Western blot 常用试剂配置

Western blot 常用试剂配置

1.（1）10 X SDS 电泳缓冲液（储备）

Tris-base（FW 121.1，0.25M）30.3g

Glycine （FW 75.1,1.92M）144.0g

SDS （1% ，w/v）10.0g （SDS有毒且分子量小，易飞，称量时动作要轻柔，并带口罩）

加适量去离子水磁力搅拌下溶解（不调pH），定容至1000ml，棕色瓶室温储存可以用6个月。

（2） 1 X SDS 电泳缓冲液

取10 x SDS 100ml，加蒸馏水定容至1000ml，混匀备用。

2.（1）10 x 转膜缓冲液（solarbio）不含SDS

可自配，配方与10 x SDS 电泳缓冲液（储备）相似，不加SDS。

Tris-base（FW 121.1，0.25M）30.3g

Glycine （FW 75.1,1.92M）144.0g

加适量去离子水磁力搅拌下溶解（不调pH），定容至1000ml，棕色瓶4℃储存。

（2）1 x 转膜缓冲液：

10 x 转膜缓冲液100ml ＋甲醇200ml 加DW （700ml）定容至1000ml。

（可重复使用1-2次，适当补充少量甲醇）

3. 20 x TBS

1 x TBS-T 配置：取20 x TBS 25ml，Tween-20 500ul，去离子水定容至500ml，混匀备用。4℃储存。

4. 10% 过硫酸铵（Ammonium Persulfate，APS，FW228.2）配置

APS 0.1g +DW 1ml，混匀，分装160ul 管，4℃保存一周。（-20℃保存时间长）5.10%封闭液配置：脱脂奶粉2.5g，加1x TBS-T 25ml,磁力搅拌20-30分钟至完全溶解，4℃短期保存。

6. 5% BSA （贵）封闭液配置：BSA（淡黄色颗粒）4℃储存，2g，加TBS-T 40ml，磁力搅拌20-30min至完全溶解，4℃短期保存。

7.β-actin 配置，1:1500，分子量大约43

8. 叠氮钠，1:1000稀释一抗，延缓其腐败，稀释后4℃储存，一周内用完（一般用2-3次，膜最多用2次。

Western blot试剂配方

SDS-PAGE相关试剂、缓冲液的配置方法 1.5M Tris-HCl 组分浓度：1.5M 配制量：200ml 配制方法：1.称量下列制剂，置于250ml蓝口瓶中。 Tris-base 36.33g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.调pH=8.8(在磁力搅拌器上进行)，定容至200ml， 4℃保存 1.0M Tris-HCl 组分浓度：1.0M 配制量：200ml 配制方法：1.称量下列制剂，置于250ml蓝口瓶中。 Tris-base 24.22g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.调pH=6.8(在磁力搅拌器上进行)，定容至200ml， 4℃保存 1.0M Tris-HCl 组分浓度：1.0M 配制量：200ml 配制方法：1.称量下列制剂，置于250ml蓝口瓶中。 Tris-base 24.22g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.调pH=7.5(在磁力搅拌器上进行)，定容至200ml， 4℃保存 10%SDS （W/V）组份浓度：10%（W/V）SDS 配置量：200ml 配制方法： 1.称取2g SDS。 2.加入200ml的去离子水后搅拌溶解。 注意：溶解定容SDS时不宜剧烈摇晃，避免产生过多的泡沫；10%SDS溶液在低温是易析出晶体，可以置于70℃溶解。 30%（W/V）丙烯酰胺组份浓度：30%（W/V）Acrylamide 配制量：200ml 配制方法：1.称量下列制剂，置于1L烧杯中。 丙烯酰胺58g N-N亚甲基双丙烯酰胺2g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.加去离子水将溶液定容至200ml，用定性滤纸滤去 杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。

