表观遗传与microRNA相互调控机制以及在抗肿瘤领域内的应用

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表观遗传与ｍｉｃｒｏＲＮＡ相互调控机制以及

在抗肿瘤领域内的应用母

徐艳敏郭艳合刘立蔡荣”钱程”

（浙泷蠼工大学生命科学学院，杭州３１００１８）

摘要ＤＮＡ甲基亿帮续缀自修饰等表观遭棒枫铡是恶性秀中瘴发生发展豹重要原因之～．然而近年来研究笈现，氆ｉｃｒ棚斟Ａ表

达水平改变也参与恶性肿瘸的形成．虽新研究资料揭示，表观遗传可调控ｍｉｅｒｏＲＮＡ液遮。而一些种类的ｒａｉｃｒｏＲＮＡ也可调

节袭观遗传，并且二者之间相互作用可调控组织细胞内基因表达以殿诱导体内恶性肿瘤产生．研究资料还摄示，表观遗传主

要邋过ＤＮＡ甲基化、组擞自修饰等方式调摊ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达。而ｍｉｃｍＲＮＡ贝ｌ｜通过调节ＤＮＡ甲基化转移酶、维持细胞中

ＤＮＡ举基徙水平或改交缀爨自修馋等途径调控袭鼹遗传，对ｍｉｃｒｏＲＮＡ与表露遗传之闻瓣诞控关系鞋及在掇瓣瘥领域蠹鲍应

蔫送露垒瑟瑟系统豹论述＋

关键词ｍｉ鼢队，表观遗传，肿瘤发生

学科分类号Ｒ７３０．５

褒鬣遗铸（ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ）是指ＤＮＡ孝剜并不发生变化而基因表达却发生了可遗传的改变．其主要机制魑由细胞内除遗传信息以外的其他可遗传物质所诱发且在细胞发育和增殖过程中能够稳定传递［１ｌ，表躐遗传现象秘类缀多，但ＤＮＡ甲基化＿鞴缱蛋自修饰簿表鬣遗簧现象与恶性胂瘤发生发展密切耱关，特别是ＣｐＧ岛甲基化所致抑癌綦灏转录失活和Ｎ端结构域转录后修饰使ＤＮＡ甲基化和组蛋白修饰成为目前表观遗传学和表观基因组学在肿瘤研究领域内重要分支．ＭｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）是一类长大约笼１９～２３令核萤酸《ｎ｜）鹣毒≥编羁攀链小分子ＲＮＡ．由于ｍｉＲＮＡ在机体整个生命活动过程中具有广泛调节功能，对生长发育、生理功能，尤其在恶性肿瘤的发生发展等过程中，产生重大影响，从霭馊ｍｉＲＮＡ成为晷翁生愈科学领域静研究热点窿，】．基翦，入靛针对菜些辩类ｍｉＲＮＡ在翳瘸觋究领域内的研究工作主要集中在其表达水平改变是否可诱发肿瘸发生发展，但对ｍｉＲＮＡ相关表达调控机制的研究尚处于初级阶段．研究已经证实，染色体上慕蹙医域ＤＮＡ分子受到表观遗传调掇矮能够诱发辩瘰产生，然孬最掰文献掇递一些种粪麓ｍｉＲＮＡ，蜘ｍｉＲ－３４ｂ和Ｉｃｔ－７ａ．３替基因表达也受剿ＤＮＡ甲基化等表观遗传机制调控ｎ目，另外许多种类的ｍｉＲＮＡ定位于ＣｐＯ岛周围或经手冀牵，溺靖醭究发现，此类ｍｉＲＮＡ表达受到表观遗传调节，而且组织细胞内具有肿瘤抑制功能的ｍｉＲＮＡ通常被ＤＮＡ过度甲基化所沉默从而导致一魃肿瘤发生阿。另外在恶性肿瘤中鬈些种类的ｍｉＲＮＡ发生了甲基纯改变，说疆ｍｉＲＮＡ学基往与瓣壤发生发展密甥糊关．诸多现象提示，表观遗传在一定程度上对ｍｉＲＮＡ表达方式以及诱发肿瘤产生趣着重要的调控作用。许多研究揭示，ｍｉＲＮＡ受甲基化和组蛋自修饰等经典表观遗传机制调控，另一方蘑，人镌遥发现ｍｉＲＮＡ对袭臻遗篱也产生～定诱节作焉，从而吸引许多科学家逐渐关注并探索ｍｉＲＮＡ与表观遗传机制之间的相关性啊．鉴于ｍｉＲＮＡ调节表观遗传以及同时又熙到表观遗传调控及其二者在肿瘸发生发展过程中的作用，本文将详细耀述ｍｉＲＮＡ与表溪蘧传之阕程互关系在蒸嚣表达调控、

?圈家重点基础研究发展计划（９７３）（２００４ＣＢ５１８８０４）和国家高技术旋艘计划（８６３）（２００６ＡＡ０２２１２６）资助项目，浙江省科技厅重点项目瓣００６Ｃ２３∞戗

一逶谖联系太．

蘩荣。１翻：０５７１－８６８４３１８５，Ｅ－ｍａｉｌ：∞蛔鲭Ｏｌ＠辆峨矗ｉｌ．湖

钱程．Ｔｅｌ：０５７１—８６８４３１８２．Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｑｉａｎ３１８４＠Ｘ＇ｄａｏｏ．ｅｏｌｌｌ．ｃｎ

收稿日期：２００８－０５－２５，接受日期：２００８－０９－２２

万方数据

生物化学与擞物物理进展Ｐｒｏｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｌｏｐｈｙｓ．２００８；３５０２）

肿瘸形成以及在抗胂瘤领域内的应用研究。

１液躐遗传与ｍＨ蔓ＮＡ之闻相互调控诱发釉瘢形戒

熬阂决定生命过程中各种蛋白质表达以及袭型．假人们却发现，具有完全相同基因组的个体在同样环境中转变为成体后各自在性格特秘以及功能等方两将会出现较大差异，一些特征只内一个亲本基因决定而源自另一亲本基因却保持沉默状态．近年来液观遗传学的研究合理地解释了遂然问题．然两表观遗传逸是细胞恶性转化的一个重鬟原因．许多耱类癌绥憨均窭现异常ＤＮＡ晕基饯行为，瓣癯蘩制麓瓣遴常被ｊ童度逮学基纯瑟失去滔魅。表鬟遗搀修饰除ＤＮＡ甲基饱方式终，还霄一种较为常觅的方式鞠染色质结构修饰，通过乙酰他或磷酸优等化学方法，对组蛋白进行修饰引起染色质结构变化，从而导致基因活性改变使细胞产生恶性转化．研究证实，ＤＮＡ甲基化和组蛋白修饰对基因表达具有黛要调控作用，同时亦可诱发肿瘸形成．ＤＮＡ甲基化主要包括整个基因组去甲蕊化和部分区域蕊度甲基化，其中ＤＮＡ去甲基化谯胂瘸发生发疑巾的俸爝竞为赘显，另努组蛋囊修馋瞧是基因表达瀵羧泼及诱发瓣瘗形戒酶重要袭鼹遗终瓿刳之一．激蠢义献授道在菜些恶性秘癍孛缀强良修馋逮过关闭挪制细胞异常生长鲍基因健避细胞恶性转化．

