因此要注意浇注过程中的安全问题。 浇注工人不仅受高温液体金属热辐射，也受有害气体的危害，更明显的直接危害是烫伤。为防止飞溅金属造成的烫伤，浇注工应穿戴好工作服，戴防护镜。 在浇注前应将空浇注包进行全面检查，视其是否符合要求，并检查机械传动装置是否灵活、可靠，还要检查吊装设备及运送设备是否完好。 浇注时，所有和金属熔液接触的工具，如扒渣

棒、火钳等均需预热，因冷工具接触会产生飞溅。浇注时，型腔内的气体、型砂水分及可燃物等，受热后迅速膨胀、气化、燃烧而由出气孔和冒口溢出，要及时引火燃烧，以免引起爆炸或一氧化碳中毒。 浇注包盛铁水不得太满，不得超过容积的80%，以免洒出伤人。浇注后的剩余铁水、铁渣要倾倒在专用的砂坑、渣坑或渣包内。无论是合箱还是浇注，往往是集体操作，因此，现场应有专人统一指挥，要有口令或手势作信号，以免行动不协调而造成事故。 此处输入对应的公司或组织名字 Enter The Corresponding Company Or Organization Name Here

写字楼会议服务工作规程

写字楼会议服务工作规程 会议服务工作程序: 领受任务会前准备会前检查引领登记会场服务 休会服务会后清理注意事项汇报总结 1、领受任务 (1) 会议名称(2)会议性质(3)与会人数(4)会议期限(5)会议休息时间表(6)会议活动范围(7)准备内容(8)注意事项 2、会前准备 (1)会标(2)音响(3)主席台(4)茶具饮品(5)登记台(6)签到薄(7)休息安排(8)服务员配备(9)会场清洁(10)接手纪念品、礼品(发放) (11)会场指示牌(12)礼仪演习彩排 3、会前检查 根据表格列项检查、设备设施、会议物品 4、引领登记 (1)准备大厅指示牌、引领员、电梯引领员、会场引领员、指示牌 (2)登记根据请柬、门票等发放纪念品 5、会场服务 1)主席台香巾、饮品服务、果盘、会场贵宾饮品、香槟服务 2)会场秩序维持服务(清理闲杂人员) 3)清洁服务 4)委托代办服务 5)出会场的引领服务(先生,请问需要帮助吗) 6)应急情况处理(火灾疏散、禁坐电梯、失窃、当事人询问笔录、相关人询问笔录、停电、溢水、电梯停机、急症救护) 6、会后清理

1)撤会议物品,桌椅、餐具 2)清理与会人员遗留物并登记 3)清洁会场 4)撤出带入会场物品 5)查对清理纪念品、礼品 6)检查清理情况 7)关闭动力电器设备 8)服务人员撤出,锁闭会议厅 7、汇报总结 1)向主办方主办人员汇报会议情况,遗留物品,剩余礼品,征求意见,说明情况 2)会后总结专题会(部门经理,会议服务人员参加) 二、会议接待服务标准: 1、服务员上岗前要按规定化妆、修饰,认真整理工装、工牌,仪容仪表端庄、整洁、精神饱满; 2、会前三十分钟准时到达会场; 3、迎宾站立时保持正确站姿,真诚微笑; 4、会场内卫生整洁,会场所需物品摆放整齐、美观; 5、来宾到达时要热情迎候,依次接待; 6、给来宾提供服务要主动、热情、耐心、周到,回答来宾问题要得体、明确; 7、给来宾引位要及时,客人入座后1分钟内需倒上茶水,递上香巾; 8、会议进行中,每隔1015分钟,及时增添茶水; 9、会议进行中,服务员应站在合适的位置,悉心观察会场状况;

服务过程中注意事项

服务过程中注意事项 1、上班前应注意自己的仪容、仪表（发型、胡子、口红、指 甲）、首饰等等。 2、上班前不可吃有异味的东西（葱、蒜、喝酒、吸烟等）。 3、上班时不可带情绪上班。 4、在任何情况下用或拿洒楼的物品应轻拿轻放。 5、迎接客人时，如有几名服务员同时在一起，问候客人时一 定异口同声说，在任何地方见到领导要打招呼。 6、在任何地方服务员与客人同时走路（或同时相遇时）一定 先让客人先行并微笑向客人打招呼。 7、当给客人上茶水时，茶水应注意滴到客人衣服或身上，并 茶壶嘴不可对着客人。 8、在服务过程中，不能对客人说“要”字，必须讲“需”来 点什么或用加点什么。 9、在点菜过程中，一定注明客人所提出的特殊要求，字迹要 清楚。 10、当点完菜时，应向客人叙述一遍菜单（如：海鲜的斤两、 做法等）。 11、当客人点完酒水，应让客人确认后，方可开瓶。 12、倒洒时，商标对着客人，从主人开始右边做起。 13、当打带气的饮料、酒水（如：可乐、雪碧、香宾等）不可