常用试剂的配制

1、2，4－二硝基苯肼溶液 I．在15mL浓硫酸中，溶解3克2，4－二硝基苯肼。另在70mL95％乙醇里加20mL 水，然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。 Ⅱ．将1.2克2，4一二硝基苯肼溶于50mL30％高氯酸中，配好后储于棕色瓶中，不易变质。 I法配制的试剂，2，4－二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水中醛且较稳定，长期贮存不易变质。2、卢卡斯（Lucas）试剂 将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融，稍冷后放在干燥器中冷至室温。取出捣碎，溶于23mL浓盐酸中（比重1.187）。配制时须加以搅动，并把容器放在冰水浴中冷却，以防氯化氢逸出。此试剂—般是临用时配制。 3、托伦（Tollens）试剂 I．取0.5mL10％硝酸银溶液于试管里，滴加氨水，开始出现黑色沉淀，再继续滴加氨水，边滴边摇动试管，滴到沉淀刚好溶解为止，得澄清的硝酸银氨水溶液，即托伦试剂。 Ⅱ．取一支干净试管．加入1mL5％硝酸银，滴加5％氢氧化钠2滴，产生沉淀，然后滴加5％氨水，边摇边滴加，直到沉淀消失为止，此为托伦试剂。 无论I法或Ⅱ法，氨的量不宜多，否则合影响试剂的灵敏度。I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱，在进行糖类实验时，用I法配制的试剂较好。 4、谢里瓦诺夫（Seliwanoff）试剂 将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至100mL。 5、希夫（Schiff）试剂 在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐，放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释至200mL。 或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加入0.2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200mL。 此外，也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加入0.5g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。 本试剂所用的品红是假洋红（Para-rosaniline或Para-Fuchsin），此物与洋红（Rosaniline或Fuchsin）不同。希夫试剂应密封贮存在暗冷处，倘若受热或见光，或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红包。遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。但应指出，试剂中过量的二氧化硫愈少，反应就愈灵敏。 6、0.1％茚三酮溶液 将0.1g茚三酮溶于124.9mL95％乙醇中，用时新配。 7、饱和亚硫酸氢钠 先配制40％亚硫酸氢钠水溶液，然后在每100mL的40％亚硫酸氢钠水溶溶液中，加不含醛的无水乙醇25mL，溶液呈透明清亮状。 由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3?10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜，然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解力止，配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。 8、饱和溴水 溶解15克溴化钾于100mL水中，加入10g溴，振荡即成。 9．莫利许（Molish）试剂

高中生物教材实验归纳

高中生物教材实验归纳

蛋白质鉴定蛋白质双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清 先加A液，后加 B液，摇匀使用 尿糖检测葡萄糖葡萄糖试纸有色水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样” 无 绿叶中色素的提取和分离四种色素 提取液：无水 乙醇；分离 液：层析液 画滤液细线 细、直、干燥 后重复画 胡萝卜素： 橙黄色；叶 黄素：黄色； 叶绿素a： 蓝绿色；叶 绿素b：黄 绿色 新鲜的绿叶 (如菠菜叶) 层析液不能 没及滤液细 线（防止色素 溶解） 加入二氧化硅： 研磨充分；碳酸 钙：防止研磨中 色素被破坏 酒精酸性重铬酸钾溶液（橙色）灰绿色 CO2澄清石灰水石灰水混浊溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄学习、研究性课题调查对象统计方法计算公式 调查人群中遗传病人类某种 遗传病 汇总法发病率＝ 患病人数 被调查人数 ×100% 最好选取群体中发病率较高 的单基因遗传病 发病率广大人群进行调查 遗传方式患者家系 种群密度调查要随机取样活动强动 物 标志重捕法 初次捕获个体数 总数N ＝ 重捕中标志个体数 重捕个体数 植物、活 动弱动物 样方法 所取各样方的种群密度和所 取样方数（取平均值） 土壤中小动物类群丰富度土壤中的 小动物 取样器取样法记名计算法、目测估计法 探究培养液中酵母酵母菌抽样检测法血球计数板显微计数

(1) 制作DNA分子双螺旋结构模型、建立减数分裂中染色体变化模型—构建物理模型法。血糖调节的模型—构建概念模型和物理模型法；种群数量增长模型—构建数学模型。 (2) 分离各种细胞器——差速离心法。证明DNA半保留复制——密度梯度离心法。 (3)分离叶绿体中的色素——纸层析法。观察线粒体——活体染色法；观察叶绿体——活体观察法（无需染色）。观察根尖分生组织细胞的有丝分裂、低温诱导染色体数目变化——死体染色法。 (4) 探究酵母菌的呼吸方式——对比实验法（有氧呼吸和无氧呼吸进行相互对照）和产物检测法。 (5) 制备细胞膜的方法——（渗透作用）吸水涨破法。取材：人和其他哺乳动物成熟的红细胞(无核膜和各种细胞器膜)，不能用禽类和两栖类动物的红细胞，有细胞核和众多细胞器。 (6) 恩格尔曼水绵实验——通过好氧细菌确定释放氧气的部位在叶绿体（自变量：光照和黑暗；因变量：好氧菌聚集部位） (7) 假说—演绎法：①孟德尔发现基因的分离和自由组合定律②摩尔根证明基因在染色体上③证明DNA的复制方法是半保留复制 (8) 萨顿提出“基因位于染色体上”的假说——类比推理法 (9) 同位素标记法：①研究分泌蛋白的合成和运输②鲁宾和卡门证明光合作用产生的氧气中的O全部来自于H2O（自变量：标记物H218O和C18O2,因变量：O2的反射性） ③卡尔文追踪CO2中的C在光合作用中的转移途径（卡尔文循环）④赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验⑤DNA半保留复制 (10)提纯，鉴定—艾弗里的实验；离心技术——噬菌体侵染细菌实验，DNA半保留复制。 (11)探究温度对酶活性的影响:材料——淀粉和淀粉酶,不能使用过氧化氢(化学性质不稳定，受温度影响易分解)。检测试剂不能用斐林试剂宜用碘液。

