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禽流感(编制说明)

禽流感(编制说明)
禽流感(编制说明)

《禽流感病毒分型基因芯片检测操作规程》编制说明

一、任务来源

本标准由国家认证认可监督管理委员会《2007年国家标准制定和修订项目》下达任务,项目序号20072034-T-326,编写单位为中国检验检疫科学研究院。

二、制定本标准的目的和意义

1.禽流感的危害

禽流感是国际兽疫局(OIE)确定的A类动物疫病,并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单。禽流感的爆发一直是困扰全球养禽业的一个难题,尤其是高致病性禽流感可导致高达100%的发病率和死亡率,并可感染人并致人死亡。从1959年第一次报道H5亚型的高致病性禽流感暴发以来,高致病性禽流感共有24次较大的流行,其中19次是在家禽中爆发,且每次都带来重大经济损失。禽流感的暴发几乎波及世界各地。多个国家先后爆发禽间高致病性禽流感疫情,并且出现人间禽流感疫情,全球共有近400多人感染禽流感,病死率达51.7%。禽流感的爆发不仅给世界各国的畜牧生产和国际贸易带来了巨大的经济损失,而且严重威胁着人类健康。截至2008年2月26日,全国有新疆、辽宁、四川、广东、广西、江西、湖南、湖北、浙江、安徽、江苏等省市和地区发生人感染禽流感病事件,导致18人死亡。对此,各种新闻媒体进行了连篇累牍的报道,香港、澳门等地区高度关注,部分贸易国和地区也采取了相应的限制措施。

禽流感(Avian Influenza,AI)是由流感病毒属的A型流感病毒(Influenza virus A)引起的禽类感染和疾病的总称。禽流感病毒为正黏病毒科(Orthomyxoviridae)的A型流感病毒,A型流感病毒血清型众多,有16个HA(hemagglutinin)亚型和9个NA(neuraminidase)亚型,其核酸有8个基因组片断,可随机互相交换,因此,抗原变异性强,不断发生抗原飘移和抗原转变,不同亚型、不同分离株病毒的差异很大,低致病性的也有可能转变为高致病性的,宿主范围又广范,各亚型间几乎没有交叉保护性,使得禽流感难以控制和频繁暴发。目前在全世界各种家禽和野生禽类中,已分离到上千株禽流感病毒。

2. 制定禽流感病毒分型基因芯片检测方法标准的背景和要求

禽流感疫情的发生,使各个贸易国家及国际组织极其关注,对我国经济和社会发展造成了重大影响,国家有关领导对禽流感疫情高度重视,在调查了疫情以后,立即采取了相关应急措施,并将此次疫情的发生情况及采取的应急措施向有关贸易国进行了通报,要求加强对禽流感快速检测技术的研究,增加对禽流感的检疫检测,并尽快制订相关的标准,防止禽流感的传入传出。

目前在禽流感检测技术方面的研究已经非常广泛而深入,作为国家标准的诊断技术与检测方法就有13项之多。但由于禽流感病毒有16个血凝素亚型和9个神经氨酸酶(NA)亚型,现有的标准都只能确定部分血凝素亚型(H5、H7、H9),而无法确定和区分禽流感病毒25个亚型,缺乏更加全面系统的监控禽流感的检测技术。禽流感病毒分型基因芯片检测技术可同时检测25个亚型,并能较早发现新的流行亚型,起到有效监控禽流感疫情的作用。目前国内外还没有禽流感病毒的基因芯片检测技术的相关行业标准与国家标准公布,因此,尽快制定禽流感病毒的基因芯片检测技术相关国家标准,规范禽流感病毒快速分型基因芯片检测方法,不仅有助于满足检疫需要,防止禽流感病毒其它亚型传入我国,而且为禽流感有效监控和新流行亚型的检测提供技术储备。

3.有关检测方法的优缺点

禽流感的主要诊断及检测方法主要包括病原学、免疫学、分子生物学三个方面:AIV的分离和HA/HI试验是经典的实验室诊断方法,结果可靠但时间太长;琼脂扩散(AGP)试验由于具有简便快速的特点,但此法的敏感性较低;中和试验(NT)准确且易操作常用于实验室诊断,但需较长的时间和花费较多的材料;荧光抗体(FA)试验具有快速、简便、易行、较敏感等特点,也常用于临床诊断;免疫酶标记技术(EIA)以酶联免疫吸附试验(ELISA)为主,尽管其重复性和稳定性有待提高,但具有快速、敏感度高(其敏感度要高于AGP试验和HI试验)的特点,常用于大批样品和血清学检测检疫。禽流感病毒的实时RT-PCR方法也具有快速敏感的特点。然而,这些方法大多是针对H5N1或H9等几个有限的亚性,这些方法无法实现多个亚型的同时区分与鉴定。基因芯片技术是20世纪90年代发展起来的融生物学、物理学、化学、计算机科学和微电子学一体的高度交叉的前沿技术。基因芯片技术不仅具有快速、敏感、特异、高通量和自动化的优点,而且通过计算机软件进行数据处理和结果判定,减少了结果判定受主观因素影响

的可能,提高了检测结果的可靠性与稳定性,其独到的优点是一次可同时鉴别诊断多个病毒或者一个病毒的多个亚型,因此,研究快速、敏感、特异的针对禽流感病毒各亚型的检测方法,以满足对禽流感病毒各亚型的检测和监测需要,解决检验检疫重大技术问题,保护我国农牧业生产安全及人体健康、促进国际贸易的顺利发展,防止情流感的传入传出,禽流感病毒快速分型基因芯片检测技术对于禽流感的防控具有重要的现实意义和应用价值。

三、标准制定原则和依据

在编写本标准过程中主要参考OIE公布的《陆生动物诊断试验和疫苗手册》2004年第五版关于2.1.14禽流感的有关章节以及在科研工作中收集的技术资料和国内外禽流感检测方法的相关资料;征求国标编写合作单位上海出入境检验检疫局、广州出入境检验检疫局、中国人民解放军军事科学院等系统内外专家意见并结合科研工作中的实践经验编制而成。

四、主要工作内容和主要试验

1 方法

1.1引物设计与合成

根据Genebank中发表的A型流感病毒不同亚型的基因组序列,应用DNAStar、Bioedit、Primer5.0和OMIGA软件分别对其分析筛选,设计了AIV 25对特异性引物和1对通用引物, 由上海生工合成。

表1 A型流感病毒基因芯片多重不对称RT-PCR引物

型别引物编号序列(5’~3’)片段长

通用PMA-06001-uf

PMA-06002-ur

TCACTTGCTTCCGTTGAGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGT

H1 PMA-06003-H1f

PMA-06004-H1r TCACTTGCTTCCGTTGAGGGGAGCAATTGAGTTCAGTATC

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGACACTCTCCTATTGTGACTG

601bp

H3 PMA-06005-H3f

PMA-06006-H3r TCACTTGCTTCCGTTGAGGTGTTACCCTTATGATGTGCC

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCCCTGTTGCCAATTTCAGAG

669bp

H5 PMA-06007-H5f

PMA-06008-H5r TCACTTGCTTCCGTTGAGGAGTGAATTGGAATATGGTAACTG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTAACTGAGTGTTCATTTTGTCAAT

380bp

H6 PMA-06017-H6F

PMA-06018-H6R TCACTTGCTTCCGTTGAGGAAGGCACTTATTGGRTCAGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGTCCTCTAGTTTCAATCTGTGG

685bp

H7 PMA-06009-H7f

PMA-06010-H7r TCACTTGCTTCCGTTGAGGTCAGGWTCTTCWTTCTATGC

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTTCYCCTTGTGCATTTTGATG

641bp

H9 PMA-06011-H9f

PMA-06012-H9r TCACTTGCTTCCGTTGAGGAAGAGAATGGTCCTACATCGT

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGGATCTTACTCGCAATGTCTG

493bp

N1 PMA-06013-N1f

PMA-06014-N1r TCACTTGCTTCCGTTGAGGTCCCACTTGGAATGCAGAAC

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCACATGCACATTCAGACTCTTG

328bp

N2 PMA-06015-N2f

PMA-06016-N2r TCACTTGCTTCCGTTGAGGATAGCATGGTCCAGCTCAAG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTACATGCTGAGCACTTCCTG

299bp

H2 PMA-06019-H2F

PMA-06020-H2R TCACTTGCTTCCGTTGAGGCGTCATTCTTCAGGAACATGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGGCCTTGTTGCTATTTCWGG

229bp

H4 PMA-06021-H4F

PMA-06022-H4R TCACTTGCTTCCGTTGAGGTTGTTAYCCATTTGATGTGCC

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGTRACTCTTCCAGGGTTGTT

324bp

H8 PMA-06023-H8F

PMA-06024-H8R TCACTTGCTTCCGTTGAGGAAGGTTGGTCATACATAGTGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGTCCTCTTACTAATGGTCTGG

444bp

H10 PMA-06025-H10F

PMA-06026-H10R TCACTTGCTTCCGTTGAGGGATTGACAAGATAAGCACCGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTTTACTYACTCTACTAGGTGCTAT

