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反相高效液相色谱法测定接骨胶囊中阿魏酸的含量
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?【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解决您在论文写作中的难题。
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?反相高效液相色谱法测定接骨胶囊中阿魏酸的含量
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?【摘要】目的建立接骨胶囊中阿魏酸的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱：Hypersil C18 (4.6 mm 250 mm,5 m),流动相为甲醇-1%冰乙酸(33∶67),检测波长为320 nm,流速为1.0 mL/min。结果阿魏酸在0.12～1.2 g范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.6%,RSD=1.8%。结论该方法简便、准确,可用于控制接骨胶囊制剂的质量。
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?【关键词】接骨胶囊;阿魏酸;高效液相色谱法;含量测定
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保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究
保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究 发表时间：2014-08-26T15:20:35.077Z 来源：《医药前沿》2014年第20期供稿作者：张高飞于玥邬晓鸥李军 [导读] 本文建立的方法简单、便捷，准确性、重复性好，可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 张高飞于玥邬晓鸥李军 (深圳市药品检验所 518057) 【摘要】目的建立保健食品中人参总皂苷含量的测定方法。方法用水提取人参总皂苷类成分，经水饱和正丁醇萃取、氨试液洗涤除杂后，试样中的人参皂苷类成分在高氯酸的作用下与香草醛反应，产生特征的紫红色，在560nm下测定吸光度。结果人参总皂苷在0.0722～0.2165mg质量范围内与吸光度线呈良好的线性关系，平均回收率为95.9%。结论本文建立的方法简单、便捷，准确性、重复性好，可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 【关键词】保健食品人参总皂苷分光光度法 【中图分类号】R93 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）20-0217-02 皂苷类成分是参类中的主要活性物质, 具有滋补强壮，增强免疫，抗疲劳的功效[1]，常用的检测方法为紫外分光光度法[2-5]。目前市售含参类的保健食品有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液等，均是以总皂苷含量来评价其产品的质量和功效。其测定方法大多都是按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的方法检测[6]，在实际应用中，主要存在以下问题：1、固定的树脂柱载样量与不确定的样品总皂苷含量之间的矛盾，部分样品存在柱容量超载的情况，测定结果偏差严重。2、部分样品经过大孔树脂柱除杂后，仍存在干扰比色测定的杂质。3、操作步骤欠规范，导致测定结果重现性差。本文针对总皂苷的提取方式、以及测定过程中的参数进行研究，建立了保健食品中人参总皂苷的测定方法。 1 仪器、材料与试药 岛津UV2450紫外分光光度计；瑞士梅特勒XS105DU电子天平；上海一恒电热恒温水浴锅；人参皂苷Re(中检所，批号110754-200822，含量88.8%)；儿童装高丽红参液，舒灵胶囊，舒慰快牌胃肠液均购自市场；水为蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1供试品溶液的制备 固体试样：称取1 g样品，置100 mL容量瓶中，加水80 mL，超声提取30 min，放冷至室温，用水定容至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25 mL，进行萃取。 液体试样：吸取试样10 mL至分液漏斗中(含乙醇的保健食品，水浴挥尽乙醇)，加水至约25 mL，进行萃取。 在已处理好的试样中加入20 mL水饱和正丁醇，振摇萃取3次，取正丁醇层(必要时可离心)，合并提取液，用20 mL氨试液洗涤3次，置蒸发皿中100℃水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至25 mL量瓶中，甲醇定容，即得。 2.2 标准曲线的绘制 分别精密吸取人参皂苷Re标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL于10 mL具塞比色管中，水浴挥干溶剂，加入0.2 mL 5%香草醛冰乙酸溶液，再加入0.8 mL高氯酸，使残渣溶解，于60℃水浴加热10 min，冰浴冷却后，精密加入冰乙酸5 mL，摇匀，于560 nm波长处测定吸光度。取供试品溶液1 mL于10 mL具塞比色管中，自“水浴挥干溶剂”起操作。 3 方法学考察 3.1线性关系 取人参皂苷Re对照品0.01804 g，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，作为标准溶液，精密量取标准溶液0.4、0.6、0.8、 1.0、1.2 mL分别置10 mL比色管中，水浴蒸干，显色，以对照品的质量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：y=4.4807x－ 0.0886，r=0.9997。