七、项目主要人员配置

项目主要人员配置 1、施工技术人员配备 选派经业主确认的项目经理与施工经验丰富的技术人员组建项目部，坚持以才任职，以能定岗，因事设职，因职选人的原则，将施工经验丰富、有创新精神、工作效益高、年富力强的同志推上主要岗位，确保项目部精干、高效，本项目部拟投入的现场主要施技人员配备见附表。 2、项目经理常驻现场承诺 a.项目经理代表法人在工程质量、工期、安全等方面向业主负责，并确保工程总目标的实现。 b.本工程施工期间，不再参加其它任何中小型项目的投标工作及不再兼任其它项目管理工作，确保全身投入本工程施工中。 c.每天在现场工作时间不少于8 小时，且每周不少于5 个工作日，因事外出需例行请假制度，未经业主、监理同意，擅离工地一天愿意接受业主招标约定的处罚。 d.资格预审材料中明确的项目经理、技术负责人及专项质量员，保证施工全过程不变动，否则愿接受招标约定的罚款乃至终止合同。项目部成员若因工作不负责任，不能满足业主的要求，将报业主同意予以更换。 e.现场不设常务经理、执行经理，以免使项目经理不成为事实上的工程实施者和第一责任人 3、施工技术人员管理职责： 工程建设指挥部总体策划，从组织、机械、财务与技术等方面为一线排忧解难，并进行检查督促，及时扭转工作中的不足。 项目部授权对业主与工程负责，其主要管理职责如下： (1)项目经理： 负责监督、协调现场的施工、供应、财务等各方面的工作，负责与顾客、厂商等外单位联系与协商，项目经理是工程项目施工的决策者、管理者、组织者和责任者。 a.认真会审图纸，领会设计意图，明确施工要求，按规定要求组织编制详尽而科学的项目质量计划并负责实施。

b.坚持公司“质量第一、用户至上”的质量方针和质量目标。按公司质量体系文件的要求开展质量创优活动。 c.常驻工地，调度和指挥生产，检查和落实安全生产，确保质量体系有效运行，对发生的安全、质量、机械及其它重大事故，根据“三不放过”原则，及时调查处理，并向公司报告。 d.组织劳动竞赛，表扬奖励先进，加强职工队伍建设，提高队伍的思想、文化、技术素质。 e.加强材料管理，掌握材料信息和市场行情，督促材料部门按规定要求进行采购、检验、贮存和发放等。 f.认真贯彻国家和上级有关财经政策和财经纪律，执行公司财务制度和规定，节约开支，经常分析财务收支情况。 g.运用和推广新技术、新材料、新工艺，积极开展技术革新活动。 h.主持召开工作例会，研究解决生产和行政上的重大问题。 (2)项目副经理： 协助项目经理工作，负责施工现场的管理与生产调度工作。 (3)专业施工员： a.认真学习施工图纸，参加图纸会审，领会设计意图，贯彻执行项目质量计划，按照公司质量体系文件的规定开展一切活动，具体负责一个或数个单位工程的施工管理。 b.组织做好单位工程施工前的各项准备工作，负责场地布置，搭建临时设施，单位工程定位，测量放线。 c.负责设计变更及技术核定的签证，做好分部项工程的隐蔽验收与工程质量检查验收及评定工作，按规定填写质量记录和质量体系运行记录。 d.编制单位工程月度作业计划，指导班组编制旬作业计划。 e.负责过程检验和试验的具体工作，并对其负责。 f.做好分管工作范围内班组与工种之间及工序衔接的平衡调度工作。 g.认真向工人技术交底，交施工规范及操作规程，交质量要求，交作业时间，交安全措施，并经常检查督促。 h.记好“施工日记”，填报开竣工报告、停工报告、质量事故和返工报告、

实验室常用溶液及试剂配制(重新排版)

实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4） 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱

高中生物实验颜色变化汇总

生物：高中生物实验颜色变化汇总 1斐林试剂检测可溶性还原糖 原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用，而且是现用现配，条件需要水浴加热。 应用：检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。 2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪 原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色 注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察。 应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪。 3双缩脲试剂检测蛋白质 原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色 注意：双缩脲试剂在使用时，先加A液再加B液，反应条件为常温(不需要加热)。 应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。 4碘液检测淀粉 原理：淀粉+碘液→蓝色 注意：这里的碘是单质碘，而不是离子碘。 应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉 5DNA的染色与鉴定 染色原理：DNA+甲基绿→绿色 应用：可以显示DNA在细胞中的分布。 鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色 应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。 6吡罗红使RNA呈现红色 原理：RNA+吡罗红→红色 应用：可以显示RNA在细胞中的分布。 注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂，而不是单独染色。

7台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理：正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。 应用：区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。 8线粒体的染色 原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。 应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。 9酒精的检测 原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。 应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。 10CO2的检测 原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。 应用：根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短，可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。 11染色体(或染色质)的染色 原理：染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色。 应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂。 12亚硝酸盐的检测出现玫瑰红 原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。 应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。 13脲酶的检测 原理：细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，使PH升高，从而使酚红指示剂变红。 应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂，培养某种细菌后，看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。 14伊红美蓝检测大肠杆菌

品质部人员配置规划

×××电子有限公司 品保部人员配置规划---2013年度 为顺利达成公司2013年度既定质量目标，对来料、制程、出货进行有效监控，保证产品质量符合要求，现对2013年度品保部各岗位人员配置规划如下： 1.品保经理1 名 岗位目的 根据公司质量方针和质量目标，制订并组织实施本部门2013年度的质量管理制度和目标，组织下属开展标准化体系的维持以及产品的标准管理和产品质量异常处理等工作；参与新产品的质量策划，作出相应预防措施，控制检测费用和人工成本，提高工作效率和服务质量，定期执行质量工作汇报，以满足公司各部门业务和客户的需要。 工作职责 见下表1

1 名（） 岗位目的 根据公司业务和客户的需要，为达成本部门质量方针目标，协助部门主管组织质量管理体系及相关产品认证的实施与审核，对新产品、新技术、新工艺、新要求的跟进，对公司物料及供应商所有产品ICP数据有效期进行监控，主导客户投诉与客户退回品的调查与处理，并跟踪改善措施的落实情况，对客户资料的填写及客户要求对内传达。 岗位职责 见下表2

3. QA 1 名（） 岗位目的 根据公司发展和体系管理的需要以及本部门质量检验和检测工作计划和目标，组织下属开展原辅材料、产品和生产过程检验、检测等工作，保证检验结果的准确性和及时性，对生产现场异常情况即时处理，合理安排并考核下属工作，生产品质报表的作成。 岗位职责 见下表3

4. 文员 1 名（） 岗位目的 根据公司和部门工作的需要，制作部门人事管理报表，各类文件的收，发控制存档，部门内办公用品的管理，各类品质报表的作成，为本部门领导和员工提供服务和业务便利，以实现本部门的质量管理目标。 岗位职责 见下表4

western blot实验步骤

Western bolt 一、实验目的 通过实验了解western blot技术的原理和操作。 二、实验原理 SDS-PAGE是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。 PAGE能有效的分离蛋白质,主要依据其分子量和电荷的差异,而SDS-PAGE的分离原理则仅根据蛋白质的分子量的差异。 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠），SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane，简称NC膜)，在胶体金试纸中用做C/T线的承载体，同时也是免疫反应的发生处。NC膜是生物学试验中最重要的耗材之一。 第一抗体就是能和特异性抗原特异性结合的蛋白。第二抗体是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。 化学发光HRP底物（辣根过氧化物酶底物，也常被称为ECL试剂）是目前Western blot检测中最为灵敏的试剂。显影液的A液主要成分为鲁米诺（Luminol）及发光增强剂，B液主要成分为过氧化物溶液。二抗上含有HRP（辣根过氧化物酶），可以催化A液和B液反应发光。 三、实验器材 1.电泳槽，胶板架子 2.转膜仪 3.NC膜 4.电泳电源 5.滤纸 6.摇床 7.X射线摄影暗匣 8.X射线胶片 9.塑料薄膜 四、实验试剂 1.runningbuffer 5xrunningbuffer(1L) Tris 15.1g

常用实验试剂配制

1DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC 根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris 1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。 3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA 1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压) 将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。 30.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris 4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0）柠檬酸钠88.2g DEPC水1000ml 分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用 5 HEPES 溶液HEPES 23.8g (ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml 6 50X Denhaldt′s 液 聚蔗糖（Ficoll 400）0.2g 聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g 牛血清蛋白（BSA）0.2g DEPC 水20ml 7 预杂交buffer Deinoized formanmid 5ml 20X SSC 1.5ml 1M HEPES 0.5ml 50X Denhanldt′s液1ml 龟精DNA 0.6ml(4ug/ul) DEPC水 1.4ml 龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性，随即冰浴。杂交buffer分装后-20℃保存。 8Washing buffer (ph7.5) maleic acid 5.8g NACL 4.4g Tween（吐温） 1.5ml 定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween 9Maleic acid buffer (ph7.5) Maleic acid 5.8g Nacl 4.4g 定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 10Detection buffer