435bp

H11 PMA-06027-H11F

PMA-06028-H11R TCACTTGCTTCCGTTGAGGACTTAGAAATGTCCCAGCAA

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCATTTCCCTCGTCTTTGGC

437bp

H12 PMA-06035-H12F

PMA-06036-H12R TCACTTGCTTCCGTTGAGGAGTACAAGAACACCAGAGATT

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCTGGCCATCCGCCTTCTAT

537bp

H13 PMA-06029-H13F

PMA-06030-H13R TCACTTGCTTCCGTTGAGGGACCCTTCTGCTCCTCATG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGAAACTGATTGATTCCCCTGG

474bp

H14 PMA-06037-H14F

PMA-06038-H14R TCACTTGCTTCCGTTGAGGTCTCCCGACTAAACTGGCTA

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCTGCCGCTCTGATTCCTTAC

247bp

H15 PMA-06031-H15F

PMA-06032-H15R TCACTTGCTTCCGTTGAGGGACTCCTTGACTGAGATCTGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTAGTATCACATCTTTGTACCCAC

305bp

H16 PMA-06033-H16F

PMA-06034-H16R TCACTTGCTTCCGTTGAGGTAAACTTCTCGTGCTAATCG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGTCTTCAACTTGATCCCTTC

252bp

N3 PMA-06049-N3F

PMA-06050-N3R TCACTTGCTTCCGTTGAGGGGGAAAGARTGGATGCATGT

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTGTTGTTGATTCTCATCCAAGG

366bp

N4 PMA-06039-N4F

PMA-06040-N4R TCACTTGCTTCCGTTGAGGGGAAGCAATCGACCATGGAT

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCGACACCCATCCATTAGCAT

260bp

N5 PMA-06051-N5F

PMA-06052-N5R TCACTTGCTTCCGTTGAGGACTGTTATTGGGTAATGACG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTTGCTTGTTTTGGTCCAACCG

459bp

N6 PMA-06041-N6F

PMA-06042-N6R TCACTTGCTTCCGTTGAGGACCTAATAACAATGCTTCGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCACTCTTCTATATGCTGTGC

246bp

N7 PMA-06043-N7F

PMA-06044-N7R TCACTTGCTTCCGTTGAGGTGTGCAGAGATAAYTGGCA

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTCCGGAATAGCCTGACCAATT

352bp

N8 PMA-06045-N8F

PMA-06046-N8R TCACTTGCTTCCGTTGAGGGGGCAMTGATGTATGGATGG

TAMRA-GGTTTCGGATGTTACAGCGTAAGAATAGCTCCATCGTGCC

340bp

N9 PMA-06047-N9F

PMA-06048-N9R TCACTTGCTTCCGTTGAGGTTCTATGCTCTCAGCCAAGG

TAMRA--GGTTTCGGATGTTACAGCGTTGGCATACGCATTCAGATTC

310bp

注:Y=(C,T),W=(A,T),R=(A,G)。Note: Y=(C,T),W=(A,T),R=(A,G)

1.2 样品的处理

1.3 多重不对称扩增方法的建立

1.4 基因芯片探针的设计与合成

根据各亚型已扩增的靶序列和Genebank中发表的A型流感病毒不同亚型的序列,应用DNAStar、Bioedit和OMIGA软件,设计了基因芯片分型的52条特异性探针和3条质控探针,并由上海生工生物工程有限公司合成。

1.5 基因芯片的制备

1.5.1基因芯片设计方案

本芯片设计的微矩阵为14×9×4阵列(见图1),矩阵设计图包括5个部分:QC为点样阳性参照,8个重复位点;NC为点样buffer参照,8个重复位点;PC 为杂交阳性参照,2个重复位点;N为空白参照,2个重复位点;其它位点为检测探针,25个亚型52条特异性探针,每条探针2个重复位点。

图1 芯片点样矩阵图

QC质控探针PC阳性探针 NC点样buffer对照 N空白对照

DP(H1-16,N1-9) 检测探针

1.5.2 基因芯片点样

1.6 基因芯片杂交与洗涤

1.6.1基因芯片杂交

取杂交缓冲液6μL,1.4中的多重不对称扩增产物5μL,质控探针1μL(4μM)混匀,95℃变性5min,立即冰浴3min;用移液器吹打均匀后取样品杂交液7μL于芯片点样区,放入杂交盒,52 ℃水浴,杂交2.5 hr。

1.6.2基因芯片洗涤

杂交完毕,将杂交盒水平拿出,立即将芯片取出,放入预热至45℃的洗涤液I(2×SSC,0.1%SDS)中,100 rpm洗涤5min。取出芯片放入45℃的洗涤液I中再洗一次。取出芯片,放入预热至45℃的洗涤液II(0.2×SSC,0.1% SDS),100 rpm洗涤5min,洗涤两次。取出芯片,放入洗液III(0.2×SSC),100 rpm 室温洗涤5min。将芯片在无水乙醇中浸提几次,然后把芯片放入芯片盒中,1000 rpm/min离心5min甩干。

1.7 基因芯片扫描与结果判读

将芯片插入PerkinElmer ScanArray Gx plus扫描仪中进行扫描分析: Wavelenghth,532 nm;PMT60%;Power,90%;Brightness,93;Contrast,96,扫描1-2次。扫描结果用Tiff图片保存。

当QC和PC位点都有绿色荧光信号,且NC位点没有荧光信号时,芯片检测结果为有效结果。根据图1的亚型分布进行读判,同一条探针出现2个阳性信号者判为阳性;1个阳性信号判为可疑,进行重复试验再次读判;不出现阳性信号者判为阴性。

1.8基因芯片有效性试验

为了防止各亚型间的相互干扰,本研究首先将A型流感病毒H1N1、H3N2、H5N1、H6N2、H7N1和H9N2型多重不对称RT-PCR扩增产物等比例混合后与芯片杂交,又将全部亚型的扩增产物等比例混合与芯片杂交。

1.9基因芯片特异性试验

对AIV各亚型、IBV﹑ARV﹑IBDV、NDV、FPV、MDV等病毒核酸进行基因芯片检测。

1.10基因芯片敏感性试验

1.10.1通过病毒噬斑形成试验对接尿囊液病毒进行定量,用QIAamp Viral RNA Mini Kit提取RNA,并对其进行10倍倍比稀释,进行多重不对称RT-PCR,再进行基因芯片检测(每型AIV作3个芯片微矩阵的重复试验)。

1.10.2 取1.4中的多重不对称扩增产物采用E.Z.N.A.Cycle-Pure Kit进行纯化回收,用NanoDrop测定回收产物浓度并对其进行10倍倍比稀释,再进行基因芯片检测。

1.11基因芯片条件的优化

本研究分别进行了芯片杂交检样量(△1μL试验)、杂交温度(△2℃试验)、杂交时间(△0.5 hr试验)的优化试验。杂交上样量分别是3μL、4μL、5μL、6μL、7μL、8μL;杂交温度分别是46℃、48℃、50℃、52℃、54℃、56℃;杂交时间分别为 1.5hr、2.0 hr、 2.5hr、3.0hr、3.5hr、 4.0hr、4.5hr;对其进行优化筛选。

1.12基因芯片稳定性试验

生产出1天的和常温保存4个月后的基因芯片,各检测标准毒株5份、口岸检样395份(360份阴性,35份阳性),对基因芯片稳定性进行测试。

2. 结果

2.1基因芯片有效性试验结果

将H1N1、H3N2、H5N1、H6N2、H7N1和H9N2型病毒多重不对称RT-PCR扩增产物按比例混合进行检测和将25个亚型阳性模板扩增产物按比例混合进行芯片检测,所对应探针位点都出现了各自的检测信号(见图2和图3)。

图2 H1、H3、H5、H6、H7、H9、N1和N2亚型AIV 基因芯片杂交扫描结果

图3 25个亚型AIV 基因芯片全位点杂交扫描结果

2.2基因芯片特异性试验结果

结果,IBV﹑ARV﹑IBDV、NDV、FPV、MDV基因芯片检测结果均为阴性,除QC 和PC阳性参照有荧光信号外,其它位点均无杂交反应,为信号阴性(见图4),而AIV的每个亚型检测结果只在各自相应的位点出现阳性信号(见图5~图10),说明该基因芯片具有高度特异性。

图4 IBV﹑ARV﹑IBDV、NDV和MDV等常见病毒基因芯片检测扫描结果

图5 H1N1 AIV 基因芯片检测扫描结果

图6 H3N2 AIV 基因芯片检测扫描结果

图7 H5N1 AIV 基因芯片检测扫描结果

图8 H7N1 AIV 基因芯片检测扫描结果

图9 H9N2 AIV 基因芯片检测扫描结果

图10 单个亚型A型流感病毒基因芯片杂交扫描结果1-18 分别为H2、H4、H6、H8、H10、H11、H12、H13、H14、H15、H16、N3、N4、N5、N6、N7、N8和N9 亚型的A 行流感病毒基因芯片杂交扫描结果

2.3基因芯片敏感性试验结果

以H5N1为例,噬斑总数为 2.47×107pfu/mL,基因芯片的检测敏感度可达2.47 pfu/mL,见图11;其扩增目的片段敏感性可达2.5ng,说明该芯片具有良好的敏感性。