科学家预测ｍｉＲＮＡ可调控哺乳动物基因组中约３０％基因表达，然而迄今为止大量研究资料证蜜，组织细胞内ｍｉＲＮＡ异常表达而诱发恶性肿瘤的概辩远高于ｍｉＲＮＡ的正常表达水平．圈前，针对ｍｉＲＮＡ调控肿瘤发生发展的研究已经成为在羟申瘸研究领域蠹一令重要分支，国际上一些获攀翳瘩发痰麓‘捌激及治疗骚究静著名实验室绦纷转惫这一研究镟城，许多国际著名杂志连续报道静瘸相关ｍｉＲＮＡ潜在功能以及抗癌效应的研究．１ｅｔ－７在肺瘸发生发展过程中属于肿瘤抑制基因，其靶标是Ｒａｓ撼因，ｌｅｔ．７表达降低可使Ｒａｓ表达增加从而促进肿瘸生长嗍；具有肿瘤抑制功能的ｍｉＲ．１２７在正常前列腺和膀胱组织细胞中高表达而在肿瘸组织中显蓍下调或沉默，ｍｉＲ－１２７下调导致致痛基因ＢＣＬ６表达增加进而促进肿瘤发生发展卿；ｍｉＲ－１７－９２基因簇被证鞠为在瓣瘤发生孛超敬癌传惩鼠霹被ｃ－ｎｌｙｃ激活在Ｂ缨耱漤邑瘦鞠耱瘫孛受毒表达剿．实验已充分说疆，ｍｉＲＮＡ在键控舯瘩发生发展过程中发挥漤璧要作用，ｍｉＲＮＡ异常表达霹导致恶性脖癣发生发蓑ｍ～蝎，但ｍｉＲＮＡ表达翔篱被诱导改变哥数缀织缨戆蠹整体表达搂式交纯丽诱发程俸产生耱瘸黪梳话ｌ齑不完全渍楚。

最近人们逐渐认识到表观遗传对ｍｉＲＮＡ分子也产生重要的调控凰赢接参与肿瘤发生发展等过程，同时ｍｉＲＮＡ分子也可调控表观遗传而诱发恶性肿瘤生成．研究融经证实ｍｉＲＮＡ自身也受其他多种因素调控，例如染色质结构异常、ｍｉＲＮＡ加工受损甚至表观遗传状态改变等因素均可影响ｍｉＲＮＡ表达．最新研究发现ＤＮＡ甲基化不足、ｃ啤岛过度甲基化以歉缀蛋自修馋等嚣素均霹影响翼套翳癌撵割功熬瓣ｍｉＲＮＡ表达强甥。在ｍｉＲＮＡ成熟过程审发挥重要作用懿Ａｇｏ蛋叁也受到ＤＮＡ甲基纯和缀爨自修饰等机制调控丽影响自身ｍｉＲＮＡ成熟过程．另外，Ｎ端尾部结构域转录后修饰也是调控ｍｉＲＮＡ表达而诱导肿瘤发生发展的重要表观遗传机制川．另一方面资料还显示ｍｉＲＮＡ也可通过调节ＤＮＡ甲基转移酶表达、维持细胞中ＤＮＡ甲基化藏改变组蛋白修饰等多种途径丽调节表观遗传．因此ｍｉＲＮＡ与表观遗传之间存在着复杂的相互调控，一方嚣可对组织细胞产生更热穰确潺控，勇一方溪霹戆是诱发耱瘸产生戆一令重要暴函。铃慰ｍｉＲＮＡ与表蕊遗簧福关性莳研究必将对探索基因表达调控机制以及肿瘤发生发展机制产生重大影响．

２表观遗传调控ｍｉＲＮＡ表达方式及其机制

目前研究认为，ＤＮＡ甲基化和组蛋白修饰是调控ｍｉＲＮＡ表达的主要方式和手段．该类调控模式的主要机制是调节细胞内一些关键基因表达，尤其是在癌缨胞孛一魉文脊翳瘩耱铡功能豹ｍｉＲＮＡ效ＤＮＡｊ童度擎基纯辫溺敬，荠关阕该ｍｉＲＮＡ襄动子区域的染色矮结构麸两影嚷ｍｉＲＮＡ表达陶＋用遗传学方法突变癞绒胞中ＤＮＡ甲基化关键酶ＤＮＭＴ３Ａ或ＤＮＭＴ３Ｂ基因组碱基，发现ＣｐＯ岛过度甲基化是导致ｍｉＫＮＡ在肿瘤细胞中被下调机制之一时１埘，这也说明袋观遗传在一定程度上对ｍｉＲＮＡ表达水平发挥着精确调节作用．

为了探讨ｍｉＲＮＡ表达是否受表观遗传修饰调控，最近Ｓａｉｔｏ等删使用染色质重塑药物５，氮－２．残氧缒营（５－Ａｚａ－Ｃｃｍ）釉４。苯基丁酸（ＰＢＡ）孺对诱导＂１＂２４人类薅麟瘸缍艴翱ＬＤ４１９菱霉纾维缨腿穰后蕊察ｍｉＲＮＡ表达德凝，结巢显示，在Ｔ２４缨憨

万方数据

徐艳敏等：表聪遗传与ｍｋｒｏＲＮＡ棚慝调控机制以及在抗肿瘤领域内的应朋?１３４５?