高中生物所有实验试剂作用归纳

高中生物实验试剂归纳 1、斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。 用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。 2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。 和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 3、双缩脲试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。 用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。 4、苏丹Ⅲ： 用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。 用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。 5、二苯胺： 用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。 6、甲基绿： 用于鉴定DNA。 DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。 7、50%的酒精溶液：

在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。 8、75%的酒精溶液： 用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。 75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。 9、95%的酒精溶液： 冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 10、15%的盐酸： 和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml) 用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。（也可以用醋酸洋红染色） 12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁： 用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14、碘液： 用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。

品质部组织架构调整方案 新

阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根 【品质部组织架构调整方案】 批准审核制定 陈杰 目前人员配置概述及分析一.人检验人员已提出辞职，1人，管理人员2人， 其中有目前品质部检验人员共6月份新入职的员工，工作技能相对较欠缺。从目前的工作需求来看，在22人为才能满足目前品质部的正常工作人，不包含已提出辞职的人员，至少还需配置4 分配。目前的工作分配明细如下表： 所在岗具体工作内姓入职时编1陈宽陈2 非标玻璃全验（跟线）黄大权 3 跟线 跟线非标玻璃全验（跟线）邓锐智 4 零配件检验李扬 5 IQC （五金、塑胶）IQC 石基、包材叶建荣 6 IQC 铝材检验（跟线）董青原7 胶条配单 8 邓春娇 从以上的工作分配来看，QC的职能分配并没有涵盖到整个公司的品质管控系统，且我认为个别岗位的QC职责实际与本身QC的职责是有较大偏差的，人划分在品质部，但并没有起到及发挥一个QC人员本身职能与作用。就如配置胶条、石基及玻璃全检我认为就是一个较好的例子。 另外，目前的工作分配只涵盖到IQC岗位，甚至涵盖的检验范围也是不全面的，特别是包材，玻璃、五金配件等这些常规性物料，在没有经过IQC进料检验的情况下直接投产，认为在生产前进行“全检”一下就可以发现不良的做法，不仅给生产及后工序检验带来了较大的困扰和压力，也从一定程度上延长了产品的交货时间。没有真正地起到预防和控制作用，反而给客诉带来了可乘之机。

二.工作调整建议 目前，对于由QC来担任全检岗位及配单（胶条），我认为不太合理。首先，QC 的职责我认为是负起监督、监管及抽检的责任，如果由QC来负责全检，那么就从主观上默认了QC的全检职能，不仅提高了质量成本，也会对本身参与生产的一线人员的质量及责任意识更加的松懈。所以，我认为职能的转变和职责的调整是改变目前生产投诉率高的重点，不能从主观上提倡由QC负责全检的事实，并不是只有QC就能检验和发现问题，也不是非要QC才能做这个全检及配胶条的岗位，而是要从根本上转变生产一线管理人员、操作人员的质量观念、责任观念及全局观念，培养及挖掘一线人员的综合技能，把合适的人员放到合适的位置。才能发挥其真正地价值和作用，也方可实现质量稳定，追求质量和效率平衡。 法拉兹·日·阿卜——学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸收都不可耻。． 阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根 其次，鉴于目前的客诉件数较多，我认为要从根本上杜绝及减少此问题，不仅仅是要建立和健全品质管控机制，使每一个岗位有机并且有效地结合起来，也必须从岗位的实际需求及工作量出发，配置相应的人员予以管控和监督。从根本上转变和调整目前传统的工作模式，特别是品质管控部分，我认为我们不能还停留在“品质是检出来的”思维模式上，必须要从职能上真正调整和扭转品质人员的工作职能，由“检验控制”向“预防控制”转变和推进，设置合理有效地质量管控流程，从源头（供应商开发、评价、选择）开始抓起，安外揽内，推进全面质量化管理理念，设置和优化现有的管理流程、工作流程，删繁就简,形成标准化的管理文件；并结合工作实际，明确各岗位、各工序的管控要点、难点，特别是岗位与岗位间的配合，工序与工序间的衔接工作，我认为需要花更多的时间和精力去梳理。一步一个脚印，要真正把ISO质量管理体系作为提升企业管理水平及企业竞争力的有力平台，找对切入点，确切把ISO质量管理体系内容落实和贯彻下去，而不是形同虚设。这样不仅“劳民伤财”，反而会给目前的工作带来了极大的困扰和阻碍。 另外，我始终认为做好质量管理的基础是系统，而使整个系统有效落实和贯彻的基础是执行力和标准，只有落到实处，才能体现出管理效益，也才能更好地促进和提升我司的质量文化建设。但质量管理工作不是靠一个部门或一个人去推动，是需要每一个人都参与其中，集思广益、各尽其能，每一个部门、每一个岗位、每一个人员都能发挥应有的作用和价值，由始至终，形成一个循环圈。这样才能把质量管理工作做仔细，做规范，做到位。 三.部门及岗位职能规划