对着客人方向打开，则背对着客人，以免弄脏客人的衣服。 14、上菜时，应注意荤素、颜色的搭配，如有盘花的菜，盘花 应向转心或没有座客人的方向。 15、上汤、煲仔、火锅等比较烫类型的菜，下面都要放一个盘 或碟子。 16、无论是倒茶水、上菜，特别是上火锅、铁板时，一定要先 撤位，请客人让一下，不要在有小朋友的地方上。 17、上鱼时，鱼肚朝向客人。 18、在上菜过程中，菜需换小碟或分汤的要跟客人说一声。 19、当菜上齐时，一定告诉客人菜人菜已上齐。（在上菜过程中， 报菜名） 20、在撤台或当着客人时，盘与盘，碟与碟，杯与杯不能重放， 对客人不礼貌。 21、在摆台时，坏的、脏的台布、口布、餐具、玻璃器不许摆 台。 22、家私柜内不可放私人物品。 23、不准私自使用洒楼任何物品。 24、上班时间，不可做工作以外的事情，不能哼小曲、大声说 话，吵架、打架等行为。 25、任何情况下，不许对着客人打喷嚏、掏耳朵、摸头发等。 26、在服务过程中，手要保持清洁，不可用脏手给客人服务。 27、上班时，不能私自离开岗位。

塔机浇注安全注意事项(正式)

编订：__________________ 单位：__________________ 时间：__________________ 塔机浇注安全注意事项 (正式) Standardize The Management Mechanism To Make The Personnel In The Organization Operate According To The Established Standards And Reach The Expected Level. Word格式 / 完整 / 可编辑

文件编号：KG-AO-8165-37 塔机浇注安全注意事项(正式) 使用备注：本文档可用在日常工作场景，通过对管理机制、管理原则、管理方法以及管理机构进行设置固定的规范，从而使得组织内人员按照既定标准、规范的要求进行操作，使日常工作或活动达到预期的水平。下载后就可自由编辑。 一、塔机基础浇注安全注意事项 1、塔机基础地基承载力应不低于塔基基础图技术要求中规定的地耐力值。 2、塔机基础的浇注位置应考虑便于塔机的安装与拆卸，避开各种大障碍物。 3、塔机基础四个固定所组成的水平面倾斜度不大于1/1000。 4、塔机基础不得有位移、地基不得有塌方现象。基础四周应有排水措施，不得有积水现象。 应按规定打下接地桩。 5、塔机基础浇注应尽量避开回填土地段。如不得已采用时，应采取有效措施使地基承载力达到规定要求。 6、塔机基础浇注在基础上时，基础的底面一般应

于基坑持平或略低于基坑。应事先了解基础地基的土质和地耐力情况。如基础地基四周有暗河、流砂、污泥等现象，应采取有效措施使地基承载力达到规定要求。 7、塔机基础浇注在基坑边，基坑围护体系或基坑地下连续墙上的，应采取有效措施加强基础四周的围护和阻止基础的不均匀沉降，确保基础不发生塌方、位移和倾斜现象。 8、塔机基础在远离基坑的自然地基上浇筑时，地基的地耐力应符合规定要求，适当开挖后应将地基夯实。 二、塔机的安装（拆卸）安全注意事项 1、塔机的安装（拆卸）队伍应是具有相应资质的专业组织，其人员必须经过培训并取得有效操作证。 2、严禁塔机安装（拆卸）人员酒后作业。 3、塔机安装（拆卸）人员应戴安全帽、配安全带、穿工作鞋。 4、在高空作业时，不得将小件物品和工具随意放

westernblot原理及步骤

westernblot原理及步骤 1.western blot 即蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。 2.原理 简单来说就是原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息 3.步骤 （一）蛋白样品制备 培养的细胞（定性） 1.去培养液后用温的PBS冲洗2~3遍（冷的PBS有可能使细胞脱落）。 2.对于6孔板来说每孔加200~300uL，60~80℃的1×loading buffer。 3.刮下的细胞在EP管中煮沸10min，期间vortex 2~3次。 4.用干净的针尖挑丝，将团块弃掉，如果没有团块但有拉丝现象，可将EP管置于0℃后在 5.14000~16000g离心2min，再次挑丝。若无团块也无丝状物但溶液有些粘稠，可使用1ml注射器反 6.复抽吸来降低溶液粘滞度，便于上样。 7.待样品恢复到室温后上样。 培养的细胞（定量） 1.去培养液后用温的PBS冲洗2~3遍（冷的PBS有可能使细胞脱落）。

2.加入适量的冰预冷的裂解液后置于冰上10~20min。 3.刮下的细胞收集在EP管后超声（100~200w）3s，2次。 4.12000g离心，4℃，2min。 5.取少量上清进行定量。 6.将所有蛋白样品调至等浓度，充分混合沉淀后加loading buffer后直接上样最好，剩余溶液（溶于1×loading buffer）可以低温储存，-70℃一个月，-20℃一周，4℃1~2天，每次上样前98℃，3min。 （二）SDS－PAGE电泳 （1）清洗玻璃板 （2）灌胶与上样 （3）电泳 （三）转膜 （四）免疫反应 （五）化学发光，显影，定影 （六）凝胶图象分析将胶片进行扫描或拍照，用凝胶图象处理系统分析目标带的分子量和净光密度值。

会议接待及注意事项培训讲学

会议接待及注意事项

会议接待及注意事项 根据参加会议的人数不同、会议接待的准备工作的内容不同以及会议接待的方式不同，对会议的组织方法，礼仪要求也不同。 首先是会议的筹备工作。 ●根据会议规模，确定接待规格。 ●发放会议通知和会议日程。 会议通知必须写明召集人的姓名或组织、单位名称，会议的时间、地点、会议主题以及会议参加者、会务费、应带的材料、联系方式等内容。通知后面要注意附回执，这样可以确定受邀请的人是否参加会议，准备参加会议的是否有其他要求等。对于外地的会议参加者还要附上到达会议地点和住宿宾馆的路线图。这个路线图避免了外地人问路的许多麻烦。 会议日程是会议活动期间每一天的具体安排，它是人们了解会议情况的重要依据。它的形式既可以是文字的也可以是表格的。它可以随会议通知一起发放。 ●选择会场。