中一些ｍｉＲＮＡ被主调面在ＬＤ４１９缀臆孛ｍｉＲＮＡ表达水平则无明显变化，其中嫩位于ＣｐＧ岛中的ｍｉＲ．１２７变化尤为显著．ｍｉＲ．１２７位于染色体１４ｑ３２．３１位点上的一个ｍｉＲＮＡ家族中，该家族还包瑟ｍｉＲ－１３６、ｍｉ爱４３ｌ、琢ｉＲ－３２穰颤获－４３３等戏员．为了阐嚼ｍｉＲ．１２７调控祝利，该研究小组谴用微阵列技术分析发现：经５．Ａｚａ－ＣｄＲ和ＰＢＡ同时诱导Ｔ２４和ＬＤ４１９细胞株后，禚Ｔ２４细胞株中可检测出３１３种ｍｉＲＮＡ，其中１７种ｍｉＲＮＡ表达翌著上调且超出琢育豹３倍，在ＬＤ４１９纲慈中也可麓察到类议情况，毽ｍｉＲＮＡ表达变往主要祝制与Ｔ２４细胞株有糟明显差异，其根本原因是ｍｉＲ．１２７在Ｔ２４细胞中存在３个不同的转录起始位点而猩ＬＤ４１９细胞中仅有一个。该研究小组进一步将研究对象扩震到结肠癌、富颈癌、憝黪瘸、自斑痍、乳艨癌、胰腺瘸以及瓣癌等恶毪＿｜捧瘸，在珏ＣＴｌ１６、ＨｅＬａ、ＮＣＣＩＴ、Ｒｋｌｎ＇ｌｏｓ、ＣＦＰＡＣ．１、ＭＣＦ７和ＣＡＬＵ－１等７种人类癌细胞株和ＬＤ９８、ＣＣＤ．１０７０ＳＫ等２种正常人成纤维细胞株内研究发现：ｍｉＲ－１２７农掰毒癌缨戆中均装沉默，毽经５－Ａ瑟．ＣｄＲ森ＰＢＡ处理后哥被诱导表达基京ＨＣＴｌｌ６、ＨｅＬａ、ＮＣＣＩＴ和ＲｆｌｌＴＩＯＳ癌细胞株中以剂量依赖方式被诱导．在通常情况下ｍｉＲ－１２７在ＬＤ９８和ＣＣＤ．１０７０ＳＫ细胞株中研显著表达，经５－Ａｚａ。ＣｄＲ黧ＰＢＡ霜露诱导瑶表达无显著差异。将５－Ａｚａ．ＣｄＲ戏ＰＢＡ各自单独楚瑾Ｔ２４纛Ｌ强４１９细胞株后均不能诱导ｍｉＲ－１２７表达，但两种药物协同处理则诱导疑表达显著增加凰征Ｔ２４细胞株中变化尤为显著，说明ｍｉＲ－１２７在难常细胞和癌细胞中均受到染色鹱修饰药携诱露，其表达壹接由ＤＮＡ去币萎纯釉维蛋白去乙酝稼抑剜荆汝陵效应所调控［９１．

ｍｉＲ．１２７禚Ｔ２４和ｕ）４１９细胞中存在着不同数量转录起始位点。研究５－Ａｚａ－ＣｄＲ和ＰＢＡ同时诱导该基因上游癌动子区域ＤＮＡ警基纯和组蛋囊修饰程度时发硗；调控ｍｉＲ－１２７袭达静稿动子巴渡表观遗传所修饰，因此其表达是国表观遗传修饰的启动子所启动．使用重亚硫酸盐越凶组测序方法，分析经５－Ａｚａ－ＣｄＲ和ＰＢＡ所诱鼯的ｍｉＲ－１２７启动予区域ＤＮＡ擎鏊纯状态，发现农蹲瓣细照中该区域甲基纯程度辫寅显著交纯，说硝ｍｉＲ一１２７由自身启动子活化所引起的表达增强依赖于ＤＮＡ甲基化和组蛋白抑制剂的诱导，受ＤＮＡ甲基化和组蛋白修饰调控．通过进一步分析Ｉ＂２４细胞中ｍｉＲ－１２７基因转录起始位点餍围４个涎域酶染色质结梅发现：伴随染色质重塑药物处理，在该区域内出现ＤＮＡ甲基化水平降低而组驻白标记增加．经５－Ａｚａ－ＣｄＲ溅ＰＢＡ诱导后乙酰化组蛋白Ｈ３和甲基纯组蛋自Ｈ３Ｋ４水平均高予诱导裁，说甥组爨巍修饰水平增翱能够开放染色囊绻构从蕊健送基因袭达．Ｂｒｕｃｅｃｋｎｅｒ等［１９，２０ｌ研究小组在对位于人类染色体２２ｑ１３．３１＿ｌｚ的ｌｅｔ．７ａ．３基因研究中亦得到类似结果．根据实验结果可以推测ｍｉＲＮＡ与表观遗传之瓣可戆存在以下谖控关系：在癌纲瑰孛具有脖瘰抑制功麓的ｍｉＲＮＡ透常被ＤＮＡ过度甲基纯崭沉默且关闭其启动子区域的染色质结构而抑制基因转录．染色质修饰药物如ＤＮＡ甲基化抑制剂和ＨＤＡＣ抑制剂，可降低启动予隧域ＤＮＡ甲基化水乎蒡瑟敖染色质结构姨覆激添ｐｒｉ－ｍｉＲＮＡ转最，使萁经过一系列加工过程生成戒熬ｍｉＲＮＡ螽熬会到ＲＮＡ诱导沉默复合物中发撵其基因表达调控作用（如图１所示）．

酶１Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｐｉｇｅｎｅｉｉｅｓｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ嘶ｍｉＲＮＡ

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

图ｌ表聪遣传修饰对ｍｉＲＮＡ表达变化的影响

另癸，纛结壹瓣痉纲憨中入键通过５－Ａｚａ－ＣｄＲ诱导或萃敲除结壹肠癌ｔｔＣＴｌ１６细胞株中ＤＮＭＴＩ和ＤＮＴＭ３Ｂ基因后观察ｍｉＲＮＡ表达情况，发现盘要调控ｐ５３基因的ｍｉＲ．３４ｂ和ｒｎｉＲ－３４ｃ受表观遗传

调控而诱导篡表达沉默渊．对此，双敲除ＤＮＩＩｔＴｌ

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?１３４６?生物化学岛生物物理进展ｅｒｏｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２００８；３５（１２）