Western blot 常用试剂配制

Western blot 常用试剂配制 1.5 mol/L Tris (PH8.8) 1．称量181.7g Tris置于1L烧杯中。 2．加入约800 ml去离子水，充分搅拌溶解。 3．用浓盐酸调节pH值至8.8。 4．定容至1L. 5．高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的p H值随温度的变化差异很大，温度每升高1oC，溶液的pH值大约降低0.03个单位。（参照kara公司Catalog-N1） 1 mol/L Tris (PH6.8) 1．称量121.1g Tris置于1L烧杯中。 2．加入约800 ml去离子水，充分搅拌溶解。 3．按下表量加入浓盐酸调节所需的pH值。 pH值浓HCl 6.8 7.4 约70 ml 7.6 约60 ml 8.0 约42 ml 4．定容至1L. 5．高压灭菌后，室温保存。 注意：1.溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH

值随温度的变化差异很大，温度每升高1oC，溶液的pH值大约降低0.03个单位。2. 如1 mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃，并置备质量更好的Tris。 （参照kara公司Catalog-N1） 30％丙稀酰胺（100ml） 1．称量下列试剂置于烧杯中。 丙烯酰胺（Acrylamide） 29 g 双丙烯酰胺(BIS) 1 g 2．加入约60 ml去离子水，充分搅拌溶解。 3．定容至100 ml, 用0.45 μm滤膜滤去杂质。 5．于棕色瓶中4 oC保存。 注意：1. 丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成分。 （参照kara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924） 30％SDS 1．称量10 g 高纯度（电泳级）的SDS置于100~200 ml烧杯中。 2．加入约800 ml去离子水，68oC加热溶解。

2018高考生物：高中生物实验归纳(全面)

2018高考生物：高中生物实验归纳(全面)

2018高考生物：高中生物实验归纳（全面） 一、用显微镜观察多种多样的细胞 1.实验原理 (1)放大倍数的计算，显微镜的放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 (2)放大倍数的实质：放大倍数是指放大的长度或宽度，不是指面积或体积。 (3)高倍显微镜的作用：可以将细胞放大，更清晰地观察到细胞的形态、结构，有利于区别不同的细胞。 2.操作步骤 [深度思考] (1)如何区分目镜与物镜，其长短与放大倍数之间存在怎样的关系？ 提示目镜无螺纹，物镜有螺纹。物镜越长，放大倍数越大；目镜越长，放大倍数越小。 (2)为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央，再换高倍物镜观察？ 提示低倍镜下视野范围大，而高倍镜下视野范围小，如果直接用高倍物镜观察，往往由于观察的物像不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野中央，再换高倍物镜观察。 (3)如何把物像移到视野中央？ 提示物像在视野中偏向哪个方向，装片就向哪个方向移动，简称“偏哪移哪”。 (4)若视野中出现一半亮一半暗；观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊不清，出现上述两种情况的可能原因分别是什么？ 提示前者可能是反光镜的调节角度不对；后者可能是由花生切片厚薄不均匀造成的。 (5)若所观察视野中有“污物”，应如何判断“污物”位置？ 提示 [方法技巧]