图11基因芯片敏感性扫描结果

2.4 基因芯片条件的优化

结果表明:取多重不对称RT-PCR扩增产物5μL,加杂交缓冲液6μL,质控探针1μL混匀,95℃变性5min,立即冰浴3min;用移液器吹打均匀后取样品杂交液7μL于芯片点样区,放入杂交盒,52℃水浴杂交2.5hr,结果比较理想。

2.5基因芯片稳定性试验结果

基因芯片生产1天后立即检测,与常温保存6个月后检测结果完全一致,阳性样品号完全吻合,结果5份标准毒株和35份口岸检样全为阳性,360份阴性口岸检样为阴性。

五、应用效果

应用本标准检测了49个地区的2677份样品,其特异性强、敏感性好、重复性高。本标准送审稿已通过行业标准专家审定。该方法操作方便可行,便于推广应用。

六、验证试验

基因芯片验证试验

对AIV参考毒株进行RNA提取(在中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部

动物流感重点开放实验室完成),然后用本标准方法进行基因芯片验证试验。

结果显示:AIV参考毒株H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H12、H14、H15、N1、N2、N3、N4、N6、N8、N9均出现较好的荧光信号,H11、H13和N5各自的一个探针信号稍弱,见图12。

图12 基因芯片验证试验扫描结果

并且本标准方法得到山西出入境检验检疫局、深圳出入境检验检疫局、内蒙古出入境检验检疫局、湖南出入境检验检疫局等4个单位的应用。

七、验证结论:

1 用所建立的禽流感病毒分型基因芯片检测方法对AIV参考毒株进行了检测。检测结果与毒株亚型完全一致。

2 本次验证试验结论与研究报告相一致。该方法特异、敏感、快速、简便,建议尽快组装试剂盒,在系统内推广应用。

综上所述,本标准以OIE指南为主要依据,根据进出口动物结核病检疫要求,参考国内外标准,制定了禽流感病毒分型基因芯片检测操作规程,是对禽流感现有标准体系的补充和完善,所规定的方法符合OIE等国际标准要求,可操作性强。

八、本标准的应用领域

本项目所制定的方法标准,适用于动物(家禽、猪、水鸟及其他哺乳动物等)和人禽流感(流感)的诊断,也可用于禽等动物产品进行禽流感病毒感染检测。应用领域包括进出境检验检疫、疫病防控、流行病学调查、食品安全监控等。

追风筝的人读书笔记4篇

追风筝的人读书笔记4篇 追风筝的人读书笔记这是一部扣人心弦的感人之作,读之,让我懂得一个人撒谎并不可怕,可怕的是撒谎的人从不感到羞愧,甚至认为理所当然;读之,让我理解在家庭和友谊、背叛和救赎之间该何去何从……它带给我的感触远远超过了所有我看过的小说加起来的。 阿米尔--小说的主人公,虽然他也曾懦弱过,害怕过,甚至为此伤害到对自己最好的朋友。但是最终他战胜了内心,战胜了自己,我想他会成为他的爸爸心目中所希望的那样,做一个真正的男子汉。哈桑,一个低等的下人,一个生来就被人取笑的人,一个可以任人打骂的仆人(要知道在那个年代的等级观念还是很高的)。可是,相对很多所谓的上层人来说他又是那么的高贵,不可侵犯。他的那句“为你,千千万万遍!”即使至死也从未违背,也让我为之肃然起敬!阿米尔的爸爸,是一个典型的阿富汗人,虽然年轻时犯过错,可是,他终其一生,都在为其赎罪,即使为了不相干的人付出生命,也从不却步…他们都是可爱的人。他们热爱生养自己的土地,即使在那时已满目疮痍,也无时无刻的不在牵挂着。我们都知道阿富汗现如今还存在各种各样的问题,可是,我相信一切都会过去,因为和平的脚步势不可挡! 在这部感人至深的小说里面,风筝是象征性的。它既可以是亲情、友情、爱情,也可以是正直、善良、诚实。其实,

每个人心中都有一只属于自己的风筝,它引领着我们不断翱翔;它带领我们走出心中的牢笼,直至完全光明! 追风筝的人读书笔记《追风筝的人》笔触清淡,表达感情温婉含蓄,叙述笔调沉静中暗含忧伤。它关注了亲情、友情与爱情,感恩与救赎,真相与谎言……在复杂变动的历史大背景下,以一种从容平和的静美心态讲述了一个枝节复杂而情节动人的故事。 作者极具功力的情节架构、叙事才能、形象塑造、对话组织、场景再现,使这部作品具有高度的思考价值和文学质感。近似于完美的细节描摹十分精确,使人情不自禁地产生身临其境的幻觉,被深深吸引而难以自拔。全部的阅读使人身心浸润其间,并时时击节感叹,让人无法拒绝自然传递的巨大感染力。 我是在飞机上读完《追风筝的人》这本书的。起初没想到情节会这么多变曲折,会随着情节的快乐而高兴,悲伤而难过,一切都是那么自然。由于坐在飞机上,很多时候表情不能那么丰富,这点还真是痛苦,早知道应该在家看这本书,想哭就哭想笑就笑,多么舒畅啊! 当我看到阿米尔舍命从暴政下救走哈桑的独子、自己的侄儿索拉博时,我明晰了“风筝”的涵义,一种感动像在我面前豁然打开一个光明粲然的世界,内心的牺牲崇拜被再次引燃,有了为一个人牺牲的精神,我想这也是一种快乐。

禽流感病毒检测方法研究进展

禽流感检测方法研究进展 郑胜男本硕21 摘要:禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病,其病毒亚型众多,宿主范围广,容易发生变异和重组,由于各亚型之间无交叉反应性,使得禽流感病毒的检测工作较为困难。目前,该病毒的检测方法主要有病毒分离鉴定、血清学方法和分子生物学方法,同时,人们也正致力于用一些新兴检测方法来检测禽流感病毒。现就禽流感病毒的检测方法做一综述。关键词:禽流感病毒;检测方法;AIV;血清;诊断;分子生物; 禽流感是由正黏病毒科、A型流感病毒属中的不同亚型引起的禽类的一种急性高度接触性传染病。目前已知禽流感病毒的血凝素包括16种亚型,[1]神经氨酸酶包括9种亚型。其中H5和H7亚型常为高致病性的禽流感病毒。 1.病原学检测方法 1 .1病毒分离与鉴定 病毒的分离鉴定是禽流感的经典诊断方法,最常用的为细胞接种和鸡胚接种法,以细胞发生病变,鸡胚死亡或培养物尿囊液具有凝集红细胞特性作为判定依据作初步鉴定,也可用针对NP的单抗,用免疫荧光染色作病毒的初步鉴定。[2]确诊还需其它辅助检测手段。其检测结果准确可靠,灵敏,极少量病毒也可检出。但其操作程序繁

杂,费用高,实验室要求高,耗时费力,周期长,检测时间需1~3 周,大面积应用推广受到较大限制。 1 .2电镜检测技术 用电镜技术或免疫电镜技术诊断禽流感病毒,可以在电子显微镜下清楚观察到粒子形态,确定病毒的有无。[3]、[4]电镜技术快速、准确,但检验结果与样品制备技术、取病材料的部位和时间有关,且本方法不能用于亚型及致病性的测定。 2.免疫学检测 2 .1血凝(HA )和血凝抑制(HI)试验 HA 和HI 简单、快速、特异性好,但是操作繁琐费时,不能用已知HA亚型的抗血清检出禽流感新的HA亚型。HI试验是WHO进行全球流感监测所采用的普及方法。[5]一般先将可疑病料接种适龄鸡胚或细胞进行病毒分离,然后用HA试验检测出培养物是否具血凝素活性,再用已知阳性血清进行HI试验来验证。[6] 2 .2琼脂扩散试验(AGP) AGP试验是用来检测A型流感病毒群特异性血清抗体,适用于鉴定所有A型流感病毒。AGP试验操作简单,既可以定性又可以定量。但敏感性差,易有有假阳性。现已在AIV快速定型双扩散法[7]基础上建立了AGP诊断试剂盒。AGP试验可以用敏感性、准确性良好的尿素- 聚丙烯酰胺凝胶电泳法作为补充或辅助诊断手段。 [8] 2 . 3乳胶凝集试验(LAT)

H7N9禽流感防控知识培训

H7N9禽流感防控知识培训 一、人禽流感基本知识 1、禽流感基本知识 禽流感是禽流行性感冒的简称,是由甲型流感病毒引起的禽类传染性疾病,容易在鸟类(尤其是鸡)之间引起流行,过去在民间称作鸡瘟。禽类感染后死亡率很高。 流感是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。流感病毒可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。其中,甲型流感依据流感病毒特征可分为HxNx共135种亚型,H7N9亚型禽流感病毒是其中的一种,既往仅在禽间发现,从未发现过人的感染情况。 2、什么是人感染高致病性禽流感? 禽流感病毒可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。 高致病性禽流感是由H5和H7亚毒株(以H5N1和H7N7为代表)引起的疾病。高致病性禽流感因其在禽类中传播快、危害大、病死率高,被世界动物卫生组织列为A类动物疫病. 人感染高致病性禽流感在《传染病防治法》中规定按甲类传染病采取预防、控制措施的乙类传染病。 二、人禽流感流行概况 1、高致病性禽流感的流行现状 1997年,在我国的香港地区,高致病性禽流感病毒H5N1型导致了18人感染,6人死亡,首次证实高致病性禽流感可以危及人的生