选择会场，要根据参加会议的人数和会议的内容来综合考虑。最好是达到一定标准： 第一：大小要适中。会场太大，人数太少，空下的座位太多，松松散散，给与会者一种不景气的感觉;会场太小，人数过多，挤在一起，像乡下人赶集，不仅显得小气，而且也根本无法把会开好。所以，英国的首相丘吉尔曾说：“绝对不用太大的房间，而只要一个大小正好的房间。” 第二：地点要合理。历史召集的会议，一两个小时就散的，可以把会场定在与会人员较集中的地方。超过一天的会议，应尽量把地点定的离与会者住所较近一些，免得与会者来回奔波。 第三：附属设施要齐全。会务人员一定要对会场的照明、通风、卫生、服务、电话、扩音、录音等进行检查，不能够因为“上次会议是从这里开的，没出什么问题，”就草率地认为“这回也会同样顺利”。否则，可能会造成损失。 第四：要有停车场。现代社会召集会议，“一双草鞋一把伞”赶来开会的人已经不多了。轿车、摩托车都要有停放处，会才能开得成。

浇注工安全操作工规程(一般浇注工)正式版

Guide operators to deal with the process of things, and require them to be familiar with the details of safety technology and be able to complete things after special training.浇注工安全操作工规程 (一般浇注工)正式版

浇注工安全操作工规程(一般浇注工) 正式版 下载提示：此操作规程资料适用于指导操作人员处理某件事情的流程和主要的行动方向，并要求参加施工的人员，熟知本工种的安全技术细节和经过专门训练，合格的情况下完成列表中的每个操作事项。文档可以直接使用，也可根据实际需要修订后使用。 1、浇注时必须穿戴好鞋盖、防护眼镜等到防护用品。 2、铁水包必须严格烘烤，扒渣工具需预热干燥。 3、铁水包要放平，放稳，盛铁水不得过满，高度应在距边缘60毫米以下。剩余的铁水不准乱倒，（如倒在坑内不能用砂子掩盖，防止误踏伤人）。 4、浇注大型铸件要用专人扒渣、档渣、引气，以免发生爆炸事故，档渣工必须随时清除因铁水洒出而生成的铁豆等。 5、用行车运送铁水，必须由专人指

挥，并遵守挂钩工安全操作规程，铁水吊运前必须插好保险卡，不准从人头上通过。用平车运送时铁水应先放置牢固，平车轨道及附过不能有障碍物。 6、浇注时严禁从冒口观察铁水。浇包的对面不得站人，以防铁水溅出伤人，比发生铁水溢出时，要用铁锹取砂和用泥堵塞。 7、浇注特大铸件时，无论多少包铁水，必须由一个总指挥统一指挥，分指挥应服从总指挥。 8、浇注高砂箱铸件时，操作人员要站在地基稳固的地方。超过1米高的大型铸件，应在地坑中浇注，以免漏箱时发生烫伤事故。

会议须知

会议须知 1、现场报到和证件领取： 与会代表将在海口美兰国际机场抵达大厅现场报到时领取各自的会议证件。如您提早向秘书处申请的车证获得批准，可一并在报到时领取。领取证件时请出示秘书处签发的参会确认函或身份证件。在年会期间，请您全程佩带证件，凭证件出入各会议及活动场所、到指定餐厅用餐、乘坐穿梭巴士。胸卡如有丢失或损坏，请赶忙通知年会服务中心补办。会议报到中心的工作时刻是： 4月8 -10日（星期四-六）08:00-22:00 下榻索菲特的代表在海口美兰国际机场现场报到时还可得知入住房间号码，会议资料、会议手册、会刊和会议包将预先放置在酒店房间内。下榻其他酒店的代表可在索菲特大堂的会议服务中心领取会议袋和会议资料，时刻为4月8日至11日。 **如您经三亚抵达博鳌，请在4月5日前通知论坛秘书处并自行安排交通到博鳌，证件将在博鳌培兰桥制证中心领取。 2、交通安排 会议期间，大会为与会的代表和记者提供的交通服务有：海口美兰机场至博鳌酒店之间接机移动、博鳌各酒店之间的会议活动移动、博鳌酒店至海口机场的送机移动。 4月10-11日，大会将在当天会议开始前以及全天会议终止后集中安排车辆接送代表、记者前往会场以及返回各入住酒店，具体发车时刻届时会提早在各酒店大堂处公布，请注意酒店大堂处的交通安排公告。