鄢ＤＮＴＭ３Ｂ基爵霹避一步加以证实。Ｌｕｊａｍｂｉｏ等隧盔不霆类塑熬瓣癌孛凌震微蓐疑技术分板３２０种ｍｉＲＮＡ表达谱时发现：１８种ｍｉＲＮＡ表达上调凰超出原有３倍，蒿中ｍｉＲ－１２４ａ则通过ＣｐＧ岛过度甲基化而引起转承失活．研究人员在卵巢肿瘤细胞中发现，ｍｉＲ．２１、ｍｉＲ－２０３和ｍｉＲ－２０５在卵巢燕鳃程中表达上谖，覆显这些ｍｉＲＮＡ在襄巢蘧缨臆株ＯＶＣＡＲ３经５－Ａｚａ－ＣｄＲ诱导聪表达显著增加，推测其过度表达是由ＤＮＡ甲綦化不足导致，暗示ｍｉＲ．２１、ｍｉＲ－２０３和ｍｉＲ．２０５的异常表达受ＤＮＡ甲基化等表观遗传机制调控渊。人们在分析ｌｅｔ－７ａ－３荦基纯狡恣耦ｌｅｔ－Ｔａ表达承警霹笈瑰：耙ｔ－７ａ－３甲基化与胰岛素样生长因子表达呈负相关，但与胰岛素样生长因子结合蛋白３袭达呈正相关，．鼠该基因甲基化后Ｗ降低患者死亡举删．在利用口腔鳞状细胞癌（ｏｓｃｃ）细胞开展的研究中，研究者在１８释ＯＳＣＣ维熬系孛褒察１４８释ｍｉＲＮＡ表达谱时发现：与对照组永生化口腔角化绷胞系ＲＴ７相比，５４种ｍｉＲＮＡ骷被下调，其中怒位在ＣｐＧ岛周围的ｍｉＲ一３４ｂ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ．１９３ａ和ｍｉＲ．２０３邋常被异常ＤＮＡ掣基化所沉默，说鹈在口腔鳞状缁簏癌孛遣存在表溉逶簧调控ｍｉＲＮＡ表达现象，在膣管细胞癌中ＩＬ币过度表达可潆致ＤＮＭＴＩ和ＨＡＳＪ４４４２表达增加，而经５－Ａｚａ．ＣｄＲ诱导后其表达可降低，ＩＬ－６过度表达后下调ｍｉＲ。３７０表达，致使ｍｉＲ－３７０靶位点效癌基因ＭＡＰ３Ｋ８表达增加，蒙瑟诱导齄瘤发生，衷甏飘葵霹逶遗一些炎症穗关细胞因子调控ｍｉＲＮＡ表达ｔ＇ＺＳｌ＋

除ＤＮＡ甲基化介导ｍｉＲＮＡ表达调控外，组蛋自修饰也可介导ｍｉＲＮＡ表达调控．最近ｓｃ０位簿㈣研究小组报道，在ＳＫＢｒ３．７２乳腺癌细胞株中ｍｉＲＮＡ表速交化与羟氨黢ＨＤＡＣ麴锾蓑ＬＡＱ８２４掷制程度相关。镁掰微阵列技术分析经ＬＡＱ８２４处域前后Ｓｌ④ｒ３细胞株中的６０多种不同ｍｉＲＮＡ表达情况发现，约４０％的ｍｉＲＮＡ表达水平发生显著变他，其中２２种ｍｉＲＮＡ表达墨下调，５种ｍｉＲＮＡ表透至上谈，说璃缝蛋自修馋对ｍｉＲＮＡ表达也具有重要调节依用．另外一些国转录因子或细胞网子介导的表观遗传修饰也可间接调控ｍｉＲＮＡ袭达，例如ｍｉＲ－２２３的表达调控通过急性骨髓白啦瘸栩关融合蛋Ｉ刍（ＡＭＬＩ／ＥＴＯ）介导的裘观遗传沉默壤戮瑟实现，醪究发瑗，在ｐｒｅ。ｍｉＲ－２２３基因寒羁上存在着ＡＭＬｌ蛋自结合位点，该往点序列能招募染色质重塑酶使染色质结构产生局部改变从而介导对ｍｉＲ．２２３转渌调控潮．另外，絷色质异常也是影晌ｍｉＲＮＡ表达瓣嚣医之一，遇过染色震麴鳖改变可对ｍｉＲＮＡ表达产生调控作用．有证据表碉ｍｉＲＮＡ定位和染色质异常密切相关阐．使用微阵列比较基因组杂交分析技术对２２７例卵巢癌、乳腺瘸和黑素瘗标本进行检测，结果裘明，在癌细胞中骞舅零表达麓ｍｉＲＮＡ在其染色威区域蠹筠整瑶裔频基因组变异，说明该类基因组变异与肿瘤发生可能具有一定相关｛生．

３ｍｉＲＮＡ调控表观遗传方式及其机制ｍｉＲＮＡ胃逶过多秘途径影噫袭麓逮簧，甓懿调节ＤＮＡ甲基化转移酶表达、赢接维持细胞巾ＤＮＡ甲基化或改变组蛋白修饰等途径．为了研究ｍｉＲＮＡ对表观遗传调控，Ｆａｂｂｈ椁［２９１利用肺癌细胞中ｍｉＲ－２９家族为研究对象戏察ｍｉＲＮＡ是否霹逶蓬诿节ＤＮＡ擎基转移酶阕接影响纲蕤晕基纯，该研究小组首先虢证了ｍｉＲＮＡ表达谱改变与癌基因组甲基化类型界常之间的相关饿，通过多种靶基因预测从非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）细胞中克隆ＤＮＭＴ３Ａ和ＤＮＭＴ３Ｂ基因ｍＲＮＡ蛇３＇－ＵＴＲ序列，将该痔列撬入裂ｐＧＬ３－ｐｒｏｍｏｔｏｒ载体上荧光素酶基因下游麸雨形成融合蛋白，与ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－２９ｂ戚ｍｉＲ一２９ｃ共转染Ａ５４９细胞以观察ｍｉＲＮＡ与靶标基因之间的相置作用．从已转染ｍｉＲ．２９的Ａ５４９和Ｈ１２９９鳃胞中摄取ＲＮＡ进行定囊ＲＴ－ＰＣＲ，实验维莱证实，ｍｉＲ－２９家族单令袋受过表达垮可导致内源性ＤＮＭＴ３Ａ或ＤＮＭＴ３Ｂ的ｍＲＮＡ显著降低，相反用反义寡核苷酸（ＡＳＯ）沉默ｍｉＲ．２９家族单个成员则诱导ＤＮＭＴ３Ａ或ＤＮＭ嬲嚣的ｍＲＮＡ表达水平上调．将ＤＮＭＴ３Ａ或ＤＮＭＴ３Ｂ基因ｍＲＮＡ麓３’－ＵＴＲ竞陵聚箨告载俸ＱＢＩ－ＧＦＰ２５豹ＧＦＰ亭罗｜ｊ下游，表达～个包含ＤＮＭＴ３Ａ残ＤＮＭＴ３Ｂ的３’．ＵＴＲ融合ＧＦＰ强白．将克隆载体ＧＦＰ．３Ａ或３Ｂ．３’－ＵＴＲ和ｍｉＲ．２９ａ、ｍｉＲ．２９ｂ、ｍｉＲ－２９ｅ共转染Ａ５４９细胞，在曩转染ｍｉＲ一２９的纲胞孛发现ＧＦＰ爨自表达承平篓蓑降低，说明ｍｉＲ－２９过表达露警致ＤＮＭＴ３Ａ或ＤＮＭＴ３Ｂ蛋自翻译水平显著降低，其中ＧＦＰ．３Ｂ．３＇．ＵＴＲ降低尤为显蓍，其可能的原因是ｍｉＲ＿２９和ＤＮＭＴ３Ｂ的３’－ＵＴＲ匹配程度更舞。避一步检测ＤＮＭＴ３Ａ或ＤＮＭＴ３Ｂ与ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－２９ｂ或ｍｉＲ－２９ｃ之霹朝关霞瞻发现二者之蠢存在着显著负相关，说明ｍｉＲ－２９表达状况改变可导致ＤＮＡ表观遗传修饰的变化．通融液相色谱一串