命。 2003年2月,香港两人感染H5N1禽流感病毒,1人死亡。 2003年2月28日,荷兰暴发H7N7型禽流感疫情。至4月,病毒感染800多家鸡场1100万只鸡。83人感染,一名男子死亡。 2004年1月,世界卫生组织确认泰国和越南11人感染H5N1禽流感病毒,其中8人死亡,但未发现人际传染。 2004年4月6日,加拿大两名养鸡工人出现感冒症状,被确诊为感染H7N3禽流感病毒。 2004年8月,越南再添三人死于H5N1病毒感染。 2004年12月,世界卫生组织报告了自9月初以来越南的首例人感染H5N1病毒病例。 2005年1月至2月,越南新发13例人感染禽流感病例,其中12人死亡。 2005年11月7日,印度尼西亚已确认9起人感染H5N1病例,其中5例死亡 2、流行病学特点 ●传染源:主要为患禽流感或携带禽流感病毒的鸡、鸽子、鸭、鹅等禽类,特别是鸡;野禽在禽流感的自然传播中扮演了重要角色。 ●传播途径:经呼吸道传播,也可通过密切接触感染的家禽分泌物和排泄物、受病毒污染的水等被感染,直接接触病毒毒株也可被感染。目前尚无人与人之间传播的确切证据。 ●易感人群:一般来说,人类呼吸道缺少与禽流感病毒特异性结合

禽流感安全常识(标准版)

( 安全常识 ) 单位:_________________________ 姓名:_________________________ 日期:_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 禽流感安全常识(标准版) Safety accidents can cause us great harm. Learn safety knowledge and stay away from safety accidents.

禽流感安全常识(标准版) 禽流感是禽流行性感冒的简称,又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,是一种由甲型流感病毒的亚型引起的传染性疾病综合症,被国际兽疫局定为A类传染病。 人类直接接触受H5N1病毒感染的家禽及其粪便或直接接触H5N1病毒也会受到感染,发病后死亡率高达60%。目前为止,世界上约有60人死于禽流感。 H5N1型禽流感病毒目前还处于由禽类传染给人的阶段。然而,如反复发作,一旦病毒基因发生变异,就有可能变成人与人之间传播的新型流感。 禽流感的临床表现 潜伏期:7天以内 早期症状:类似流感,主要表现为发热、流涕、鼻塞、咳嗽、

咽痛、头痛、全身不适等症状。 年龄较大、治疗过迟的患者会因病情迅速发展成进行性肺炎、急性呼吸窘迫综合症、肺出血、胸腔积液等多种并发症而死。 禽流感的传播途径 空气传播:病禽粪便中,以及病禽咳嗽和鸣叫时喷射出的H5N1病毒在空气中漂浮,人吸入呼吸道被感染发生禽流感。 食物传播:食用病禽的肉及其制品、禽蛋,食用病禽污染的水、食物,用被污染的手拿东西吃,都可能受到传染而发病。 接触传播:经过损伤的皮肤和眼结膜容易感染H5N1病毒而发病。 禽流感的防治 洗手: 预防疾病最好的方法是注意个人卫生,勤洗手。 熟吃: 鸡蛋和鸡肉一定要煮熟后食用。 不吃半熟的白斩鸡、醉鸡、半熟的鸭鹅肉,不吃半熟鸡蛋。 到正规场所购买经过检疫的禽类制品,不自行宰杀食用。

《追风筝的人》读书笔记1000字

《追风筝的人》读书笔记1000字 追风筝的人读后感 《追风筝的人》围绕一个不爱说话、憨厚老实的少年仆人哈桑与他的少年主人懦弱的阿米尔之间的友情故事展开的。 哈桑肤色如泥巴,鼻子很扁受到了当地其他富少年的欺凌,然而阿米尔与哈桑之间渐渐有了隔阂。 我喜欢卡勒徳笔下的喀布尔的冬天,他说:“冬天是喀布尔每个孩子最喜欢的季节,至少那些家里买得起一个暖和铁炉的孩子是这样的。”他们有一年一度的冬天风筝比赛,阿米尔想借此机会改变父亲对自己的印象,这不仅为了夺回属于自己的爱,也是作为主人对仆人的尊严。在哈桑的帮助下,阿米尔赢得了比赛哈桑在追回被割掉的风筝时被其他富家少年困在角落里施以暴力时,阿米尔—哈桑最信任的朋友,却蜷缩在阴暗的角落里默默注视,直到泪流满面却仍不敢挺身而出帮助哈桑。阿米尔的懦弱让他不敢直视哈桑,最后他决定栽赃哈桑,让他永远离开了这个家。阿米尔就是如此的自私和懦弱。 到后来阿米尔获知哈桑是自己的同父异母的兄弟时,他内心悔恨与伤痛纠结。当中年的阿米尔偶然得知哈桑的消息,他却不顾危险,前往战乱的阿富汗救赎哈桑的儿子索拉博。此时的阿米尔是勇敢的。 这让我体会到人总有丑陋的一面,”丑陋总是与美好如影相随,在美的背后,丑正探出半张脸庞。 第二篇:《追风筝的人》读书笔记 《追风筝的人》读书笔记 由于时间的问题,这本书的前半部分是陆陆续续看完的,而今天周六,便抽了一天地时间看完了后半部分。锁在自己的房间里,没有任何人的打扰,于是一直沉浸在故事里,至动情处,或感动,或惋惜,或悲伤,几度泪盈满框,甚至哽咽的喘不上气。在索拉博自杀的那个情节,我瞬时捶胸顿足,没有刀光剑影,却可以把一个人伤那么深,那是摧毁了一个人对未来的所有希望,我恨作者怎么可以写的那么残忍。千万别去辜负对一个孩子的承诺。它比任何瓷器都脆弱且难以修补,索性故事的结果还是给我读者希望,可能风筝是帮助阿米尔和索拉博再次取得信任的线。 这个的背景是我从不曾了解的一个国家,关于这个国家所经历的所有战乱和动荡,或许我都一无所知。但是却非常享受按着这个故事轨迹所经历的这场难忘的旅途。当生活安宁时,作者描写的笔触细腻而美好,能把人拉回一个纯真无邪的童年时代,而如果一个人的童年真的纯净的像蒸馏水,似乎太过理想,谁的童年没有几个难以启齿的略显卑劣的小秘密,阿米尔的童年时胆小懦弱的,于是一直在寻找自我救赎的机会,再次成为好人的计划。一步一步,终成为一

人感染H7N9禽流感培训试题及答案

人感染H7N9禽流感知识培训试卷科室:姓名:成绩: 一、填空题: 1、H7N9禽流感传染源是携带H7N9禽流感病毒的禽类及其分泌物或排泄物, 传播途径是呼吸道、密切接触。 2、H7N9禽流感一般表现为流感样症状,如发热,咳嗽,少痰,可伴有头 痛、肌肉酸痛和全身不适。 3、人感染H7N9禽流感病原体是由H7N9亚型禽流感病毒引起的染病急性呼 吸道传染病传染病。 4、H7N9禽流感的诊断主要依靠实验室检查.对临床诊断和确诊患者应进行隔 离治疗。应尽早应用抗流感病毒药物如:奥司他韦、扎那米韦等。5、H7N9禽流感重症患者病情发展迅速,表现为重症肺炎,体温大多持续在 39 ℃以上,出现呼吸困难,可伴有咯血痰;可快速进展出现急性呼吸窘 迫综合征、纵隔气肿、脓毒症、休克、意识障碍及急性肾损伤等。 二、选择题: 1.发热门诊医务人员在诊疗工作中应当遵循:(A C D ) A.标准预防原则。 B.接触所有患者时均应当戴医用防护口罩 C.严格执行手卫生等措施。 D.接触疑似患者或确诊患者时应当戴医用防护口罩。 2.对疑似或确诊患者采取措施:(A D ) A.及时进行隔离。 B.病情允许时,患者应当戴外科口罩 C.陪伴者应当戴外科口罩。 D.指导患者注意呼吸道卫生及手卫生。 3.为控制疫情的传播、蔓延,医务人员做到:(D ) A.早发现、早报告、早诊断、早治疗 B.早发现、早诊断、早隔离、早治疗 C.早发现、早报告、早诊断、早转院、早治疗 D.早发现、早报告、早诊断、早隔离、早治疗 4、诊断病例同时具备以下条件的:(B C) A.发热(腋下体温≥38℃)。 B.具有肺炎的影像学特征。 C.发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少。 D.经规范抗菌药物治疗3~5天后,病情无