会议期间的其他零散移动，由大会在博鳌区域内设置的穿梭巴士解决，与会人员可在站牌处候车，凭会议代表证、记者证或工作证上车。穿梭巴士的行车线路、发车时刻、上落地点，请详见以下安排： 穿梭巴士的行车线路以索菲特和锦江温泉酒店为起终点。沿线站点为：锦江（院门外）、玉带湾（大堂）、千舟湾（院门外）凯宾斯基（院门外）、培兰桥（桥头西侧）和索菲特（大堂U字右口）。请详见“场地·地图”部分之穿梭巴士路线图。 穿梭巴士运行时刻安排如下： 返程的酒店至海口机场送机服务将按照与会人员提供的返程航班信息安排车辆定时发送。凡有送机需求者，请于入住时或于返程前半天至酒店服务中心办理申请登记，填写返程航班信息登记表，届时请注意酒店服务中心的送机安排公告。 与会人员如有因私用车（非会议活动移动）需求，请与酒店前台或礼宾部联系预定，费用自理。 3、年会接待服务中心 年会接待服务中心负责向与会代表和记者提供会议日程咨询，接待和车辆安排咨询，胸卡遗失补办，失物招领等服务。 开放时刻：4月8-11日，07:00-24:00 1、年会接待服务中心电话 年会服务中心总部：索菲特大酒店大堂西侧 (86-898) 6296 6030/6031/ 6032/6033/6040/6054 2、年会接待服务中心分支机构：

服务中的注意事项范文

服务中的注意事项范文 一、安全 1．穿着合适的鞋子以免滑倒和摔倒 2．不要匆忙或奔跑 3．警惕在你周围的人 4．以客为先，靠右走 5．不要在盘子上堆放过多的东西 6．当抬举重物时用腿部的力量而不是背部力量 7．手拿物品时，尽可能的作好自我保护 8．即使清洁溢出和残留的水滴 9．清楚地了解地板何处有水，并应用拖把拖干 10．勿用手直接触摸发热的物品，如：薯条炸炉等

11．知道灭火器的摆放位置和使用方法（基本和简单有效的消防知识） 12．取冰块是要用冰铲，不要直接用手或玻璃器皿 13．用托盘装载热的物品 14．打翻冰块应与任何渗水一样处理 15．如果抬举特别重物时，需要两个以上的人合作完成 二、坏习惯 1．身体依靠在家具、墙面或单脚站立 2．两手叉腰、两手插在口袋中或两手交叉 3．两腿不停的摇摆 4．站得离客人太远或太近，站在客人不易看见的地方

5．与客人说话时眼睛看着别处 6．走路太快、太慢或奔跑，两手放在背后，走路僵硬，走路看着地板 7．装着没有注意顾客需要服务，背对着顾客 8．触摸自己的头发和脸 9．挖鼻孔、咬或挖指甲 10．刮或磨擦家具 11．咬嘴唇 12．揉眼睛 13．营业场所内整理制服 14．营业场所内化妆 15．咀嚼口香糖或吃东西

16．玩手指并发出声音 17．显出厌烦的神态 18．打哈欠、打嗝、吐痰、打喷嚏不遮住脸，打击关节、吹口哨或大声唱歌 19．未经客人允许触碰客人的东西 20．营业场所口头禅里带秽语、粗口 服务中的注意事项[篇2] 1、在工作中DJ不允许接听与工作无关的电话 2、严禁挑客，私自离开服务房间，若客人要求换人或自己有特殊情况要求，应迅速私下找到房间负责经理报告，得到批准后（经理在服务监督卡上签字认可）才可离开。 3、严禁窜房，若有其它房间熟客需打招呼，须得到本房和进房负责经理同意，打招呼时间不得超过十分钟。

WesternBlot原理和操作方法(全)讲解

Western Blot 原理和操作方法（全） Western Blot 工作原理 蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象.根据所采用的支持物不同,有琼脂糖凝胶电泳,淀粉凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳等.其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)由于无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出10-9-10-12mol 的样品,凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶等优点而受到广旱挠τ? SDS-PAGE是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量. PAGE能有效的分离蛋白质,主要依据其分子量和电荷的差异,而SDS-PAGE(SDS 变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分离原理则仅根据蛋白质的分子量的差异,因为SDS-PAGE的样品处理液是在要跑电泳的样品中假如含有SDS和巯基乙醇(2-ME)或二巯基赤藓醇(DTT),其可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构,SDS是一种阴离子表面活性剂即去污剂,它可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级及三级结构,并与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,电泳样品假如样品缓冲液后,要在沸水中煮3-5分钟使SDS与蛋白质充分结合形成SDS-蛋白质复合物,SDS-蛋白质复合物在强还原剂巯基乙醇存在时,蛋白质分子内的二硫键被打开而不被氧化,蛋白质也完全变性和解聚,并形成榛状结构,稳定的存在于均一的溶液中,SDS与蛋白质结合后使SDS-蛋白质复合物上带有大量的负电荷,平均每两个氨基酸残基结合一个SDS分子,这时各种蛋白质分子本身的电荷完全被SDS掩盖,远远超过其原来所带的电荷,从而使蛋白质原来所带的电荷可以忽略不计,消除了不同分子之间原有的电荷差别,其电泳迁移率主要取决于亚基分子质量的大小,这样分离出的谱带也为蛋白质的亚基. 样品处理液中通常加入溴酚蓝染料, 溴酚蓝指示剂是一个较小的分子,可以自由通过凝胶孔径,所以它显示着电泳的前沿位置,当指示剂到达凝胶底部时,即可停止电泳. 另外样品处理液中也可加入适量的甘油或蔗糖以增大溶液密度,使加样时样品溶液可以沉入样品加样槽底部. 重要参数 ①聚丙烯酰胺凝胶(PAG)制备原则:由于孔径的大小取决于单体和双体丙烯酰胺在凝胶中的总浓度(T)以及双体占总浓度的百分含量即交联度(C)决定的,因而制胶之前必须首先知道这两个参数.一般可以由下述公式计算: T%=(a+b)/m*100%; 和C%=a/(a+b)*100% 其中: a=双体(bis)的重量;b=单体(arc)的重量;m=溶液的体积(ml) ②当分析一个未知样品时,常常先用7.5%的标准凝胶制成4-10的梯度凝胶进行试验,以便选择理想的胶浓度.如果蛋白质的分子量已知,可参考下表选择所需凝胶浓度: 蛋白质分子量范围(Da) 适宜的凝胶浓度(%) <104 20-30