万方数据

２００８；３５０２）徐艳敏等：表观遗传与ｍｉｃｒｏＲＮＡ相互调控机制以及在抗肿瘤领域内的应用?１３４７?

联质谱法（ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ）分析转染ｍｉＲ．２９ａ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－２９ｃ的Ａ５４９细胞基因组总体ＤＮＡ甲基化水平，发现在转染４８ｈ和７２ｈ后ｍｉＲ－２９家族中任何成员与对照组相比其总体ＤＮＡ甲基化水平均显著下降，其中以转染ｍｉＲ．２９ｂ效果最为显著【弼．若进一步增强外源性ｍｉＲ．２９在肺癌细胞中的表达则可导致细胞整体甲基化水平降低，肿瘤抑制基因可恢复表达从而抑制肿瘤生成．利用ＩＶｌａｓｓＡＲＲＡＹ系统检测肿瘤抑制基因用仃和形ＷＯＸ上游调节区域甲基化状态，发现ｍｉＲ．２９可通过改变启动子甲基化水平调节ＦＨＩＴ和ＷＷＯＸ表达．

ｍｉＲＮＡ表达水平变化不仅可间接影响细胞中ＤＮＡ甲基化水平，而且部分ｍｉＲＮＡ还直接参与维持细胞中ＤＮＡ甲基化．Ｂａｏ等【３１】以拟南芥植物为研究对象探索ｍｉＲＮＡ与ＰＨＡＢＵＬＯＳＡ（ＰＨＢ）基因甲基化之间的关系时发现，ｍｉＲ－１６５和ｍｉＲ．１６６是该植物中ＰＨＢ甲基化所必需，ｍｉＲ一１６５和ｍｉＲ－１６６与ＰＨＢ的ｍＲＮＡ相互作用以至改变ＰＨＢ基因染色质构型从而诱导染色质结构发生改变．根据研究结果提出ｎｌｉＲＮＡ诱导ＰＨＢ甲基化模型：ｍｉＲＮＡ在细胞质中成熟，胞浆中成熟ｍｉＲＮＡ可重新进入核内与ＰＨＢ的ｍＲＮＡ互补配对并进一步结合其他因子而导致结合位点处形成染色质重塑复合体，该复合体可诱导ＰＨＢ基因甲基化．ｍｉＲＮＡ可能作为该复合体中的一个组成部分间接地促进该复合物形成从而促进ＤＮＡ甲基化．另外，在哺乳动物细胞中ｍｉＲ－２９０可靶向调节Ｒｂｌ２，ＤＮＭＴ活性依赖于Ｒｂｌ２表达程度，ｍｉＲ．２９０可通过对Ｒｂｌ２调节从而间接影响ＤＮＭＴ表达，最终诱导ＤＮＡ甲基化和延伸端粒，该类ｍｉＲＮＡ调控ＤＮＡ甲基化和端粒活性在Ｄｉｅｅｒｌ缺陷细胞中得以充分证实，说明ｍｉＲ．２９０直接调控Ｒｂｌ２依赖的ＤＮＭＴ途径从而控制细胞整体ＤＮＡ甲基化［－，２１．另一方面，ｍｉＲＮＡ也可通过调控组蛋白修饰从而调节染色质结构，例如在小鼠体内软骨特异性的ｍｉＲ．１４０以组蛋白去乙酰酶为靶标，通过调节组蛋白去乙酰酶的水平进而影响到组蛋白修饰并最终影响一些癌相关基因表达状态嘲．

４在肿瘤治疗领域内的应用前景

ｍｉＲＮＡ与表观遗传相互作用与肿瘤发生之间的相关性提示人们，可借助一定方法和手段调节二者之间特性从而达到治疗肿瘤的目的．实验已证明ｍｉＲＮＡ表观遗传调控是影响ｍｉＲＮＡ表达水平变化的重要途径之一，因此ｍｉＲＮＡ表观遗传调控将成为肿瘤治疗研究的重要方向．许多研究小组使用与ｍｉＲＮＡ互补、经修饰的ＡＳＯ抑制有致癌特性的ｍｉＲＮＡ，结果显示抑癌效果较显著．Ｋｒｆｉｔ：ｚｆｅｌｄｔ等队３５】开发了两类经化学修饰的ＡＳＯ，该类小分子已被成功用于抑制小鼠肝特异性的ｍｉＲ．１２２．该研究小组又使用静脉注射方法将与胆固醇共轭的２。．Ｏ．甲基修饰的ＡＳＯ注射到小鼠体内，结果显示不同组织中相应ｍｉＲＮＡ显著降低且靶基因表达水平提高．Ｅｓａｕ等ｔ３ｚ磊｝Ｆ究小组采用非结合２，．０一甲氧基乙酯磷硫酰修饰的ＡＳＯ针对ｍｉＲ．１２２抑制也获得了较好疗效，实验结果均证明内源ｍｉＲＮＡ可能是药物筛选较为理想的靶标．