如何预防禽流感 教案

如何预防禽流感教案 3 一教学目标了解什么是禽流感怎么样预防 二教学重难点预防禽流感 三教学内容 1、什么是禽流感? 禽流感是禽流行性感冒的简称,是由甲型流感病毒引起的禽类传染性疾病,容易在鸟类(尤其是鸡)之间引起流行,过去在民间称作鸡瘟。禽类感染后死亡率很高。 2、什么是人感染高致病性禽流感? 禽流感病毒可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。其中高致病性禽流感是由H5和H7亚毒株(以H5N1和H7N7为代表)引起的疾病。高致病性禽流感因其在禽类中传播快、危害大、病死率高,被世界动物卫生组织列为A 类动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。高致病性禽流感H5N1是不断进化 的,其寄生的动物(又叫宿主)范围会不断扩大,可感染虎、家猫等哺乳动物,正常家鸭携带并排出病毒的比例增加,尤其是在猪体内更常被检出。 3、人是怎样感染上禽流感的? 禽流感病毒可通过消化道和呼吸道进入人体传染给人,人类直接接触受禽流感病毒感染的家禽及其粪便或直接接触禽流感病毒也可以被感染。通过飞沫及接触呼吸道分泌物也是传播途径。如果直接接触带有相当数量病毒的物品,如家禽的粪便、羽毛、呼吸道分泌物、血液等,也可经过眼结膜和破损皮肤引起感染。4、人感染高致病性禽流感患者有哪些表现? 人类患上人感染高致病性禽流感后,起病很急,早期表现类似普通型流感。主要表现为发热,体温大多在39℃以上,持续1~7天,一般为3~4天,可伴有 流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛、全身不适,部分患者可有恶心、腹痛、腹泻、稀水样便等消化道症状。除了上述表现之外,人感染高致病性禽流感重症患者还可出现肺炎、呼吸窘迫等表现,甚至可导致死亡。 5、防治人感染高致病性禽流感的关键是什么? 防治人感染高致病性禽流感关键要做到“四早”,指对疾病要早发现、早报告、 早隔离、早治疗: 早发现:当自己或周围人出现发烧、咳嗽、呼吸急促、全身疼痛等症状时,应立即去医院就医。

追风筝的人读书笔记9篇(2)

追风筝的人读书笔记9篇(2) 追风筝的人读书笔记9篇(2) 追风筝的人读书笔记4 前不久,和朋友在定王台买了几本书,开始犹豫不决,不知道买什么书,纠结了大半天终于买了两本卡勒德胡赛尼的书。 初读这本书感觉不怎么读得懂,后来,才发现是没有用心去阅读。《追风筝的人》这本书交织着爱,恐惧,愧疚……12岁的阿富汗富家少爷阿米尔与仆人哈桑情同手足。然而,在一场风筝比赛后,发生了一件悲惨不堪的事。 阿米尔为自己的懦弱感到自责和痛苦,无法面对哈桑,于是用计逼走了哈桑。不久阿富汗爆发战争,阿米尔被迫与父亲逃亡美国。成年后的阿米尔始终无法原谅自己当年对哈桑的背叛。为了赎罪,阿米尔再次回到故乡,希望能为不幸的好友尽最后一点心力,却发现一个惊天谎言,儿时好友竟然是和自己同父异母的兄弟,为了救赎,他把哈桑的儿子带到美国,在一次聚会上,阿米尔再次放起了风筝。阿米尔与哈桑从小一起长大,哈桑对阿米尔呵护极致,两人的父亲也是好兄弟,实际上他们是主仆关系,但是却丝毫没有影响他们俩的感情,相反这种感情得到了延续,哈桑和阿米尔感情特别深,但是因为哈桑是仆人,妈妈抛弃了自己,经常受到同龄人的讥笑,而阿米尔因为有出色的父亲备受大家关心。

一次阿米尔与哈桑遇到一群朋友,那些人被哈桑指指点点,阿米尔在一旁观望,从小的好兄弟被人欺负,阿米尔竟然无动于衷,哈桑为了保护阿米尔经常受人欺负。他一点也不害怕坏人,他很勇敢。随即这引起了阿米尔的嫉妒之心,父亲对哈桑的赞赏与期许更令阿米尔厌恶。他设计把哈桑赶出家门。 哈桑被阿米尔这个好兄弟抛弃,远离了他们的生活,多少年过后,阿米尔知道哈桑是自己的兄弟,他很愧疚于是四处寻找哈桑,找到哈桑又能怎么样,感情再也不能像以前一样了,好朋友的背叛,无疑是对哈桑的巨大打击。 友情这么脆弱,因为身份的差距,因为嫉妒心,竟然被抛弃,阿米尔的愧疚是一辈子的,他与哈桑那放风筝的日子已经远去,断了线的风筝再也不可能回到原点。哈桑依旧,只是他的脸上少了笑容,剩下的只有空洞的眼神。可见阿米尔对友情的背叛给哈桑那个留下了多大的阴影,这一辈子都不可能再愈合。 生命就是那一片天空,或鲜红或湛蓝。望着远方的风筝,我们追寻,我们仰望,在追风筝的路途中,我们诠释一整个世界。这途中,有沟壑,有山坡;有彷徨,有疲乏。可是,没有人会停下前进的脚步,因为,我们都是追风筝的人。 风筝来来回回,可放风筝的人不再是原来的摸样。 追风筝的人读书笔记5 也许每个人心中都有一个风筝,无论它意味着什么,让我们勇敢地追,让我们一起追寻那人格的风筝。 12岁的阿米尔是一位阿富汗的富家少爷。他本与仆人哈桑手足

健康教育培训材料

健康教育培训材料 禽流感防治知识 一、禽流感的意义 人感染高致病性禽流感,是乙类法定传染病。禽流感是由禽流感病(如:H5N1,H9N2)引起的一种急性传染病,也能感染人类引起发病。人感染禽流感后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等,多数伴有严重的肺炎,严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡,病死率很高,被世界动物卫生组织列为A类动物传染病。 二、禽流感防制相关知识 (1)禽类得禽流感有哪些常见症状? 病鸡精神沉郁,饲料消耗量减少,消瘦,母鸡的就巢性增强,产蛋量下降,轻度直至严重的呼吸道症状,包括嚷嗽,打喷嚏和大量流泪;头部和脸部水肿,神经紊乱和腹泻.这些症状中的任何一种都可能单独或以不同的组台出现。 (2)人类患上禽禽流感有哪些常见症状, 人灯患上禽流感后,潜伏期一般为7天以内,早期症状与其他流感非常相似,主要表现为发热、流涕,鼻塞,咳嗽,咽痛,头痛,全身不适等症状。大多数患者愈后良好,病程短,恢复快。

且不留后遗症,但少数患省特别是年龄较大,治疗过迟的患者病情会迅速发展成进行性肺炎,急性呼吸窘迫综合征、肺出血,胸腔积液并发症而死亡。 (3)吃鸡,鸭,鹅会被传染吗? 禽肉煮熟煮透后,病毒传播的可能性较小.但如果病禽未经煮熟煮透食用,病毒很可能进入人体。病毒进入人体存活,会否通过消化道传入人体各组织中,病毒在人体是如何运作的.这些机理现在都还不清楚。 (4)如何有控制禽流感? 在禽流感暴发后,快速果断地将病禽扑杀.同时进行消毒,隔离是控制禽流感蔓延的最有效方式。专家指出:防止禽流感蔓延措施必须坚决彻底,香港1997年发生禽流感后,三天之内宰杀150万只鸡,使禽流感得以抑制。 为了不留隐患,除了扑杀感染禽流感的鸡之外.对农村小规模的养鸡场和的鸡也应给予充分注意。 (5)人类怎样防治禽流感? 首先是阻止禽流感在家禽中的进一步传播.这可减少人接触H5N1的机会。有可能接触感染家禽者应接种疫苗。其次,接种能有效控制目前正在传播的人流感病毒株疫苗.可减少人流感病毒株和禽流感病毒株混合.接触者必须采取保护措施预防感染如穿隔离衣和服用抗病毒药等.只要人们尽量避免与病禽接触感染禽流感的可能性是很小的.控制住禽