会议接待及注意事项

会议接待及注意事项 根据参加会议的人数不同、会议接待的准备工作的内容不同以及会议接待的方式不同，对会议的组织方法，礼仪要求也不同。 首先是会议的筹备工作。 ●根据会议规模，确定接待规格。 ●发放会议通知和会议日程。 会议通知必须写明召集人的姓名或组织、单位名称，会议的时间、地点、会议主题以及会议参加者、会务费、应带的材料、联系方式等内容。通知后面要注意附回执，这样可以确定受邀请的人是否参加会议，准备参加会议的是否有其他要求等。对于外地的会议参加者还要附上到达会议地点和住宿宾馆的路线图。这个路线图避免了外地人问路的许多麻烦。 会议日程是会议活动期间每一天的具体安排，它是人们了解会议情况的重要依据。它的形式既可以是文字的也可以是表格的。它可以随会议通知一起发放。 ●选择会场。 选择会场，要根据参加会议的人数和会议的内容来综合考虑。最好是达到一定标准： 第一：大小要适中。会场太大，人数太少，空下的座位

太多，松松散散，给与会者一种不景气的感觉;会场太小，人数过多，挤在一起，像乡下人赶集，不仅显得小气，而且也根本无法把会开好。所以，英国的首相丘吉尔曾说：“绝对不用太大的房间，而只要一个大小正好的房间。” 第二：地点要合理。历史召集的会议，一两个小时就散的，可以把会场定在与会人员较集中的地方。超过一天的会议，应尽量把地点定的离与会者住所较近一些，免得与会者来回奔波。 第三：附属设施要齐全。会务人员一定要对会场的照明、通风、卫生、服务、电话、扩音、录音等进行检查，不能够因为“上次会议是从这里开的，没出什么问题，”就草率地认为“这回也会同样顺利”。否则，可能会造成损失。 第四：要有停车场。现代社会召集会议，“一双草鞋一把伞”赶来开会的人已经不多了。轿车、摩托车都要有停放处，会才能开得成。 ●会场的布置。 会场的布置包括会场四周的装饰和坐席的配置。 一般大型的会议，根据会议内容，在场内悬挂横幅。门口张贴欢迎和庆祝标语。可在会场内摆放适当的轻松盆景、盆花;为使会场更加庄严，主席台上可悬挂国旗、党旗或悬挂国徽、会徽。桌面上如需摆放茶杯、饮料，应擦洗干净，摆放美观、统一。

餐厅服务员服务中注意事项 条

餐厅服务员服务中注意事项100条 1、服务中切记服务态度要热情； 2、上菜时拇指不得进盘中； 3、忌上菜时对着菜品讲话； 4、不得在客人面前与同事大声吼叫； 5、在餐厅可以快走，但不可以跑； 6、忌不及时为客人更换骨碟、烟缸； 7、要为客人拉椅让座； 8、要为客人接挂衣帽； 9、不要为客人左右开功的服务； 10、不要站在客人正面为客人服务； 11、不可在客人面前饮水； 12、不可离开本包房或本台客人过久； 13、不可在客人面前挖鼻孔、剔牙； 14、为客人上餐具，如酒杯时，不可留有手印； 15、不可将口布夹在腋下； 16、不可给客人上破损餐具； 17、不可用脏托盘为客人服务； 18、不可依靠墙壁无精打采； 19、不可忘记客人交待的事情； 20、及时为客人调换落在地上的餐巾或餐具； 21、不可背对客人；

22、服务中不可突然转身或停顿； 23、服务中不可跑步或行动迟缓； 24、不可议论客人； 25、上菜时要尽可能保持一个上菜口，不要随时更换； 26、带有佐料的菜：佐料先上，上在菜的右侧； 27、骨碟更换边撤边换，同步进行； 28、及时为客人斟倒酒水，不要等客人喊； 29、客人碰洒酒水要及时清理； 30、落在转盘上的菜及汤汁要及时清理； 31、收到菜单时，先检查是否有提前准备的餐具； 32、尽量记住常来客人的姓名、喜好； 33、为客服务时尽量不要打断客人的讲话； 34、当宾客斟酒时，服务员要准备好酒，随时为客人添加； 35、预先调好室内温度； 36、上菜后稍退一步报上菜名； 37、菜齐后要及时通知客人菜已齐； 38、菜齐时要及时问客是否需要主食，以免主食上的速度慢； 39、如遇汤羹类菜肴要及时为客人分羹； 40、所有食物均由右侧为客人上； 41、避免撤换餐具时碰撞发出声音； 42、不可在老人及儿童之间上菜； 43、不能用开水加汤，必须跟指定的汤；