结果表明，人参皂苷Re对照品质量在0.0722～0.2165 mg之间与吸光度呈良好的线性关系。 3.2 萃取次数 取舒灵胶囊、儿童装高丽红参液，按2.1制备样品水提取液，用水饱和正丁醇分别萃取3、4、5次，结果表明，萃取3次可将人参总皂苷提取完全(表1)。 表1 萃取次数比较结果 3.3热稳定性考察 由于正丁醇沸点较高，为此对人参皂苷的热稳定性进行考察，以便选取合适的水浴温度。取人参皂苷Re标准溶液0.6 mL，分别按60℃、100℃水浴蒸干、100℃水浴蒸干后继续放置30 min处理，测定结果分别为0.663、0.658、0.653，表明人参皂苷的热稳定性良好，因此水浴温度选为100℃。 3.4显色稳定性 取人参皂苷Re标准溶液0.3 mL，显色后每隔10 min测定其吸光度，结果表明，显色后的紫红色溶液不稳定，吸光度呈下降趋势，因此显色完成后需在10 min内完成测定。 3.5重复性试验 取舒灵胶囊按2.1下方法制备6份供试品溶液，分别测定，结果表明本方法重复性良好(表2)。
总皂苷的测定方法
总皂苷的测定方法（分光光度法） 本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。 本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。 一、方法提要 样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后，在酸性条件下，香草醛与人参皂苷生成有色化合物，以人参皂苷Re为对照品，于560nm处比色测定。 二、仪器 1.722分光光度计。 2.PT—大孔吸附树脂柱（河北省津杨滤材厂）。 3.超声波振荡器。 三、试剂 1.甲醇（分析纯）。 2.乙醇（分析纯）。 3.人参皂苷Re标准品（中国药品生物制品检定所）。 4.5％香草醛溶液：称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至l00mL。 5.高氯酸（分析纯）。 6.冰乙酸（分析纯）。 7.人参皂苷Re标准溶液：精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg，用甲醇溶解并定容至10mL，即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。 8.重蒸水。 四、测定步骤 1.样品处理： （1）固体样品 称取1.0g左右样品于100mL烧杯中，加入20～40mL 85%乙醇，超声波振荡30min，再定容至50mL，摇匀，放置，吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣，进行柱分离。 （2）液体样品 含乙醇的酒类样品：准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中，蒸干，用水溶解残渣，用此液进行柱层析；非乙醇类液体样品：准确吸取1.0mL样品（如浓度高或颜色深，需稀释一定体积后再取1.0mL）直接进行柱分离。 2.柱层析
以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离，准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱，用15mL水洗柱，以洗去糖分等水溶性杂质，弃去洗脱液，再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，于水浴上蒸干，以此作显色用。 3显色 在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5％香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣溶解，再加0.8mL高氯酸，混匀后移入l0mL比色管中，塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出，冷却后准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后以1.0cm 比色皿、于560nm处与人参皂苷Re标准管同时比色。 4标准曲线的绘制： 吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/mL）0、20、40、60、80、100μL（相当于人参皂苷Re0、40、80、120、160、200μg），于10mL比色管中，用氮气吹干，同4.（3）显色步骤测定吸光度。并绘制标准曲线。 人参总皂苷浓度为20～200μg/mL之间与吸光度值呈线性关系，相关系数（r）0.999。 五、结果计算 式中X——样品中总皂苷（以人参皂苷Re计）（g/kg或g/L）； m——试样质量或试液体积（g或mL）； V1——样品提取液总体积（mL）； V2——样品提取液测定用体积（mL）； m1——从标准曲线查得待测液中人参皂苷Re量（μg）。
紫外可见分光光度计测人参总皂苷
人参总皂苷 Renshen Zongzaogan TOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT 本品为五加科植物人参JPanaa: ginseng C. A. Mey. 的干 燥根及根茎经加工制成的总皂苷。 【制法】取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2 小 时，第二次1. 5 小时，煎液滤过，合并滤液，通过D 1 0 1型大孔 吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用6 0 %乙醇洗脱，收集60% 乙 醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06?1.08(80°C)的清 膏，干燥，粉碎，即得。 【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末；微臭，昧苦;具 吸湿性。 