1.关注显微镜使用的“4”个易错点 (1)必须先用低倍物镜观察，找到要观察的物像，移到视野中央，然后再换用高倍物镜。 (2)换用高倍物镜后，不能再转动粗准焦螺旋，只能用细准焦螺旋来调节。 (3)换用高倍物镜后，若视野太暗，应先调节遮光器(换大光圈)或反光镜(用凹面反光镜)使视野明亮，再调节细准焦螺旋。 (4)观察颜色深的材料，视野应适当调亮，反之则应适当调暗。 2.显微镜下细胞数目的两种计算方法 若视野中的细胞为单行，计算时只考虑长度和宽度；若视野中充满细胞，计算时则要考虑面积的变化。 (1)若视野中为一行细胞，高倍镜下细胞数量与低倍镜下细胞数量之比等于其放大倍数之比的倒数。 (2)若视野中充满细胞，则高倍镜下细胞数量与低倍镜下细胞数量之比等于其放大倍数之比的倒数的平方。 二、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理 2.实验步骤 [深度思考] (1)上述实验选材的标准是什么？ 提示①被检测物质含量丰富；②材料接近无色；③易取材，易操作等。 (2)实验中，在加相应试剂之前为何要留出部分组织样液？ 提示作为对照，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。 (3)鉴定还原糖时使用的斐林试剂为何要现配现用？ 提示因为斐林试剂很不稳定，容易产生蓝色的Cu(OH)2沉淀，所以应将甲液和乙液分别保存，使用时现配现用。 (4)蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色？ 提示蔗糖属于非还原糖，不与斐林试剂发生颜色反应。观察到的现象不是无色，而是蓝色 [Cu(OH)2的颜色]。 (5)在使用双缩脲试剂时，为什么要先加入试剂A，后加入试剂B? 提示先加入试剂A，造成碱性环境，只有在碱性环境中，蛋白质才容易与Cu2＋发生颜色反应。 (6)鉴定蛋白质时，加入试剂B后，如果没有产生紫色反应，可能的原因是什么？ 提示可能加入的双缩脲试剂B过量，CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2絮状沉淀，会遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察结果。 (7)脂肪鉴定实验中为什么用50%的酒精洗去浮色，而不用清水？ 提示因为苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ易溶于有机溶剂酒精中，而不溶于清水中。

western blot 相关试剂及步骤

Western Blot蛋白测定步骤 三蒸水制备后需要高压消毒 一、组织的采集 （一）器材和试剂准备： 镊子、眼科剪、70%乙醇（三蒸水配制）、1.5mL离心管、液氮 （二）步骤（以心脏为例）: 1、脱颈椎处死小鼠，读取小鼠编号 2、乙醇消毒胸部，剪开胸腔，剪下心脏（一颗心脏约100mg），排除血液，放入离心管，投入液氮中 3、组织于-80摄氏度冻存 二、组织蛋白的提取： （一）器材和试剂准备： 4mL离心管、15mL管、研磨机、镊子、冰盒、离心机、RIPA蛋白裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay，详见下载的网页）（碧云天公司）、PMSF（Phenylmethanesulfonyl fluoride，苯甲基磺酰氟，详见下载的网页prod号36978，Thermo Scientific）、70%乙醇、三蒸水 （二）步骤 1、准备好三管10mL70%乙醇、一管三蒸水；取出RIPA和PMSF解冻 2、按照1mLPIRA ：10uLPMSF ：100mg组织的比例，加试剂和组织于4mL离心管 3、按照三管10mL70%乙醇、一管三蒸水的顺序依次洗涤研磨钻头（每管5秒），再研磨组织，上下且圆周运动离心管。每管研磨的转速和时间保持一致。当出现大量泡沫时即可停止 4、静置于冰盒30分钟 5、12000rpm，4摄氏度，30分钟 6、先取100uL上清于离心管，再取300uL上清于离心管。前者用于测试，后者备用。-80摄氏度冻存。 注意：购置的RIPA不宜反复冻融，需分装-80摄氏度保存；PMSF为晶体状，购置后按照说明书溶于异丙醇，分装-80摄氏度保存

高中生物实验总结

高中生物实验总结 实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA 绿色（甲基绿试剂），RNA 红色（吡罗红试剂） 分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 实验二物质鉴定 还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹III ～橘黄色 脂肪 + 苏丹IV～红色 蛋白质 + 双缩脲试剂～紫色反应 1、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） ★模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

主要管理人员及工程技术人员的配备计划

第七章项目组织管理机构 第一节项目管理设想 根据工程所处位置及现场踏勘情况，结合本工程特点，提出项目管理的总设想和方案为：以务实创新、争创一流的精神，交付完美产品为目标，严格履行合同的承诺，铸造用户满意工程。 我们将以ISO9001质量保证体系；OHSA18001职业健康安全管理体系；ISO14001环境管理体系为标准，将本工程列入我公司的重点创优工程，实施项目法管理，成立项目经理部，负责本项目的具体运作，公司参与本工程项目重大问题的决策，切实做好重点调配、重点管理、重点实施、重点保证。 第二节项目管理模式 本工程采用项目法管理，项目经理作为整个工程的直接责任者。为确保工程的按时、优质、高效的完成，我们公司将选派有类似工程管理经验，由多次创出优质工程的项目经理为首，挑选最优秀的管理干部和专业工程技术人员在现场成立工程项目经理部，全权组织施工生产及日常工作，对工程项目的工期、质量、安全、成本等综合效益进行高效率有计划地组织协调和管理，项目经理部配备生产、技术、质量、安全、预算、材料、财务等职能人员负责从施工准备、技术管理、生产组织、质安监控、文明施工、材料供应到竣工验收和工程结算等方面全过程管理，并对建设单位全面负责。 为规范本项目的管理工作，项目经理部将执行公司颁布的《项目管理手册》《质量保证手册》和《CI 工作手册》。 我们公司有信心通过完整的管理体系，忠于职守的工作态度，充足完善的后勤保障，在保证质量与安全的前提下确保按期完成，铸造用户满意工程。