一般浇注工安全操作规程

编号：CZ-GC-03688 ( 操作规程) 单位：_____________________ 审批：_____________________ 日期：_____________________ WORD文档/ A4打印/ 可编辑 一般浇注工安全操作规程 Safety operation procedures for general pouring workers

一般浇注工安全操作规程 操作备注：安全操作规程是要求员工在日常工作中必须遵照执行的一种保证安全的规定程序。忽视操作规程在生产工作中的重要作用，就有可能导致出现各类安全事故，给公司和员工带来经济损失和人身伤害，严重的会危及生命安全，造成终身无法弥补遗憾。 1．浇注时必须穿戴好鞋盖，防护眼镜等防护用品。 2．铁水包必须严格烘烤，扒渣工具需预热干燥。 3．铁水包要放平，放稳，盛铁水不得过满，高度应在距边缘60毫米以下。剩余的铁水不准乱倒(如倒在坑内，不能用砂子掩盖，防止误踏伤人)。 4．浇注大型铸件要用专人扒渣、挡渣、引气，以免发生爆炸事故。挡渣工必须随时清除因铁水洒出而生成的铁豆等。 5．用行车运送铁水，必须由专人指挥，并遵守挂钩工安全操作规程。铁水吊运前必须插好保险卡，不准从人头上通过。用平车运送时铁水应先放置牢固，平车轨道及附近不能有障碍物。 6．浇注时严禁从冒口观察铁水。浇包的对面不得站人，以防铁水喷出伤人。如发生铁水溢出时，要用铁锹取砂和用泥堵塞。 7．浇注特大铸件时，无论多少包铁水，必须由一个总指挥统一

指挥，分指挥应服从总指挥。 8．浇注高砂箱铸件时，操作人员要站在地基稳固的地方。超过1米高的大型铸件，应在地坑中浇注，以免漏箱时发生烫伤事故。 9．抬铁水包时，应步调一致，方向统一，拐弯要慢速，要抬平、抬稳。万一有人烫伤不得将包丢掉，应通知另一人慢慢将包放下。 10．扒渣和挡渣，不许用空心棍。不准将扒渣棍倒着扛和随地乱放。 ——摘自《机械工人安全技术操作规程》 这里填写您的公司名字 Fill In Your Business Name Here

会议组织注意事项

会议组织注意事项 一、会议筹备 1、提前3-7天将参会人员的资料，按每人次准备好，注意区分参会人员的角色（如会议主持、参会领导、演讲嘉宾、参会代表、媒体记者等），资料按照人员角色分别准备。 2、会议资料较多时，需要按照会议议程将会议资料按次序排放，最好装订成册，编好页码，方便参会人员阅读。 3、角色不同需要不同的资料时，应当按照人员或单位将资料以文件袋装好标注资料归属人员或单位，方便参会人员领取。 4、给参会人员发放纪念品或礼品等，应当与会议资料一同准备好，置于资料文件袋中一并发放给参会人员。 （会议方案、通知、不同角色邀请函、邀请确认、赞助确认、会议时间、地点和会场布置确认，会议资料制作、新闻通稿、纪念品、背景素材、横幅、易拉宝，名签（铭牌）、签到处、大会背景板制作或投影，带电脑（含会议资料、投影灯），速记、摄影摄像） （二）、会议通知：口头通知（电话、微信、QQ或其他）和书面通知（快递通知、邀请函，或电子邮件发正式通知、邀请函等），通知需注意： 1、通知应包含：简要的会议议程说明、参会人员构成、会议时间、会议地点、餐饮安排等。 2、应通过正式途径发送给参会人员，如OA系统、电子邮箱、

网站公布、函件等，如有必要可另行电话通知参会人员。（主要领导、嘉宾名单确认；参会代表名单确认、媒体记者名单确认、演讲嘉宾名单和内容确认，PPT应在会议资料制作时收集好） （三）、会议议程： 1、会议开始时说明流程：工作汇报（致辞、讲话、发言、演讲）、讨论、工作安排（小结、总结）等，应事先制作好 2、会议时段如果是跨天，或占用餐时间，需考虑餐、宿问题。（四）、会场布置：1、会场应提前安排好。会场如相对隐蔽，应事先通知参会人 2、要安排好参会人员的坐席，并放置好重要人员的铭牌，并告知如何快速准确找到铭牌就坐。 3、安排好坐席的会场，应将会议资料袋会前摆放在坐席上。 4、需要用到视频放映或开视频会议时，要调试好会场的投影仪、调音台、幕布、麦克风等器械。 5、注意会场环境，如温度、灯光等，按照实际情况调整好。 6、应准备好会议记录工具，如相机、摄像机、录音笔等，以便于在会后做好会议总结工作。 （五）、现场安排（人员入场时）： 1、会场入口处设立接待处，准备好签到表，对参会人员签到，发资料、发参会证牌。 2、会议资料较少时可在参会人员签到时分发给参会人员。