本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙米或石油米 中几乎不溶。 【鉴别】（1)取本品O.lg，置试管中，加水2ml，用力振 摇，产生持久性泡沫。 (2)取本品O.lg，加甲醇10ml使’溶解，作为供试品溶液; 另取人参对照药材lg，加水100ml煎煮2 小时，滤过，滤液通 过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1cm，柱高为15cm) ,用水 洗至无色，弃去水液，再用6 0 %乙醇20ml洗脱，收集洗脱液， 蒸干，残淹加甲醇10ml使溶解，作为对照药材溶液。再取人 参皂苷R b i对照品、人参皂苷R gl对照品与人参皂苷R e对 照品，加甲醇溶解制成每lml各含2 m g 的混合溶液，作为对 照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验'，吸取上述三种溶 液各2M1，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙 酯-甲醇-水（15 : 40 : 22 : 10) 1 0 1以下放置的下层溶液为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以1 0 %硫酸乙醇溶液，在105°C加 热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365mn)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置， 日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。 【检査】粒度依法检查（通则0982第二法），能通过 1 2 0目筛的粉末不少于95% 。 干燥失重取本品，在105°C干燥至恒重，减失重量不得 过5.0% (通则0831) o 总灰分不得过6 . 0 % (通则2302)。 炽灼残渣不得过6 . 0 % (通则0841)。 重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则 2321)测定，铅不得过3mg/kg;镉不得过0. 2mg/kg;砷不得
总皂苷含量测定的方法学验证
总皂苷含量测定的方法学验证 试剂：Amberlite-XAD-2大孔树脂Sigma化学公司 U.S.A. 中性氧化铝层析用 100-200目 人参皂苷Re 购自中国药品生物制品鉴定所 正丁醇、乙醇、高氯酸、冰乙酸分析纯 香草醛溶液：称取5g香草醛，加冰乙酸并定容至100ml。 人参皂苷Re标准溶液：精确称取人参皂苷Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0ml，即每毫升人参皂苷Re2.0mg。 实验步骤： 供试品溶液：（1）试样处理：吸取2.0ml试样于25ml容量瓶中，加水定容至刻度，取1.0ml进行柱层析。 （2）柱层析：用10ml注射器作层析柱，内装3cm Amberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧化铝。先用25ml70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25ml水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0ml以处理好的试样溶液，用25ml水洗柱，弃去洗脱液，用25ml70%乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60℃水浴挥干。以此作显色用。 （3）显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2ml 5%香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加0.8ml高氯酸，混匀后移入5ml带塞刻度离心管中，60℃水浴上加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0ml，摇匀后，以1cm比色池于560nm波长处与标准管一起进行比色测定。 对照品溶液（4）标准管：吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/ml）50μl放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2 柱层析”起，与试样相同，测定吸光度值。 空白溶液（5）空白溶液：吸取甲醇溶液50μl放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2 柱层析”起，与试样相同，测定吸光度值。 1.确定最大吸收波长（波层扫描） 精密量取对照品溶液于1cm吸收池中，以空白试剂作参比，在分光光度计上从波长42-650 nm，每隔10 nm测定一次吸光度。 2.线性关系考察——标准曲线的制备： 分别紧密量取10、20、30、40、50、60、70μl对照品溶液，吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/ml）50μl放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2 柱层析”起，与试样相同，测定吸光度值。以吸收值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 3. 专属性试验： 阴性样品：辅料+无皂苷的中药 供试样品 4.精密度试验 4.1重复性 在同一批样品中取2ml样品6份，分别按照上述方法配制成供试品溶液，测定吸光度值。 4.2 中间精密度 不同日期，重复操作重复性试验。将重复性实验数据合并，共12个数据分析RSD值。 5. 稳定性试验 取供试品溶液适量，按照测定法测定吸光度值，分别在0、2、4、6、8h各测定一次。