2017人感染H7N9禽流感诊疗及防控知识培训试题答案

2017人感染H7N9禽流感诊疗及防控知识培训试题答案 下面为大家带来的是2017人感染H7N9禽流感诊疗及防控知识培训答案,希望对大 家有帮助~ 一、填空题:(50分,每空1.25分): 1、禽流感病毒属(正粘病毒科甲型流感)病毒属。人感染H7N9禽流感是由(H7N9亚 型禽流感病毒)引起的急性呼吸道传染病。 2、可感染人的禽流感病毒亚型为(H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3 )。 3、禽流感病毒普遍对( 热 )敏感,对低温抵抗力较强,65℃加热( 30分钟 )或煮沸100℃( 2分钟)以上可灭活。 4、人感染H7N9禽流感传播途径为( 呼吸道传播 ),也可通过( 密切接触感染的禽类 分泌物或排泄物,或直接接触病毒 )感染。 5、人感染H7N9禽流感高危人群( 在发病前1周内接触过禽类者 ),例如( 从事禽类 养殖、贩运、销售、宰杀、加工业等人员 )。 6、根据流感的潜伏期及现有H7N9禽流感病毒感染病例的调查结果,潜伏期一般为( 7天以内 )。 7、神经氨酸酶抑制剂奥司他韦(Oseltamivir)治疗人感染H7N9禽流感,成人用法为 剂量( 75mg )每日( 两次 ),重症者剂量( 可加倍 ),疗程( 5—7天 )。1岁及以上年龄的儿 童患者应根据体重给药:体重不足15Kg者,予(30mg),每日2次;体重15-23Kg者,予(45mg),每日2次;体重不足23—40Kg者,予( 60mg ),每日两次;体重大于40Kg者, 予( 75mg ),每日两次。对于吞咽胶囊有困难的儿童,可选用( 奥司他韦混悬液 )。 8、体温正常,临床症状基本消失,呼吸道本人感染H7N9禽流感病毒核酸检测(连续 2次阴性 ),可出院。 9、人感染H7N9禽流感,抗病毒药物使用原则:(1)在使用抗病毒药物之前应( 留取 呼吸道标本 );(2)抗病毒药物应尽量在发病( 48小时 )内使用。 10、各级各类医疗机构发现符合监测定义的病例后,须于( 24小时)内进行网络直报。发现人感染H7N9禽流感疑似病例、确诊病例后,应当于( 2小时 )内进行网络直报。报 告疾病类别选择( 其他传染病 ),并在备注栏中注明( 人感染H7N9禽流感疑似病例或者确 诊病例 )。

预防流感知识讲座

预防流感知识讲座 1、什么是流感? 流行性感冒,简称流感,是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,最常见的流感起病突然,畏寒、寒战、高热,体温可达39~40度,伴头痛、全身肌肉关节酸痛、极度乏力、食欲减退等全身症状,常伴有咽喉痛、干咳、鼻塞、流涕等。如无并发症,多于发病3~4天后症状好转,但咳嗽,体力恢复常需要1~2周。轻症者如普通感冒,症状轻,2~3天可恢复。 2、什么是禽流感? 什么是H7N9禽流感?禽流感主要是指禽中流行的由流感病毒引起的感染性疾病。禽流感病毒可分为高致病性禽流感病毒、低致病性禽流感病毒和无致病性禽流感病毒。高致病性禽流感病毒目前只发现H5和H7两种亚型。由于种属屏障,禽流感病毒只在偶然的情况可以感染人。流感病毒可以分为甲(A)、乙、丙型。其中,甲型流感依据流感病毒特征可分为HxNx共135种亚型,H7N9亚型禽流感病毒是其中的一种,既往仅在禽间发现,未发现过人的感染情况。目前出现的病人,是全球首次报告人感染H7N9病毒病例。经对病人的密切接触者医学观察结果,未提示该病毒具有较强的人传人能力。 3、人感染H7N9禽流感感染病例的主要临床表现? 目前确诊病例主要表现为典型的病毒性肺炎,起病急,病程早期均有高热(38度以上),咳嗽等呼吸道感染症状。起病5~7天出现呼

吸困难,重症肺炎并进行性加重,部分病例可迅速发展为呼吸窘迫综合症并死亡。目前对该疾病临床特征的认识还有限,该病毒感染能否引起轻型病例或其他临床表现尚不清楚。随着更多的病例信息的积累,对该病的认识将会发生变化。 4、本次人感染H7N9禽流感的病例的感染来源? 此次人感染的H7N9流感病毒从病毒生物学上属于禽源流感病毒,既往国际上所发现的人感染H7亚型的流感病毒也多来自于禽类,但截至目前,确诊病例的具体感染来源尚不清楚。 5、H7N9禽流感病毒是否能够在人与人之间传播? 目前尚未证实该病毒具有人传播人的能力。 6、如何预防H7N9流感? 目前国内外尚无针对H7N9禽流感的疫苗。市民预防禽流感,是养成良好的卫生习惯和健康生活方式,也能够有效预防流感等呼吸道传染疾病。(1)保持室内空气流通,注意个人卫生,勤洗手、咳嗽和打喷嚏时遮掩口鼻,清洁口鼻后应及时洗手。(2)尽可能减少与禽类不必要的接触,不购买无卫生检疫的活禽。应避免接触和食用病(死)禽、畜。(3)买回家的禽类制品要洗净,烧熟后方可食用,加工时要注意手部是否有伤口,如有伤口应带橡皮手套操作。(4)加强体育锻炼,注意补充营养,保持充足的睡眠和休息,以增强抵抗力。(5)不要轻视重感冒,禽流感的病症与其他流行性感冒病症相似,如发烧、头痛、咳嗽及喉咙痛等,在某些情况下,会引起并发症,导致患者死亡。因此,若发现发热、头痛、鼻塞、咳嗽、

追风筝的人读书笔记

追风筝的人 “为你,千千万万遍!”你能想象一个患有兔唇的孩子,一个生活在阿富汗社会底层的遭人轻视的仆人是如何用自己的一生来履行他对友谊的这份承诺吗.? 这本小说讲述了12岁的阿富汗富家爷阿米尔与仆人哈桑情同足。然而,为了赢得父亲的赞赏,他眼睁睁地看着为他不顾一切的哈桑遭人凌辱,自己选择了逃避。而后,阿米尔又为自己的懦弱感到自责痛苦,为了减少这份痛苦,他又逼走了哈桑。不久,自己也跟随父逃往美国。成年后的阿米尔无法原谅自己当年对哈桑的背叛,于是他再度踏上了久违二十多年的故乡,却发现一个惊天谎言… 人们说陈年往事可以被埋葬,因为时间是治疗一切的良药。然而事实并非如此,他们总是在不经意间爬上心头,回首前尘,记忆总是会在某个特别的地方停留。 风筝是童年美好回忆的象征,可是在这儿却也带来一段不堪的过去。孩童时的我们都有这样的渴望,总希望成为人们口中赞赏的对象,尤其是我们的双亲,然而父母对别的孩子的赞赏也总会遭到我们的妒忌,也可以说是我们内心的自卑。为此,我们会耍一些阴暗的小手段打压对手,获得关注的目光。阿米尔就是这样的一个孩子,一个折射我们内心的影子。他喜欢卖弄哈桑听不懂的词语,为了追回风筝赢得爸爸的肯定他选择“他只是个哈扎拉人”这样的带着种族歧视的认知来自我麻痹,放弃了他本应该担当的责任。也正是这种对责任的放弃,他品尝了一生的悔恨。在做错事的情况下,我们又何尝不是选择找借口来推卸责任呢!可是,最终我们还不是和阿米尔一样品尝了后悔的滋味,总想找到赎罪的方式来弥补心里的缺陷。 哈桑是这本书的另一个主人公,他深受阶级,宗教的精神迫害。可是他也是这本书书的光辉所在。他的母亲抛弃了他,自身哈扎拉人的血统到处遭人歧视,这本应该是个对生活丧失信心的人,可他却能说出“为你,千千万万遍”这样感情丰富的话来。这不仅仅是表达了对主人的忠心,更是对友谊最完美的诠释。可见他对生活充满希望,友情满含期待。我们短暂的一生有多少朋友能够对我们说出并履行这样的承诺呢!哈桑学会的第一句话就是“阿米尔”,他为阿米尔敢于站出来对抗身材最魁梧的阿塞夫,为他能赢得爸爸的赞赏放弃祷告而去追风筝。他被侮辱时,一直都知道阿米尔就躲在旁边,他却选择了沉默。在知道阿米尔设计陷害他盗窃时,他选择跳进这个陷阱。也许有人会说他愚忠。但是我看到的是一颗对亲如兄弟朋友的主人一颗真挚般的心。他为了不让阿米尔活在不安与愧疚中,他依然选择离开。我们都渴望有这样的一位朋友为我们付出,渴望收获一份真挚的友谊,却不知自己又为朋友做过什么。 在这里,另一个感动我的人物是阿米尔的父亲,他可以说是一个真真的铁汉子。他对自己的孩子苛刻,是为了让他更好的成长;他敢于和侵略家园的士兵言辞力争,只为了一个陌生的女人;他宁愿挨饿也不愿意接受俄国人的帮助,只因为他们的同胞是家园的侵略者;他为了孩子的未来,愿意从阿富汗的富人沦落为美国一个加油站的工人。这是一个光辉的父亲形象。在那片战火纷飞的废墟上一个勇敢的战士。 阿米尔虽然在美国结了婚,过上了远离战争的生活,可是他内心深处却始终带着对哈桑的愧疚。于是,在良心的谴责下,他选择面对自己的过去。回到那个带着创伤的故土,赎罪。等待他的却是一个震惊的消息,原来哈桑是自己同父异母的兄弟,并且已经被战争吞噬,于是阿米尔选择照顾哈桑的儿子索拉博,这个遭受战争毒害,满眼惊恐的侄子。他面无表情,只有风筝才能唤起他的回应。 《追风筝的人》不仅仅是亲情,友情的概述,更折射出我们似曾相识的心绪,比如伤害别人的快感和疑虑,危机关头的懦弱无助,亲人面临危险时的慌乱无措,失去亲人时的悲伤孤独,应该担当责任时的自私推诿,以及时常涌上心头的自责,自卑和赎罪的冲