wb原理步骤及总结

实验原理 蛋白质印迹是把电泳分离的蛋白质转移到固定基质上，然后利用抗原抗体反应来检测特异性的蛋白分子的技术，包括三个部分：SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳转移，免疫印迹分析。 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳主要用于测定蛋白质相对分子质量，SDS是阴离子去污剂，能断裂蛋白质分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏其高级结构。SDS与大多数蛋白质的结合比为1.4:1，由于SDS带有大量的负电荷，与蛋白质结合时掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差别，使各种蛋白质带有相同密度的负电荷，形似长椭圆棒，蛋白迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系。因此，利用相对分子质量标准蛋白所作的标准曲线，可以求得未知蛋白的相对分子质量。 电泳后蛋白质分子嵌在凝胶介质中，探针分子很难通过凝胶孔，将蛋白质从凝胶转移到固定基质上可以对蛋白质进行免疫检测分析。方法有两种：①水平半干式转移即将凝胶和固定基质似三明治样夹在缓冲液浸湿的滤纸中间，通电10~30min可完成②垂直湿式转移即将凝胶和固定基质夹在滤纸中间，浸在转移装置的缓冲液中，通电2~4h或过夜可完成。固定基质通常有硝酸纤维素膜、聚偏二氟乙烯膜和尼龙膜。 蛋白质转移到固定化膜上之后，通过蛋白质染料如丽春红S检测膜上的总蛋白，或用考马斯亮蓝检测凝胶上的蛋白剩余量，以验证转移是否成功。用抗体作为探针进行特异性的免疫反应检测抗原蛋白，分为4步：①用非特异性、非反应活性分子封阻固定化膜上未吸附蛋白的自由结合区，以防止作为探针的抗体结合到膜上，出现检测时的高背景②固定化膜用专一性的一抗温育，使一抗与膜上的抗原蛋白分子特异性结合③酶标二抗与一抗特异结合④加入酶底物，适当保温，膜上便可见到颜色反应，检测出抗原蛋白区带。 主要溶液 10%分离胶 水 3.3mL、30% 丙烯酰胺混合液 4.0mL、1.0mol/L Tris（pH8.8）2.5mL、10% SDS 0.1mL、10%过硫酸铵0.1mL、TEMED 0.004mL 5%浓缩胶 水 2.7mL、30%丙烯酰胺混合液0.67mL、1.0mol/LTris0.5mL、10%SDS0.04Ml/10%过硫酸铵0.04mL、TEMED0.004mL 1×Tris –甘氨酸电泳缓冲液 Tris碱3.03g、甘氨酸18.77g、SDS 1g，用去离子水定容至1L 2×SDS凝胶加样缓冲液 Tris-HCl（pH6.8） 100mmol/L，β-巯基乙醇10%，10%甘油，0.01%溴酚蓝，10%SDS 转移缓冲液 Tris 2.45g，甘氨酸11.25g，甲醇100mL，加去离子水至1L TBST Tris 1.21g NaCl 8.77g，Tween-20 1mL，加去离子水至1L Stripping 1.3mL Tris （pH 6.8），4mL10%SDS，140μlβ-巯基乙醇，用水定容到20mL 实验步骤 1 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 ⑴凝胶配置 ①分离胶的配置：将配置好的分离胶液混匀后迅速倒入胶槽中，至距离短玻璃板顶端约2cm 处，停止灌胶。检查是否有气泡，若有用滤纸条吸出。然后在胶液界面上加蒸馏水进行水封。15~30min后，凝胶和水封层界面清晰，说明胶已经聚合完全，然后用滤纸吸取水封层，滤纸切勿接触到凝胶面。（使蛋白样品分离） ②浓缩胶的配置：将配置好的浓缩胶灌注在分离胶之上，直至短玻璃板的顶端，然后插入样品

宴会服务中的注意事项

宴会服务中的注意事项 1、客人入座后送撤香巾，应从客人右侧 2、不伸手到客人面前取物或将食品递给对面的客人更不可隔着客人服务。 3、取碟时四个手指在下、拇指在上切忌浸入菜汤。 4、开启酒瓶时：酒瓶要倾斜，商标朝向客人。 5、啤酒泡沫过多，斟到时（1）速度慢（2）酒瓶倾斜、瓶口留出空隙利于进空气（3）尽量减 少晃动、让酒沿杯边徐徐的倒入。白酒九分满，啤酒8分满、红酒1/3或2/3白兰地1/5 6、当客人杯中还剩1/3酒水时服务员要及时斟倒除非客人不要 7、斟倒茶饮料时8分满 8、啤酒和饮料应先倒啤酒 9、斟倒酒水及饮料时一律从客人右侧 10、菜的盘边、盘底、一定要保持干净、上菜的位置应选择在副主人的右侧。新上的菜转到主 宾面前、把前一道菜转到副主人面前、或主人、主宾中间 11、上菜撤盘不能从客人头上越过，不要从小孩女士身边上菜，不能说劳驾更不能说借光、上 菜要稳、不要将汤汁洒在客人身上。 12、分菜时要将菜的优质部分均匀的分给客人。分菜要做到一勺准、一叉准、切不可将一勺汤 或一叉菜派分给两位宾客，每道菜要留下2/10将剩余的放桌上，以示菜肴充足。 13、上整鱼时鱼头朝向主宾、鱼尾朝向副主宾、分整鱼时要剔出鱼骨并恢复原形，不可把鱼 肉戳破上桌供人观赏。分整鸡时、整鸭、只分腿肉和胸脯肉，不分头尾翅 14、上汤菜时要注意。不要用抹布垫托要使用托盘。端拿时手指不能浸入汤内，汤中若有油 花，油沫和湖葱，应用小勺撤出、切记用嘴吹或用手拿 15、上撤要分开左撤右上换骨蝶如客人碟如客人碟内有食物应用客人询问是否可以撤下， 注意不要把汤洒在客人身上。 16、斟酒上菜，送物一律用托盘，托盘一律用右手，用右手操作 17、宴会服务要集中精力、精神饱满、客问必答，不要上错上漏菜肴不要洒菜汤、打破餐具， 要尊重客人的风俗习惯，客人不食之物，不要多次送上，不要偏向某一位客人