表观遗传的一个显著特征是可通过特定药物逆转这种效应，如ＤＮＡ甲基化导致基因沉默可由ＤＮＡ去甲基化试剂加以逆转，该类药物不仅可用于细胞培养而且可用于疾病治疗中，特别是抗肿瘤效果明显．目前５．氮胞苷（５．ＡｚａＣ）和５－Ａｚａ．ＣｄＲ已通过ＦＤＡ认证用于选择性治疗脊髓发育不良综合症闭．在ＤＮＡ甲基化过程中甲基化酶与胞嘧啶第６位碳共价结合，从ｓ．腺苷甲硫氨酸（ＳＡＭ）上转移甲基基团至胞嘧啶第５位之后酶便脱离ＤＮＡ．当５－ＡｚａＣ和５－Ａｚａ．ＣｄＲ嵌入ＤＮＡ甲基化位点后因其嘧啶环第５位Ｎ不能接受甲基，所以当甲基化酶与此嘧啶的第６位碳结合后，ＳＡＭ上甲基便不能被酶转移到嘧啶环第５位碳原子上，甲基化酶不能从胞嘧啶第６位碳原子上脱离．嵌入５－ＡｚａＣ和５－Ａｚａ．ＣｄＲ的ＤＮＡ便与甲基化酶形成稳定共价复合体，从而导致甲基化酶活性下降使基因组甲基化相应降低唧．

另一方面，在癌细胞中具有肿瘤抑制功能的ｍｉＲＮＡ一般被下调或沉默，活化具有肿瘤抑制功能的ｍｉＲＮＡ将有利于癌症治疗，通过５－Ａｚａ－ＣｄＲ和ＰＢＡ诱导具有肿瘤抑制功能的ｍｉＲ．１２７高表达从而导致癌基因ＢＣＬ６下调１９１．ＢＣＬ６为一编码含有ＢＴＢ，ＰＯＺ锌指结构的转录抑制因子，该转录因子是胚胎发育所必需且与Ｂ细胞淋巴瘤发病相关．此外，ＢＣＬ６还抑制ｐ５３表达并调节ＤＮＡ损伤诱导的凋亡效应网．因此活化具有肿瘤抑制功能的ｍｉＲＮＡ既可影响胚胎发育，又关系到肿瘤发病机理及肿瘤治疗．

目前，使用染色质修饰药物如ＤＮＡ甲基化和ＨＤＡＣ抑制剂针对肿瘤表观遗传途径的治疗具有良

万方数据

?１３４８?生物化学与生物物理进展Ｐｌ＇ｏｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．

好的应用前景，其中５－Ａｚａ－ＣｄＲ和ＰＢＡ已被普遍应用．该类药物不仅能激活可以编码蛋白质的肿瘤抑制基因，而且能活化有肿瘤抑制功能的ｍｉＲＮＡ，该类ｍｉＲＮＡ活化也能导致靶标癌基因表达下调（如图２所示）．随着针对ｍｉＲＮＡ研究的不断深入。更多种类ｍｉＲＮＡ将被相继发现从而提供更多的潜在治疗靶点．

ｎｇ．２１１ｌｅｒｅｃｉｐｒｏｃａｌｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｂｅｔｗ∞ｎｅｐｉｇｅｎｅｔｔｃａｎｄｍｉＲＮＡａｎｄ

ｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｆｏｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒｓ

图２ｍｉＲＮＡ与表观遗传之间的相互调控以及在抗癌治疗中的应用

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５结语与展望

近年来研究表明，ｍｉＲＮＡ受表观遗传调控且与肿瘤发生关系密切，ｍｉＲＮＡ表观遗传调控的发现开辟了肿瘤治疗的新领域，深入探索表观遗传与ｍｉＲＮＡ之间的相关性已成为研究热点之一网．ｍｉＲＮＡ受表观遗传调控使人们思考ｍｉＲＮＡ表达调控复杂性．目前人们对ｍｉＲＮＡ自身调控机制的认识仍较肤浅．最近发现，抑制ｍｉＲＮＡ加工或成熟过程均可诱导细胞恶性转化以及促进肿瘤发生［４０１，该类现象促使人们进一步研究ｍｉＲＮＡ在肿瘤发生发展的哪个阶段发挥作用以及是肿瘤发生诱导ｍｉＲＮＡ表达异常还是ｍｉＲＮＡ异常导致癌症发生．有文献报道，在鼠胚胎干细胞中ｍｉＲＮＡ通过调控转录抑制因子控制ＤＮＡ重新甲基化［４ＩＪ，另有文献报道，在胚胎干细胞时期ｍｉＲＮＡ发挥调控干细胞分化作用，推测ｍｉＲＮＡ加工和表达异常可能是肿瘤发生早期事件而不是甲基化所致，因为甲基化出现相对较晚，这些现象促使人们考虑ｍｉＲＮＡ是否是控制ＤＮＡ甲基化的启动因素，ｍｉＲＮＡ调控表观遗传的确切机制如何等诸多问题，这些问题将引导人们对ｍｉＲＮＡ与表观遗传调控之间关系进行深入研究．

另外ｍｉＲＮＡ与表观遗传机制之间调节关系的研究还受到多种因素制约．通常ｍｉＲＮＡ基因序列相对较短且整合到较大的转录单元中是ｍｉＲＮＡ与表观遗传调节研究的主要障碍，除了寻找调控ｍｉＲＮＡ基因、ｍｉＲＮＡ靶基因以及揭示ｍｉＲＮＡ具体作用机制外，还需研究ｍｉＲＮＡ与表观遗传机制上下游之间调控关系，即ｍｉＲＮＡ在何种阶段通过何种方式影响表观遗传机制，表观遗传又如何调控ｍｉＲＮＡ表达．鉴于ｍｉＲＮＡ和表观遗传相互作用研究的特殊性，科学工作者首先必须建立一个表达外源性ｍｉＲＮＡ不受其内源抑制的稳定细胞系，以便在细胞恶性转化过程中观察ｍｉＲＮＡ动态变化以及表观遗传变化．深入理解二者之间的相关性既有助于理解复杂的基因调控网络，又可引导人们深入研究恶性肿瘤发生发展的新机制．

参考文献

１ＥｇｇｃＴＧ＇ＬｉａｎｇＧ，ＡｐａｒｉｃｉｏＡ，ｅｔａ１．Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓｉｎｈｕｍ锄ｄｉｓｅａｓｅａｎｄｐｒｏｓｐｅｃｔｓｆｏｒｃｐｉｇｃｎｅｔｉｃｌｈ唧ｙ．Ｎａｔｕｒｅ，２００４，４２９（６９９０）：４５７～４６３

２ＢａｒｒｅｌＤＰ．ｍｉｃｔｏＲＮＡ８：ｇｅｎｏｍｉｃｓ，ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｍｅｃｈａｎｉ目ｎ，ａｎｄ

ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｃｅｌｌ，２００４，１１６（２）：２８１～２９７

万方数据

２００８；３５０２）徐艳敏等：表观遗传与ｍｉｅｒｏＲＮ．＾相互调控机制以及在抗肿瘤领域内的应用?１３４９?