第三节项目管理机构 由于本工程工程量大，根据本工程特点专设项目副经理一人，其直接在项目经理和总工程师的领导下开展工作。本工程设项目经理一人，设项目总工程师一人，设项目土建、安装副经理各一人，其下设技术员、施工员、质量员、安全员、资料员、材料员、设备员、统计员、核算员、预算员等各个岗位。 第四节项目部主要成员岗位职责 1、项目经理 （1）认真贯彻执行国家有关法律、法规、政策和企业各项规章制度。 1）根据签订的工程项目承包合同，组织制定各项经济技术指标及保证措施，履行承包合同各项条款。 2）制定项目部各项管理规章制度，并监督其执行情况。 3）搞好工程项目施工组织，生产经营，合理配置生产要素，协调和处理与工程项目有关的内外部关系，保证工程工期，文明施工，安全生产。 4）贯彻公司质量方针，建立健全项目质量保证体系。落实岗位质量责任，保证质量体系有效运行，使工程项目达到预定质量目标。为用户生产满意的工程产品。 5）严格财经制度和财经管理，抓好项目核算，确保成本指标完成，搞好项目内部效益工资分配，促进项目施工顺利进行。 6）工程达竣工条件后，做好交付准备，参与工程竣工验收，对交付中提出的问题制定措施及时整改。 7）负责工程竣工后保修期间的维修组织工作。 8）按规定时间听取下属汇报，对出现的问题及时处理。

Western_blot_试剂配制及操作流程

Western-Blot操作流程 试剂配制 1.RIPA裂解液： 10mM Tris（MW121.14，PH7.5） 1%NP40 0.5%TritonX-100 0.2%脱氧胆酸钠 2 mM EDTA 1 mM PMSF 20%甘油 调pH值至7.5。 混匀后4℃保存，长期保存于-20℃。使用时，加入蛋白酶抑制剂cooktail。 制胶用（1-6）： 1. 1.0mol/L Tris〃HCl （pH6.8） Tris (MW121.14) 12.114g 蒸馏水 100ml 溶解后，（用浓盐酸调pH至6.8），室温下保存。 2. 1.5mol/L Tris〃HCl（pH8.8） Tris (MW121.14) 18.671g 蒸馏水 100ml 溶解后，（用浓盐酸调pH至8.8），室温下保存。 3.10％SDS SDS 10g 蒸馏水至 100ml 如溶解困难，可在50℃水浴下溶解，室温保存。 如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。 4.10％过硫酸胺（AP） 过硫酸胺 0.1g

（现用现配，可先将过硫酸胺干粉称好分量后放在1.5mlEP管中，一次性多装几管，使用时加入蒸馏水水即可，溶解后，4℃保存，保存时间为1周） 5．四甲基乙二胺原液（TEMED）： 4?C保存。 6．30%丙稀酰胺： 4?C保存。 10%下层胶，即分离胶（两块胶，15ml）：胶的浓度根据自己所做蛋白的大小确定依次加入去离子水 5.9ml 30%丙烯酰胺 5ml 1.5M Tris-HCl（pH8.8） 3.8ml 10%SDS 150μl 10%AP 150μl TEMED 6μl 每加一种成分随即摇匀，为了加快凝胶，可以将过硫酸胺和TEMED量加大，根据实验当时的温度适当调整，加入TEMED混匀后应即刻灌胶。灌胶后加异丙醇（1ml）消泡 5%上层胶（两块胶，6ml）： 依次加入去离子水 4.1ml 30%丙烯酰胺 1ml 1M Tris-HCl（pH6.8） 0.75ml 10%SDS 60μl 10%AP 60μl TEMED 6μl 每加一种成分随即摇匀，为了加快凝胶，可以将过硫酸胺和TEMED量加大，根据实验当时的温度适当调整，加入TEMED混匀后应即刻灌胶。 7．5X电泳液缓冲液 Tris（MW121.14） 15.1g 甘氨酸（MW75.07） 94g SDS 5.00g 蒸馏水至 1000ml 溶解后室温保存,用时稀释5倍，通常取160ml配制成800ml即可。 8．10X转膜缓冲液 甘氨酸（MW75.07） 151.1g Tris（MW121.14） 30.3g