人民医院人感染HN禽流感诊疗方案

人民医院人感染H N禽流感诊疗方案 集团标准化工作小组 [Q8QX9QT-X8QQB8Q8-NQ8QJ8-M8QMN]

人感染H7N9禽流感诊疗方案(2014年版) (2014年版) 人感染H7N9禽流感是由H7N9禽流感病毒引起的急性呼吸道传染病,其中重症肺炎病例常可合并急性呼吸窘迫综合征、感染性休克,甚至多器官功能衰竭。早发现、早报告、早诊断、早治疗,加强重症病例救治,注意中西医并重,是有效防控、提高治愈率、降低病死率的关键。 一、病原学? 禽流感病毒属正粘病毒科甲型流感病毒属。甲型流感病毒颗粒呈多形性,其中球形直径80~120nm,有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素(H)和神经氨酸酶(N)蛋白抗原性不同,目前可分为16个H亚型(H1~H16)和9个N亚型(N1~N9)。禽甲型流感病毒除感染禽外,还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、 H7N3等,此次为H7N9禽流感病毒。该病毒为新型重配病毒,编码HA的基因来源于H7N3,编码NA的基因来源于H7N9,其6个内部基因来自于H9N2禽流感病毒。 禽流感病毒普遍对热敏感,对低温抵抗力较强,65℃加热30分钟或煮沸(100℃)2分钟以上可灭活。病毒在较低温下可 存活1周,在4℃水中或有甘油存在的情况下可保持活力1年以上。 二、流行病学 (一)传染源。目前已经在禽类及其分泌物或排泄物以及活禽市场环境标本中检测和分离到H7N9禽流感病毒,与人感染H7N9禽流感病毒高度同源。传染源可

能为携带H7N9禽流感病毒的禽类。目前,大部分为散发病例,有个别家庭聚集发病现象,但尚无持续人际间传播的证据。 (二)传播途径。具体途径可经呼吸道传播或密切接触感染禽类的分泌物或排泄物而获得感染;或通过接触病毒污染的环境传播至人;不排除有限的非持续的人传人。 (三)高危人群。在发病前1周内接触过禽类或者到过活禽市场者,特别是老年人。 三、发病机制和病理 H7N9禽流感病毒可以同时结合唾液酸α-2,3型受体(禽流感病毒受体)和唾液酸α-2,6型受体(人流感病毒受体),较H5N1禽流感病毒更易与人上呼吸道上皮细胞(唾液酸α-2,6型受体为主)结合,相对于季节性流感病毒更容易感染人的下呼吸道上皮细胞(唾液酸α-2,3型受体为主)。H7N9禽流感病毒感染人体后,可以诱发细胞因子风暴,导致全身炎症反应,可出现ARDS、休克及多脏器功能衰竭。个别重症病例下呼吸道病毒可持续阳性至病程的3周以上。 四、临床表现 根据流感的潜伏期及现有人感染H7N9禽流感病例的调查结果,潜伏期一般为7天以内。 (一)症状、体征和临床特点。患者一般表现为流感样症状,如发热、咳嗽、少痰,可伴有头痛、肌肉酸痛、腹泻等全身症状。重症患者病情发展迅速,多

人感染H7N9禽流感健康教育

人感染H7N9禽流感健康教育1.禽流感的高危人群是哪些人? 根据有关人禽流感感染的资料,但一般认为有几类人比较容易被感染,他们是:12岁以下儿童、老人、与家禽(尤其是病禽)有密切接触的人群。其中,与患禽流感的家禽密切接触人员感染的危险性最大。12岁以下儿童发病率较高,病情较重。患有慢性心血管疾病、哮喘、肾功能不全等慢性疾病的老年人,感染了禽流感后,病情重,死亡率高。 2.如何预防H7N9流感? 流感是一种急性呼吸道感染性疾病。尽管感染的来源及传播模式尚不能确定,但采取以下基本卫生行为可起到一定的预防效果,包括手部卫生、呼吸卫生、食品安全措施。 (1)手部卫生: 在准备食物前、中、后;吃东西之前;使用卫生间之后;处理动物或者动物排泄物;手脏时;照顾家中病人时要洗手。 当手部明显肮脏时,用肥皂和流水清洗。如非明显肮脏,用肥皂和水洗手或者使用酒精洁手液洗手。 (2)呼吸卫生: 在咳嗽或打喷嚏时,用医用口罩、纸巾、袖子、肘部遮盖口鼻,用过的纸巾在使用后尽快扔入有盖垃圾箱,在接触到呼吸道分泌物后采取手部卫生措施。 (3)饮食安全:

进食禽肉蛋类要彻底煮熟,加工、保存食物时要注意生、熟分开,不生吃家禽家畜的禽肉内脏,煮蛋时蛋白蛋黄要变得坚实方可实用。病死家禽不得食用。 3.有针对甲型流感(H7N9)病毒的疫苗吗? 目前没有防止甲型流感(H7N9)病毒感染的疫苗。不过,H7N9病毒已经在最初的病例中被分离。研发疫苗的第一步是选择可以制作成疫苗的候选病毒。 4.日常生活中公众如何保护自己? 保持勤洗手、咳嗽和打喷嚏时遮掩口鼻等个人卫生习惯,能够有效预防流感等呼吸道传染疾病。同时还应避免接触病死禽、畜。 人感染禽流感主要是通过与病死禽类的密切接触,一般公众这种机会很少,感染的机会并不多。但在日常生活中还应注意以下几方面: (1)应尽量避免与禽、鸟类不必要的接触;特别是儿童应避免密切接触家禽和野禽。 (2)注意饮食卫生,进食禽肉、蛋类要彻底煮熟,不要吃生的或者半生的鸡蛋;加工、保存食物时要注意生熟分开;养成良好的卫生习惯,搞好厨房卫生,在加工处理禽、蛋类后要彻底洗手。 (3)不要购买活禽自行宰杀,要购买经过检疫、加工的禽肉制品。

追风筝的人读书笔记四篇

追风筝的人读书笔记四篇 导读:《追风筝的人》里哈桑的那句“为你,千千万万遍”感动了许多人,那是他的忠诚,勇敢和善良,虽然被侮辱被陷害也依然保持着这份纯洁,而阿米尔也为年少时做的错事救赎,人性的丑恶和善美都让人觉得荡气回肠,也是这部小说风行的一个重要原因吧下面是的追风筝的人,欢迎阅读! 我时常幻想自己是未来的,这样,有一天我面对未来某一时刻的突然变化,就会更从容,面对陈年往事也会更慷慨。但,我更适合平庸,如寻常人一样琐碎繁杂的生活,对时间的细枝末节斤斤计较。 既然无法预知未来,那么人更多的开始依赖回忆,甚至靠那些零星琐碎的回忆支撑往后的日子,有些回忆很美好,有些回忆很心酸,有些回忆让人长大,有些回忆让人显得很无知,有些回忆慢慢泛黄,有些回忆仿佛就在昨天。有些故事也总是从儿时的回忆展开。 我对阿富汗以及周边连年征战的国家和他们的历史毫无兴趣,对我而言,那里的人民是可怜的,那里的政府是可悲的,所以当《追风筝的人》这个故事一点一点展现在我面前的时候,我并没准备好接受一个平静的,也曾春暖花开,羊肉串香飘整条街的画面,更没想到那里的孩子也可以无忧无虑的追逐风筝。 所以当身为少爷的阿米尔和他的仆人哈桑情同手足的画面一出现,所有读者不禁感叹,少年时的友谊是那么充满力量,干净而持久的。他们总是并肩而行,每当阿米尔被人欺负的时候,哈桑总是义无

反顾的站出来保护,很多人说这是哈桑天生的奴性,这种观点我不赞同,我看见他们之间分明有一道友谊的光芒在闪耀。 当阿米尔问哈桑为什么确定自己一定会知道被切断绳线的风筝 的掉落地的时候,哈桑肯定的对阿米尔说,我就是知道,然后反问,我什么时候骗过你。阿米尔轻声说,我怎么知道有没有骗过我。哈桑发誓,为了你,我宁可啃烂泥。阿米尔进一步确定,你真的会为我啃烂泥?哈桑坚定的说,我肯定,然后又说,但是你又怎么能忍心让我啃烂泥。所以读者心中所向往的也就是我们每个人心中那个潮湿的童年印象,总是和自己最亲密的伙伴,席地而坐,互相盟誓,发誓为对方,甘愿上刀山下火海。就如同哈桑洋溢着笑脸对阿米尔说的那样:为你,千千万万遍。 然而事实上却是这样的:他是主人,他是仆人;他是普什图, 他是哈扎拉;他是逊尼派,他是什叶派,从他们出生的那一刻起,他们的命运就被这些他们所不能理解的标签所分隔开来,尽管他们是亲密无间的朋友,尽管他们事实上拥有同一位父亲。无论是平凡的阿米尔和哈桑,还是高高在上的查希尔国王或者卡尔扎伊,都不得不接受社会为他们预定的座位——阿米尔不再是阿米尔,哈桑也不再是哈桑,他们必须戴上社会分给他们的面具。 哈桑总是说“为你,千千万万遍”,而生性懦弱的阿米尔却选 择沉默冷酷的逃避,这样的悲剧性结果并不单单是个性差异所造成的,在这些年少无知的孩子的潜意识里早已被灌输了相应于自身社会地