３ＫｉｌｎＶＮ，ＮａｍＪＷ．Ｃ－ａａｏｍｉｅｓｏｆｍｉｃｒｏ眦ＴｒｅｎｄｓＧ％ｅｔ’２００６。

２２（３）：１６５～１７３

４ＷｅｂｅｒＢ，￥ｔｒ％ｅｍａｌｍＣ，ＢｒｕｅｅｋｎｅｒＢ，ｅ＇ｔａ／．ＭｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｍｉｅｒｏＲＮＡｇｅｎ∞ｉｎｎｏｒｆｌｌｌｌｌａｎｄｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｃｅｌｌｓ．ｃｅＵＣｙｃｌｅ，２００７．鳅９）：１００Ｉ～ｌ００５

５Ｋ蝴虹ＫｌｍｏｔｏＩ．Ｍｏ昏Ｓ，ｅｔｄ．ＥｘｐｌｏｒａｔｉｏｎｏｆｔＩｌ】ｎｏｒ－墨Ｉｑ耳艇船ｉｖｅｍｉｅｍＲＮＡｓｓｉｌｅｎｃｅｄｂｙＤＮＡｂ虾哪ｍｅ山ｙｌ埘ｏｎｉｎｏＩａｌｃ蛐ｃ盯．ＣｌｍｃｅｒＲｅｓ．２∞８，６Ｓ（７）：２０９４～２１０５

６ｋ抽１ａ】∞Ｕ．Ｈａ瓣ｎｅｉｃｒＢ，Ｒ伽阳伽Ｄ，ｅｔｄ．Ｅｔ，ｉｇｅｎｅｆｉｅｉ删Ⅵ帕ｏｎｏｆｍｉｃｍＲＮＡ

ｇｅｎｅｓｉｎｍｍｎｍａＩｙ

ｃａｒｃｉｎ眦ＶｅｒｂＤ坞ｃｈＧｃｓＰａｌｌａｏｌ，２１１１１７，９１：２１４～２２０

７ＣｈｕｇＪＣ，ＪｏｎｅｓＰＡ．Ｅｐｉｇｅｎｅｄｅｓａｎｄｍｉ∞ＲＮＡｓ．Ｐｅｄｉａ仃Ｒｅｓ，２∞７，６１（５ｐｔ２１：２４Ｒ～２９Ｒ

８Ｋ皿皿ＭＳ，Ｅｎｋｅｌ距ｄＳＪ，ＰｅｓｔｅｒＲＥ，椰０．ＳｕｐＰ嘲ｊ衄ｏｆＩＩＩＨＩ－

ｍａｌｌｃｅｌｌｌｍｇｎｌｍｏｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ

ｂｙｔｈｃｌｅｔ－７ｍｉｅｒｏｌｌＮＡ缸ｌｙ．ＰｍＮ硼ＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，２∞８，Ｉ惦（１０）：３９０３～３９０８

９ＳａｉｔｏＹ，Ｌ妇唱Ｇ＇Ｅ黯剪Ｇ，毗ｄ．Ｓｐｅｃｉｆｉｃａｃｌｉｖ矗Ｉｉ伽ｏｆｍｉｅｒｏＲＮＡ?１２７ｗｉｔｈ曲ｗｍｇｕⅢｍｏｆＩｈｅｐ∞帅ｎｃｏｇ雠ＢＣＬ６ｂｙｃｈｒ∞酬铷ｄｒｕ笋ｉｎｈｕｍａｎⅢｃｃｒｃｅｌｌｓ．妇懈Ｃｅｌｌ。

２∞｜６，９（６）：４３５～４４３

１０ＣｈａｎｇＴＣ，ＹｕＤ，ＬｅｅＹＳ，ｅｔａ／．Ｗｉｄ部ｐｒｅａｄｍｉｅｍＲＮＡ托ｐ船西衄钾Ｍｙｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ．ＮａｔＧ锄％２１）１１８，钟（１）：４３～５０

ｌｌＥ目ｑｌｌｅｌａ－Ｋ啊ｃｈ盯＾ＳｌａｃｋＦＪ．ｏ玎∞ｍｉｒ蛐ｉ唧删Ａｓ１Ⅳｉｔｈ８ｒｏｌｅｉｎ

ｃ∞ｏ％ＮａｔＩｔ“Ｃａ∞既＇２００６，６（４）：２５９～２６９

１２ＭｅｌｔｚｃｒＰＳ．Ｑ哪盯ｇｅａ咖：蚺ａｌｌ砌ｑ＾点ｗｉｔｈｂｉｇｉｍ辨ｃ忸．ＮａｔｌⅡ岛２∞５，俩（７０４３）：７４５～７４６

１３Ｌ越Ｊ＇Ｃ，ｅｔｚＧ，ＭｉｓｋａＥＡ，玎耐．ｍｉｃｒｏＲＮＡ唧咄协ｐｒｏｆｉｌｅｓｅｌａｇｉ白ｈｕｍａｎ∞ｎⅫ．Ｎ砸玳，２０１１５，４３５（７０４３）：８３４～８３８

１４Ｊｏ蝴ＰＡ，ＢａｙｌｉｎＳＢ．Ｔｈｅｆｍａ＆ｍａｅｎ恤ｌｒｏｌｅｏｆｅｐｉｇｅｎ硎ｅｅｖｅｎｔｓｉｎ

ｃｍｃ∞ＮａｔＲｃ’，Ｇ∞ｅ‘，２００晓．３（６）：４１５～４２８

１５Ｆｒａｌ尊ＭＦ，勘ｔｅｌｌｅｒＭＴｏｗａｒｄｓｔｈｅ

ｈｍｃａｎｃ口ｅｐｉ鲫ｏｍｃ：ａ丘嘲击ａｆｔｏｆｈｉｓ咖ｅｍｏｄ硷ｃ撕∞ｓ．ｃｅｕＣｙｃｌｅ，２１１１１５，４（１０）：１３７７～１３８１

１６ＳａｉｔｏＹ．Ｊ∞ｅｓＰＡ．Ｅｐｉｇｅａｅｔｉｅ柚ｃｔｉｖ娟锄ｏｆｔｇｌｎｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｍｉｃｒｏＲＮＡｓｉｎｈｕｍａｎ∞ｎｃ“ｃｅｌｌｓ．ＣｅｌｌＣｙｃｌｅ，２００６．５（１９）：２２２０