浇注工(钢)安全操作规程示范文本

浇注工（钢）安全操作规 程示范文本 In The Actual Work Production Management, In Order To Ensure The Smooth Progress Of The Process, And Consider The Relationship Between Each Link, The Specific Requirements Of Each Link To Achieve Risk Control And Planning 某某管理中心 XX年XX月

浇注工（钢）安全操作规程示范文本使用指引：此操作规程资料应用在实际工作生产管理中为了保障过程顺利推进，同时考虑各个环节之间的关系，每个环节实现的具体要求而进行的风险控制与规划，并将危害降低到最小，文档经过下载可进行自定义修改，请根据实际需求进行调整与使用。 1、浇注前，应检查浇注场地是否平整、坚实、干燥、 道路通畅；检查钢包、滑板机构、钢包内部是否完好。 2、修理新包、装配塞杆、校直塞杆和出完钢水打座盆 砖时，遵守《修包工安全操作规程》；浇注钢锭时，遵守 《铸锭工安全操作规定》。 3、使用天车吊物时遵守《起重工安全操作规程》，满 载的钢水包吊运时，必须前后各设一人监护，并由一人指 挥，禁止他人接近或在附近停留、通过，所用吊具，按负 荷使用，使用前须仔细检查。 4、钢锭应在浇注坑内进行浇注。 5、钢水包在使用前必须把钢包壁烤红。 6、使用的各类工具，必须干燥，未经烤干的钢包、中

注管不准使用，浇注前把钢包上的残渣打净。 7、用来烧割钢包水口用的钢管，长度不得小于2.5米。使用的胶皮管、钢管不准漏气，必须联接可靠。 8、钢水化开后，任何人不准在钢槽下操作，防止钢水冲开出钢口造成烫伤。 9、出钢后，如遇钢包上部往外流渣时，不得进行浇注，待处理稳妥，停止外流时再浇钢。 10、浇钢时，钢包须对准浇口或中注管口，听从专人指挥；如遇跑火，采用造型面砂、干砂等措施堵塞，禁止用稀泥和水份大的砂子堵塞。 11、浇注过程中，遇滑板关不住或关不严，钢水飞溅时，必须由一人正确指挥天车处理，其余人员迅速避开危险区。 12、炉下正在放渣或渣罐盛满熔渣时，禁止任何人在渣罐旁站立或行走。

会议组织流程及注意事项

会议组织流程及注意事项 一、会议筹备 （一）会议资料准备在必要时将参会人员的资料按每人次准备好，注意区分参会人员的角色（如分成会议主持、参会领导、参会普通人员），资料按照人员角色分别准备。 （二）会议通知拟定会议通知分为书面通知和短信通知，其中在较为紧急情况下采用短信通知。 1、提前5天拟定会议通知，报部门主管审核，再由分管副总审批签字后以书面文件形式下发，下发时签收人须登记存档； 2、通知内容必须包含时间（24 小时制）、人物、地点、事件等要素，以“骨” 的形式编写； 3、会议尽量避免安排在周一或其他会议集中的日期进行，会议时间的确定须与人力资源部主管协商并进行登记； 4、紧急通知采用短信形式下发，下发前负责人员须拟定短信通知内容及参会人员短号，交与行政部相关人员（现为何惠敏）进行短信通知。 （三）会议议程安排 1、会议议程须以正式文件形式拟定； 2、正式会议开始时一般需要说明会议整体流程，会议分为几项内容； 3、议程安排时应考虑到会议时间，尽量将会议时段安排在正常工作时段内，如9：00-12:00 或者14:00-18:00 ，如果是有外部人员参加的会议需要考虑是否安排餐宿问题。 （四）会场布置

1、提前3 天，填写好会议室、横幅（和欢迎牌）申请表，交与行政部及广告部相关负责人； 2、领回横幅（和欢迎牌）并确认内容正确后交与行政部，并在会议前一天追踪横幅是否挂好（欢迎牌是否摆放正确）； 3、会议开始前排好座席及水牌，并将瓶装水、茶水、水果、会议相关资料等正确摆放于会议桌上（注：销售部人员水牌可摆在靠边位置）； 4、需用到视频放映时，提前调试好会场的投影仪、调音台、麦克风等器械，并负责为外部人员接入电脑等事宜。 （五）现场安排（人员入场时） 1、若有外部人员参与的会议，需要接送时必须在会议前一天填写好用车申请单交与调度室，并安排人员在会议当天接待外部人员； 2、会议开始前在会场入口处设立签到处，组织参会人员签到，并指引外部人员入座； 3、会议资料较少时可在参会人员签到时分发给参会人员； 4、会议开始前3 分钟，迅速将未到场人员的水牌及资料撤收，并安排靠后人员填补空位。 二、会议中 （一）会议记录及服务 1、安排好专职的会议记录员，对参会人员的发言及电子资料进行记录和拍照，允许时准备好U盘进行拷贝； 2、提前通知广告部做好现场摄影准备，会后留底； 3、安排1 人（会议组织人员或行政部人员）负责茶水服务。 （二）其他注意事项