流行性感冒健康教育宣传知识

流行性感冒健康教育宣传知识 一、症状: 突然快速而至的高热畏寒、高热、头痛、头晕、全身酸痛、乏力等中毒症状。可伴有咽痛、流涕、流泪、咳嗽等呼吸道症状。少数病例有食欲减退,伴有腹痛、腹胀、呕吐和腹泻等消化道症状。婴儿流感的临床症状往往不典型,可见高热惊厥;部分患儿表现为喉气管支气管炎,严重者出现气道梗阻现象;新生儿流感虽少见,一旦发生常呈脓毒症表现,如嗜睡、拒奶、呼吸暂停等,常伴有肺炎,病死率高。 B型流感的病童会有小腿痛、肚子痛等不典型的流感症状,A型流感和B型流感的发烧、全身痠痛、咳嗽、流鼻水的症状大同小异,只是B型流感更容易引起肌肉发炎,常有小病人因小腿痛不想走路,被家长抱着进诊间。此外,大约2到3成病童会嚷着肚子痛,这是疼痛转移的现象。如果发烧超过3天,喘不过气、心跳加速或意识不清楚时,当心病情恶化。B型流感症状缓解速度较慢,即使在发病48小时内服用「克流感」抗病毒药,仍然可能1星期才完全煺烧。 二、分类: 1.轻型流感 起病急、病情较轻,全身症状(全身酸痛、软弱无力)与呼吸道症状(喉咙痛、流鼻涕、咳嗽、鼻塞、流眼泪)均很轻。 2.典型流感 开始可表现为畏寒、发热,体温可高达39-40℃,同时患者感到头痛、全身酸痛、软弱无力,也伴随着眼眼睛干涩、喉咙干燥、轻微的喉咙痛。除了上述症状,部分患者可能会出现打喷嚏、流鼻涕、鼻塞,有时也会伴随有胃肠道症状,加恶心、呕吐、腹泻等。 发热与上述此状一般于1-2天达高峰,3-4日内热退,症状随之消失。乏力与咳嗽可持续l-2周。 3.流感病毒肺炎 即流感病毒性肺炎,24小时内病情迅速加重,表现为高热、乏力、烦躁、剧咳、呼吸困难、发绀,咳有血痰,双肺密布湿性罗音和喘鸣,脉快细弱,病死率较高。此类病人较少见,主要发生于原有心脏病、慢性肺病患者或妊娠妇女、主要常见于小儿、老人或体弱多病、免疫力低下者。起病时与单纯型流感相似,但在发病24小时内,出现高热不退、剧烈咳嗽、呼吸困难、咯血、紫绀等症状。病程可延长3~4周。血常规检查:白细胞减少、中性粒细胞减少。X线检查:双肺呈散在絮状阴影。磺胺、抗菌素对本病无效。少数病人可因心力衰竭或周围循环衰竭而死亡。小儿病死率较高。 4.中毒性流感:以中枢神经系统及心血管系统损害为特征。表现为高热不退,血压下降,谵妄(谵妄是一种急性脑病状态,特点是伴有意识和认知功能障碍,在疾病伴发躯体功能紊乱的时候会造成上述情况。)、惊厥、脑膜刺激征等脑炎脑膜炎症状。 5.脑炎型流感

流行性感冒和甲型H1N1流感及人禽流感

流行性感冒和甲型H1N1流感及人禽流感

流行性感冒、甲型H1N1流感及人禽流感 流行性感冒(influenza)是人类发病率最高、传染性最强、危害最大、也最容易被轻视而导致严重后果的传染病之一。 20世纪流行性感冒的三次世界性大流行 1918-1919年:由H1N1亚型流感病毒引起,死亡人数约5000万(西班牙流感) 1957-1958年:由H2N2亚型流感病毒引起,死亡人数约100万人(中国贵州,病毒可能是在1956年从苏联传来) 1968-1969年:由H3N2亚型流感病毒引起,死亡人数约75万(从香港开始) 目前流行性感冒仍呈周期性全球流行趋势。值得注意的是,上世纪50年代后的数次大小流行,多数都起源于我国,而且被怀疑与禽类病毒的变异、动物与人病毒的整合形成新的流感病毒株有关。 几次全球性爆发给人类留下了惨痛的教训;病毒的变异与整合使人类缺乏免疫力;与SARS 类似的呼吸道传播途径不容易控制;至今缺乏流感的特效药物和疫苗。 世界卫生组织认为甲型H1N1流感及禽流感

可能是对人类存在潜在威胁最大的疾病之一。 流行性感冒 一、定义:流行性感冒简称流感,是由流感病毒引起的急性呼吸系统传染病,以冬春季多见,临床以高热、乏力、头痛、全身酸痛等全身中毒症状重而呼吸道卡它症状较轻为特征。 二、病原学 流感病毒属于正粘病毒科的一种RNA病毒呈球形,外有包膜,直径80-120nm。包膜上由血凝素(H)与神经氨酸酶(N)二种蛋白构成,H/N常常变异,根据H/N的亚型(H1-15,N1-9)进行分类,如H5N1,H1N1等。 (一)病毒包括: 1.人流感病毒:甲、乙、丙型。A型(甲型):最常见,可广泛流行及人畜共患,病毒因不定时的基因突变而衍生新品种。B型(乙型):也会流行,症状较A型轻,无再分亚型。C型(丙型):主要以散发病例出现;无再分亚型。 2.动物流感病毒:甲、丙型。 (二)流行性感冒的流行病学特点 1.传染源:流感患者及隐性感染者为主要传染源。发病后1~7天有传染性,病初2~3天传

追风筝的人读书笔记3篇

追风筝的人读书笔记3篇 追风筝的人是以风筝为主线,讲的是主人公阿米尔与他父亲仆人的儿子哈桑的故事,那么,今天,本人给大家分享的是追风筝的人读书笔记3篇,供大家阅读参考。 追风筝的人读书笔记篇1:读完追风筝的人,感触颇多,一部不是纯文学的作品,更偏向政治,民族,种族,阶级题材,读完之后情绪浮浮沉沉,异常沉重。内心有千言万语,却不知该如何表达。一句话,就是透过大背景下的小人物的命运描述,映射阿富汗政治的动乱,种族歧视给人民带来了深重的灾难。 追风筝的人是以风筝为主线,讲的是主人公阿米尔与他父亲仆人的儿子哈桑的故事,他们俩一齐长大,喝的是同一个母乳,彼此会说的第一个字就是彼此的名字。哈桑忠实坚强,勇敢真诚,阿米尔胆小懦弱,善良敏感,虽然表面上哈桑与阿米尔十分亲密,但是在阿米尔的内心,并没有将哈桑作为他的兄弟姐妹,其实这与他们俩的阶级身份有关,一主一仆,他们是不可能真正平等的。故事的发展也是围绕着放风筝,哈桑是追风筝的高手,他不需要抬头就知道风筝会落到哪里,并总能第一个拿到落下的风筝,小说中有一句最感人肺腑的话,为你,我愿意追千千万万次,哈桑是多么的忠诚,哈桑以前说过,只要阿米尔让他去吃土,他就回去吃,不会有半句怨言。正是哈桑的如此真诚忠诚,使阿米尔感到

羞愧,阿米尔胆小懦弱,遇事总是退缩,他渴望得到父亲的爱,却又无法做到父亲的要求,他最钟爱的事是写小说,但是父亲却不支持。故事的转折点是一次风筝比赛,它改变了故事中很多人的生命。在这次比赛中,阿米尔没有让父亲失望,他成功打败了其他的风筝,哈桑答应他去把最后掉下来的风筝追回来,对阿米尔来说,只有追到掉下来的风筝才算真正的胜利。但是,在哈桑拿到风筝后,却被阿瑟夫等人拦住,哈桑因着对阿米 尔的承诺,决绝将风筝给阿瑟夫,结果被阿瑟夫性侵,这一幕被阿米尔看见了,但是她却选取了转身逃跑,正因他懦弱,不敢为了哈桑挺身而出。接下来的几天,阿米尔一向处于内疚中,他无法应对哈桑,最终他嫁祸哈桑偷盗,逼走了哈桑,那个对他无比忠诚的,敢于为他做任何牺牲的好兄弟姐妹。又过了几年喀布尔被俄国占领,阿米尔与父亲不得不逃亡美国,在那里艰难的开始了新生活。或许故事能够就这样结尾,生活将这样继续。但是一个电话,扰乱了平静的生活,也把阿米尔再次带回了故乡,从父亲的好友口中得知,哈桑其实是父亲的私生子,是阿米尔的亲弟弟,阿米尔一时无法理解,这么多年对于哈桑的愧疚一向萦绕心头,如今得知哈桑竟然是自我的亲弟弟,往事一点点浮上心头,父亲每次都记得哈桑的生日,从来不哭泣的父亲在哈桑离开时第一次流泪。但是,喀布尔已经不是以前的喀布尔,此刻民不聊

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