２２２２

１７圳蛆－ｂｉｏ＾Ｒｃｌｐｃ∞Ｓ，ＢａｌｌｅｇａｔｒＥ，ｅｔａｆ．Ｇｅ删ｉｃ衄删蛐０ｆ锄ｃｐｉｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｓｉｌｅｎｃｅｄｍｉｃｆｏＲＮＡ缸ｈＩⅡｎ∞Ⅲｃ玎ｅｅｌｌｓ．Ｃ黼Ｒ船，２１１１１７，６７（４）：１４２４～１４２９

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ｄ．ＤＮｍｌ蛐ｄＤＮ～仃’３ｂｃ∞供租忙ｔ０ｓｉｌｅｎｃｅｇｅｎｅｓ．ｍ

ｈｕｍａｎ锄ｃ盯ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ，２００２，４１６（６８８０）：５５２～５５６

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ＪＣａｎｃｅｒ，２００８，１２烈５）：９６３～９６８

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ｈｍｍａｃａⅡｃ盯ｃｅｌｌｓ．Ｃｈｎ泔Ｒ髓。２００７。６７（４）：１４２４～１４２９

２３ｌｍ＇ｉｏＭＶ，ＶｉｔａｅＩｔ，蹦Ｌｃ垤Ｇ，ｅｔ缸．ｍｉｅｒｏｌｉＮＡｓｉ朗咖璐ｉｎｈｕｍａｎｏｖ蚵∞ｍｃ目．Ｃ∞ｏ日Ｒｅｓ，２１１１１７，６７（１８）：８６孵～８７０７

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（４０）：１５８０５～１５８１０

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Ｉ．Ｃ－Ｍ￥／ＭＳｍｅｔｈｙｌ．Ｎ∽ｌｅｉｅＡｃｉｄｓＲ船，２００７，３５（５）：ｅ３ｌ

３１Ｂ∞Ｎ．ＬｙｅＫＷ。ＢａｒｔｏｎＭＬｍｉｃａ－ｏＲＮＡｂｍｄｉ雌ｓｎｅｓｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｃｌａｓｓⅢＩｔＩ）－ＺＩＰｍｌｔ／ｑＡｓａ坤ｍｑｌｌ砌ｆｏｒ

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Ｒｂｌ２ｄ币ｅｎｄ∞ｔｍｇＩｌｌ弼∞ｏｆＤＮＡｍｅｔｈｙｌ哑ｆ１．ＮａｔＳｍｕｔＭｏｌＢｉｏｌ，２００８，１５（３）：２６８～２７９

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３６ＭａｃｋＧＳ．ＦｏｉｇｅｎｃＩｉｃｃａｎｃ日ｔｈｅｒａｐｙｍａｌｃｅｓｈ嘲ｄｗ娣ＪＮｓｔｌＣ姐ｃｅｒ

ｈｓＬ２００６．９８（２０）：１４４３～１４４４

３７ＡｓｈｏｋＳ，Ｂｌｌａｇｗ砒ＡＳ，ＲｏｌⅫｅ．ｓＲＪ．Ｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅ５－…ｙｔｉｄｉｎｅ蜘ｓ砌ｖ畸ｏｆ肪ｃｋ廊舰ｃｏｉｌＫ－１２．ＪＢａｃ蹦ｏｌ，１９８７，

１６鲥４’：１５３７～１５４６

３８Ｐｈ柚ＲＴ，Ｉ）ａｌｌａ

Ｆａｖｅ∞ａ瓦‰ＢＣＬ６ｐ删帅ｎｃｏｇ翎ｃ鲫ｐｐ懈瞄ｐ５３ａ【ｐｆ嘲ｓｉ‘加ｉｎ舯ｊｎａｌ－ｃ即ｔｒｅＢｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ，２００４，４３２（７０１７）：６３５～６３９

３９ｈ巧哪ｂｉｏ＾Ｅｓ耐ｌｅｒＭ．ｃｐｏｉｓｌａｎｄ

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ｍｉ啪ＲＮＡｓｉｎｈ眦柚钼ｎ糟ｒ．ｃｋⅡＣ－≯ｃｌｃ，２１１１１７，６（１２）：

万方数据

?１３５０?生物化学与生物物理进展Ｐｒｏｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２００８；３５（１２）

１４５５～１４５９

４０ＫｕｍａｒＭＳ，ＬｕＪ，ＭｅｒｃｅｒＫＬ’ｅｔ缸．Ｉｍｐａ／ｒｅｄｍｉｃｒｏＲＮＡｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｅｒｔｈａｎｃｃ，ｓｃｃｌｌｕｌａｒｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ．ＮａｔＧ胁ｃｔ．２００７，３９０）：６７３～６７７４１ＳｉｎｋｋｏｎｅｎＬ＇ＨｕｇｃｎｓｃｈｍｉｄｔＴ，ＢｅｒｎｉｎｇｅｒＰ＇甜一．ｍｉｃｒｏＲＮＡｓｃｏｎｔｒｏｌｄｅｎｏｖｏＤＮＡｍｃｔｈｙｌａｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌＭｐ坨ｓ∞体ｉｎｍｏｔｔｓｃｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｃｌｉｓ．Ｎａｔｕ∞Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ＆ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２００８，１５（３）：２５９～２６７

ＴｈｅＲｅｃｉｐｒｏｃａｌＭｏｄｕｌａｔｉｏｎＢｅｔｗｅｅｎＥｐｉｇｅｎｅｔｉｃａｎｄｍｉｃｒｏＲＮＡａｎｄＴｈｅＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｆｏｒＴｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＭａｌｉｇｎａｎｔＴｕｍｏｒｓ＋

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ＣＡＩＲｏｕｇ．Ｔｅｌ：８６－５７１—８６８４３１８５．Ｅ—ｍａｉｌ：ｃａｉｒｏｎ９８０１＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｏｍ

ＱＩＡＮＣｈｅｎｇ．Ｔｅｌ：８６－５７１?８６８４３１８２．Ｅ－ｍａｉｌ：ｅｑｉａｎ３１８４＠ｙａｈｃｍ．ｍ１．∞

ｌ㈧ｖｅｄ：Ｍａｙ２５，２００８Ａｃｃｅｐｔｅｄ：ｓｃｐ胁ｂ目２２，２００８

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